在生殖醫學領域,卵母細胞的冷凍保存技術一直是研究的熱點,旨在提高女性生育能力的保存與利用。然而,傳統的紡錘體觀察方法往往需要對卵母細胞進行固定和染色處理,這不僅破壞了細胞的活性,還限制了對其發育潛能的深入評估。偏光成像技術,特別是Polscope偏振光顯微成像系統,通過利用紡錘體微管結構的雙折射性,實現了對紡錘體的無損觀察。這種技術無需對卵母細胞進行固定和染色,能夠在保持細胞活性的同時,實時、動態地觀察紡錘體的形態和變化。這不僅提高了觀察的準確性和可靠性,還避免了傳統染色方法可能帶來的細胞損傷和誤差。紡錘體形態的變化反映了細胞分裂的不同階段。上海無損觀察紡錘體Oosight Meta
光學相干斷層成像是一種基于低相干光干涉原理的成像技術,具有高分辨率、非侵入性和實時成像等特點。在紡錘體卵冷凍研究中,OCT技術可用于觀察卵母細胞內部結構的細微變化,包括紡錘體的形態和位置。雖然目前OCT技術在紡錘體成像方面的應用還較為有限,但隨著技術的不斷發展和完善,相信未來OCT將在紡錘體卵冷凍研究中發揮更加重要的作用。雖然MRI和超聲波成像在生殖醫學中主要用于軟組織的成像,如子宮、卵巢等病變檢測,但它們在紡錘體卵冷凍研究中的應用也值得探討。隨著技術的不斷進步,高分辨率MRI和超聲波成像技術可能會實現對卵母細胞內部結構的更精細觀察。上海雙折射性紡錘體廠家紡錘體微管的穩定性受到細胞內外多種信號的調節。
紡錘體是卵母細胞在減數分裂過程中形成的一種微管結構,負責精確分離染色體。然而,紡錘體對環境溫度、滲透壓等外部條件極為敏感,在冷凍保存過程中容易發生損傷,導致染色體分離異常,進而影響卵母細胞的發育潛力和受精后的胚胎質量。因此,如何有效監測和評估冷凍過程中紡錘體的變化,成為紡錘體卵冷凍研究的重要課題。紡錘體實時成像技術的出現,為這一問題的解決提供了可能。紡錘體實時成像技術主要利用高分辨率顯微鏡結合熒光標記技術,對卵母細胞內的紡錘體進行實時、動態的觀察和記錄。常用的熒光標記方法包括使用綠色熒光蛋白(GFP)標記微管蛋白,以及利用特定抗體對紡錘體相關蛋白進行染色。通過這些方法,研究者可以清晰地觀察到紡錘體的形態、位置、動態變化等信息,從而準確評估冷凍過程中紡錘體的穩定性和完整性。
紡錘體觀測新技術提升“試管嬰兒”胚胎受精率
什么是紡錘體觀測儀?
紡錘體觀測儀是利用光線經過雙折射性的物體時產生的光程差,對卵母細胞內的紡錘體進行動態及無創觀察的顯微觀測系統。
紡錘體觀測儀主要有什么用處?
紡錘體觀測儀主要用于ICSI注射時紡錘**置觀測,避免ICSI注射時對卵子的紡錘體損傷。
目前的ICSI注射方法是:假定成熟的MII卵母細胞的紡錘體靠近***極體,通過定位***極**置于6點或12點方向,在垂直于***極體的3點鐘方向注入精子。但事實上,紡錘體的位置不是固定不變的,***極體不能精細預測所有卵母細胞紡錘體的位置,約39%的紡錘體并不能通過***極體預測。傳統的ICSI注射很可能損壞紡錘體,若紡錘體損傷很可能導致卵母細胞死亡或染色體異常。因此,在ICSI注射時對紡錘體進行觀察,對于ICSI操作和受精結局都有非常重要的意義,可以顯著提高ICSI受精率,有大量文獻報道正常受精率在觀察到紡錘體的卵子中***高于未觀察到紡錘體的卵子(83.3% VS 77.2%)。
紡錘體儀還有什么作用?
紡錘體觀測儀還可以對一代受精后的卵母細胞受精情況進行評估,選擇未受精的卵母細胞進行補救ICSI***。 紡錘體微管的動態變化是細胞分裂周期的重要標志。
冷凍與解凍過程中涉及多個環節,包括溫度控制、時間控制、冷凍保護劑的添加與去除等。這些環節中的任何一步操作不當都可能導致紡錘體損傷。因此,需要不斷優化冷凍與解凍技術,以減少對紡錘體的不良影響。近年來,研究者們通過不斷嘗試和優化冷凍保護劑的配方,取得了進展。例如,甘油、二甲基亞砜(DMSO)等滲透性保護劑被用于哺乳動物卵母細胞的冷凍保存中,它們能夠迅速降低細胞內水分含量,減少冰晶形成。同時,一些非滲透性保護劑如蔗糖、海藻糖等也被發現對紡錘體具有一定的保護作用。紡錘體微管網絡的復雜性確保了細胞分裂的精確性和高效性。上海輔助生殖紡錘體改善分級
紡錘體在細胞分裂后期通過收縮力推動染色體分離。上海無損觀察紡錘體Oosight Meta
對卵子進行評估:胚胎學家指出:有紡錘體出現的卵母細胞有較高的受精率和胚胎發育率,也就是說紡錘體的存在與否,可以用來評價卵母細胞胞漿的成熟度。因此胚胎學家有三次通過紡錘體對我們的卵子進行評估的機會: (1)胚胎學家可以利用偏振光顯微鏡對卵子的紡錘體進行觀察,通過定量分析數據對卵子進行分級,挑選出正常分裂的卵子,也就是出現紡錘體的卵子,進而提高試管嬰兒的受精率。 (2)胚胎學家還可以通過紡錘體來確定體外培養成熟卵子(IVM)的成熟期,進而為體外成熟卵子進行評估,***提高試管嬰兒的受精率和胚胎發育率。 (3)由于紡錘體對環境溫度的改變非常敏感。溫度降至25℃時,只需要10分鐘的時間,就會紡錘體造成不可逆的損傷。所以冷凍復蘇過程中溫度改變很有可能對卵母細胞紡錘體和染色體造成損傷。因此胚胎學家可以應用紡錘體成像幫助選擇復蘇后具有正常紡錘體的卵母細胞,進而可以提高受精率、卵裂率和臨床妊娠率。
綜上所述,通過***細胞的紡錘體成像技術可以避免輔助生殖技術對卵母細胞紡錘體的損傷,有助于選擇具有正常紡錘體的卵母細胞,有利于提高受精率、卵裂率和臨床妊娠率,利用更科學的方式,將讓求子路的終點不再那么遙遠。 上海無損觀察紡錘體Oosight Meta