香港計數精子分析W.H.O 4

精子檢測是通過一系列檢測方法來評估男性生育能力的指標之一。而檢測方法的選擇直接影響到檢測的準確性和結果的可靠性。目前，常用的檢測方法有手動計數法、顯微鏡計數法、電子顯微鏡計數法、精子運動軌跡分析法等。手動計數法是通過顯微鏡手動計算精液中精子數量的方法，該方法簡單易行，但因操作者技能不同，容易出現誤差。顯微鏡計數法是通過顯微鏡觀察精液中精子數量的方法，該方法比手動計數法更加準確，但需要專業的技能和經驗。電子顯微鏡計數法是通過電子顯微鏡觀察精液中精子數量的方法，該方法非常準確，但需要昂貴的設備。精子運動軌跡分析法是通過計算機分析精子運動軌跡來判斷精子活力和數量的方法，該方法不僅準確性，而且可以直觀地顯示精子的運動狀態，但需要較為復雜的技術。除了以上常見的檢測方法，還有一些新興的檢測方法，如流式細胞術、全自動分析系統等。這些檢測方法雖然在檢測精子數量、活力等方面具有一定優勢，但由于技術上的限制和設備的昂貴，目前還沒有得到廣泛應用。在選擇檢測方法時，需要考慮檢測的目的、檢測的準確性和結果的可靠性等因素。同時，需要選擇正規的醫療機構進行檢測，避免因設備不足或技術不過關等因素導致檢測結果出現誤差。精子分析儀參數，精子頭側擺幅度（ALH）?：精子頭關于其平均路徑的側向位移幅度。香港計數精子分析W.H.O 4

世界衛生組織(WHO)《人類精液及精子—宮頸粘液相互作用實驗室檢驗手冊》于1980年***出版，以滿足臨床與科研對人類精液標準化檢測程序日益增長的需求。該手冊是人類精液實驗室檢查和處理程序及方法的標準操作指南，旨在提高精液分析的質量和提高不同實驗室結果的可比性。在過去40年里，該手冊進行了4次修訂與補充(1987年、1992年、1999年和2010年)，內容涉及精液檢查的標準化操作程序、精子功能、精漿生化、精液處理與冷凍以及質量保證等，已成為國際公認的標準，被世界各地臨床和實驗室***使用。中國衛生部已在2003年將其納入人類輔助生殖技術規范。WHO《人類精液檢查與處理實驗室手冊(第5版)》精液參考值的數據是來自全球3大洲8個國家的前瞻性、多中心臨床研究的結果，通過循證醫學研究獲得的精液參數參考值具有里程碑式意義。自2010年出版以來成為WHO很受歡迎的出版物之一，即使在**近幾年其下載量也在穩步增長。它是男科實驗室及全球范圍內開展精液分析操作的其他實驗室、醫院和研究機構使用的標準操作手冊。該手冊在國際大會、科學會議、以及WHO合作中心、專業學會和其他學術機構的培訓項目中進行了***傳播。截止到2021年，已被3000余篇同行評議論文和評論引用。美國計數精子分析CASA系統通過計算機分析精子運動參數，能夠提供精確的量化數據，優于人工檢測方法。

精子手工計數原理及操作方法1.原理：將精液用適當的稀釋液作一定量稀釋后，混勻注入計數池內計數，再算出每毫升精液中精子數。2.方法（按照***版第四版《全國臨床檢驗操作規程》）1).于小試管內加精子稀釋液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀釋液內混勻。2).充分搖勻后,滴入改良Neubauer計數板的計數池內,靜置1~2分鐘,待精子下沉后,以精子頭部作為基準進行計數。3.計算1).如每個**中方格內精子少于10個,應計數所有25個中方格內的精子數。2).如每個**中方格內精子在10~40個,應計10個中方格內的精子數。3).如每個**中方格內精子多于40個,應計數5個中方格內的精子數。公式：精子數=計數結果/計數中方格×25×1/計數池高度×20×103/ml=計數結果/計數中方格×1/計數池高度×5×103/ml

精子計數是在顯微鏡下計算一次排出的精液中精子的數量將精子計數值乘以精液量就可得出一次**的量。精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后，滴于血細胞計數板上，在顯微鏡下計數紅細胞計數區內的所有精子數并換算為每m1內所含精子數。此外還可用電子細胞計數儀經調整閾值設置后計數精子數量。將已經液化的精液標本均勻混合，用白細胞計數吸管吸精液至0.5刻度，再吸稀釋液至11刻度，振蕩三分鐘，然后置于血球計數板內，計數二大格（每格面積1平方毫米）之精子數，在尾數后加5個“0”即得每毫升精液內精子數。例如計數為1280個，則每毫升精子應為128,000,000。精液稀釋液之配制：重碳酸鈉5克、福爾馬林1毫升、蒸餾水加至100毫升。稀釋液內重碳酸鈉有消化粘液的作用，福爾馬林有使精子制動的作用。如精液之稠度過高而不易吸取時，可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內，稀釋后進行計數。如精子的數目極少，亦可改為稀釋10倍計數。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的，還有25%是由輸精管道的其他部分來的，因此單憑一次排精的精子計數來衡量睪丸生精機能是不***的。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查，才能比較正確地從這些精子計數來反映睪丸的生精機能。傳統的CASA系統仍使用傳統閾值圖像處理方法，準確率有待提高。

前沿性檢查：目前不作為生育力低下男性初步評估的常規方法。這一部分包括了非常專業化的、主要用于研究的方法和其他新興檢測技術。有研究認為，氧化應激可能是影響人類精子功能和妊娠結局的重要因素；新的證據也表明了精子DNA完整性和染色質組裝與生育力的關系。前沿性檢查一節中詳細介紹了精子氧化應激和活性氧實驗、精子染色質檢測(苯胺藍和色霉素A3染色)的具體實驗操作及討論。手冊重寫了計算機輔助精子分析(CASA)部分，強調了CASA對于檢測精子濃度的局限性與質控要求，增加了CASA檢測精子超活化運動的內容。對精子跨膜離子流和轉運的功能分析，可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此，手冊新增了檢測精子跨膜離子流和轉運的內容。Hamilton Thorne精子分析儀具有高度的可靠性和穩定性，能夠長時間穩定運行，保證數據的準確性和可重復性。廣州牛精子分析

精子分析儀參數，平均路徑速率（VAP）?：精子頭沿其平均路徑移動時的時均速率。香港計數精子分析W.H.O 4

七、精子形態檢查[正常參考值]畸形精子：＜10%-15%；凝集精子：＜10%；未成熟精細胞：＜1%。[臨床意義]1．精索靜脈曲張病人的畸形精子增多，提示精子在不成熟時已進入精液，或靜脈回流不暢造成陰囊內溫度過高和睪丸組織缺氧，或血液帶有毒性代謝產物從腎或腎上腺靜脈逆流至睪丸，上述原因均有損于精子形態。2.精液中凝集精子增多，提示生殖道***或免疫功能異常。3.睪丸曲細精管生精功能受到藥物或其他因素影響或傷害時，精液中可出現較多病理性未成熟精細胞。八、精液細胞檢查[正常參考值]白細胞(WBC)：＜5個/HP(高倍鏡視野)；紅細胞(RBC)：0-偶見/HP。[臨床意義]1．精液中白細胞增多，常見于精囊炎、前列腺炎及結核等。2．精液中紅細胞增多，常見于精囊結核、前列腺*等。3.精液中若查到*細胞，對生殖系*有診斷意義。香港計數精子分析W.H.O 4