湖北生長因子科研

來源: 發布時間:2021-10-31

為了評估這些CAR-T細胞的功能性記憶能力,在CAR-T細胞轉移后30天用LeY + 卵巢*細胞系OVCAR-3(Fig. 5D)處理小鼠,觀察到與未處理的CAR組相比,預處理的CAR-T細胞在小鼠血液中的擴增***增加(Fig. 5G)。意味著先前接受過CAR-T細胞***的小鼠的**控制***增強(Fig. 5H-I)。值得注意的是,第30天的**大小與**侵襲前血液中CD3+ T細胞的數量呈***負相關(Fig. 5J),表明CDK4/6i處理的CAR-T細胞的持久性增強是驅動**控制的關鍵因素。事實上,**接種后40天,接受預處理的CAR-T細胞的小鼠浸潤CD4+和CD8+ CAR-T細胞的數量***增加(Fig. 5K)。接下來通過將未處理或預處理的抗LeY CAR-T細胞轉移到OVCAR-3荷瘤小鼠體內,檢測了CDK4/6i預處理對CAR-T細胞急性療效的影響。用CDK4/6i預處理CAR-T細胞可***增強其抗**活性(Fig.5L-M)。與此一致,轉移后數周發現接受預處理細胞的小鼠血液中CD4 + 和CD8 + 細胞以及**中CD8 + 細胞數量***增高(Fig.5N-O)??傊?,這些數據證明CDK4/6i體外***是增強CAR-T細胞表型和長期療效的穩健策略。上海英拜生物提供可視化實驗過程參觀。湖北生長因子科研

2)在體內和體外,DRD2的表達抑制BrCa細胞的**發生

構建過表達DRD2的MDA-MB231和BT549細胞,通過RT-PCR(Figure2A)和WB(Figure2B)驗證。CCK8實驗證明,DRD2異位表達抑制**細胞生長(圖2C)。在單層集落形成實驗(圖2D)和軟瓊脂形成實驗(圖2E)中,DRD2也損害了存活能力。并進行細胞凋亡和細胞周期分布分析。DRD2的表達***促進了BrCa細胞凋亡(圖2F),并阻斷了MDA-MB231和BT549在G2/M期的凋亡(圖2G)。此外,過表達DRD2促進了BrCa細胞對PTX的敏感性(圖2H)。在傷口愈合實驗中,異位表達的DRD2比對照組表現出更少的閉合人工傷口的能力(圖2I)。與此相一致的是,DRD2的過表達***降低了BrCa的遷移和侵襲(圖2J)。在體內進一步測定了DRD2的抑瘤作用。皮下**模型顯示過表達DRD2模型的**體積和重量均減小(圖2K)。 生物芯片科研整體服務思路是您的操作我們來做。

與基因表達改變一致,白樺素處理以濃度依賴性的方式***減少了膽固醇和脂肪酸的從頭合成(圖3D-E)。此外,白樺素降低了細胞膽固醇(圖3F)和中性脂質(主要是膽固醇酯和甘油三酸酯)的穩態水平(圖3G)。兩者合計,我們的數據表明白樺素抑制SREBP加工并下調膽固醇和脂肪酸的生物合成,從而降低細胞脂質水平。有趣的是,洛伐他汀顯著降低了膽固醇的合成(圖3D),但也適度地增加了脂肪酸的生物合成(圖3E),這可能是因為洛伐他汀是HMGCR的抑制劑,它可以阻斷膽固醇的合成,進而刺激SREBP的活化,從而增加脂肪酸合成。

組織學分析表明,白樺素可以減少白色脂肪細胞組織(WAT)和棕色脂肪細胞組織(BAT)的細胞大小,而洛伐他汀*可以減少棕色脂肪細胞的大?。▓D5G)。 油紅色O切片染色表明,與用WD喂養的對照***小鼠的肝臟相比,洛伐他汀或白樺素處理的小鼠的肝臟具有較低的脂質蓄積(圖5G)。這與洛伐他汀和白樺素降低肝脂質含量的先前數據一致(圖5E和5F)。

5、白樺素可以改善小鼠的胰島素抵抗

由于白樺素可降低血清和組織中的脂質水平,因此接下來研究了白樺素是否可改善體內胰島素抵抗。與進食chow糧的小鼠相比,由WD喂養的小鼠表現出葡萄糖受損和胰島素耐受性。WD喂養的小鼠的白樺素或洛伐他汀***可顯著改善葡萄糖耐量和胰島素抵抗(圖6A-6D)。此外,WD喂養的小鼠的空腹血糖和胰島素升高通過白樺素的施用而被顯著降低,但洛伐他汀卻沒有(圖6E和6F)??傮w而言,這些數據表明,白樺素可改善小鼠的胰島素抵抗。 上海英拜生物提供可靠可信可參觀的實驗平臺。

四、FZD7是YTHDF1中真正的m6A修飾靶標

對于***腹肌Hippo或Wnt通路的13個轉錄本,我們采用了多步驟篩選策略(圖4A)。使用RIP結合qPCR驗證確定YTHDF1相互作用的轉錄本(4B)。Wnt途徑的FZD1、FZD7、CTBP2、MAPK9、MAP3K7等轉錄本,以及Hippo途徑的TP53BP1、PARD3、SMAD2、SMAD3等轉錄本均被YTHDF1抗體特異性免疫沉淀(4C)。YTHDF1基因敲除****降低了FZD7、MAPK9、SMAD2、SMAD3和PARD3的蛋白水平(圖4D),但它們的mRNA未受影響。m6A免疫沉淀反應(m6A-IP)和YTHDF1 eCLIP和qPCR證實YTHDF1 對FZD7, MAPK9, SMAD2 SMAD3,和PARD3 mrna進行m6A修飾。FZD7的翻譯效率下調*****,而其他基因的翻譯效率均出現輕微的抑制(圖4G)。這些結果共同提示FZD7是YTHDF1在胃*中真正的直接靶點。
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YTHDF1水平的降低導致MGC-803移植**的**進展延遲(補充圖S2D和S2E);與對照組相比,YTHDF1缺陷**的重量和體積***減少(圖2D)。因此,在YTHDF1缺陷**中,增殖標記物Ki-67下調,凋亡標記物cleavedcaspase-3上調(圖2E)。通過兩種轉移模型探討YTHDF1是否參與了胃*的體內轉移。尾靜脈注射MGC-803-sicontrol細胞導致肺轉移,而注射MGC-803-siYTHDF1l細胞幾乎完全消除轉移淋巴結的形成。***建立了PDX模型,發現敲除YTHDF1抑制了**的生長和重量。上述結果表明YTHDF1在胃*發生中起重要作用。湖北生長因子科研

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