血管生長是發(fā)生的關(guān)鍵步驟。無論原發(fā)性還是繼發(fā)性,一旦生長直徑超過1~2mm,都會有血管生成,這是由于細胞自身可分泌多種生長因子,誘導血管生成。由于組織這種新生血管結(jié)構(gòu)及功能異常,且血管基質(zhì)不完善,這種微血管容易發(fā)生滲漏,因此細胞不需經(jīng)過復雜的侵襲過程而直接穿透到血管內(nèi)進入血流并在遠隔部位形成轉(zhuǎn)移。越來越多的研究表明,良性血管生成稀少,血管生長緩慢;而大多數(shù)惡性的血管生成密集且生長迅速,因此,血管生成在的發(fā)展轉(zhuǎn)移過程中起到重要作用,抑制這一過程將能明顯阻止組織的發(fā)展和擴散轉(zhuǎn)移。血管生成實驗的技術(shù)原理主要是應用Matrigel模擬機體環(huán)境,上面接種細胞,觀察血管生成情況。體外的血管生成實驗能很好的...
1、取細胞縣液100u加入Transwel小室。2、24孔板下室一般加入600u含20S的培養(yǎng)基,特別注意的是,下層培養(yǎng)液和小室間常會有氣泡產(chǎn)生,一旦產(chǎn)生氣泡,下層培養(yǎng)液的趨化作用就減弱其至消失了,在種板的時候要特別留心,一旦出現(xiàn)氣泡,要將小室提起,去除氣泡,再將小室放進培養(yǎng)板。3、培養(yǎng)細胞:常規(guī)培養(yǎng)12-48h(主要依細胞侵襲能力而定)。24h較常見,時間點的選擇除了要考慮到細胞細胞侵襲力外,處理因素對細胞數(shù)目的影響也不可忽視。直接計數(shù)法貼壁”細胞計數(shù),這里所謂的“貼“是指細胞穿過膜后,可以附著在膜的下室側(cè)而不會掉到下室里面去,通討給細胞染色可在鏡下計數(shù)細胞。取出Transwel小室,棄去孔...
細胞增殖通俗點講,細胞增殖也就是細胞分裂,就像我們每個人的生命起點都是由一個受精卵不斷的分裂而來,然后形成由非常多的細胞組成的個體,當然在增殖期間也不斷有衰老和死亡的細胞出現(xiàn),這就是細胞增殖。增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖及遺傳的基礎(chǔ)。大家了解細胞增殖說明了什么嗎?細胞增殖的狀態(tài)是什么樣的?上海東寰給大家講解一下。細胞增殖簡單來說,只要有增殖就說明細胞還活著,所以細胞增殖是生物體的重要生命特征。科研小伙伴研究它干什么呢?舉幾個例子,比如某小伙伴發(fā)現(xiàn)了一種可能殺死腫的小分子,那如果要驗證這個小分子是否有效,那就要研究加入這個小分子后的腫細胞增殖情況,又比如某個科研小伙伴突發(fā)奇想,把細胞的某段基因給...
流式細胞檢測是一種應用于生物醫(yī)學研究和臨床診斷的技術(shù)。接下來就由上海東寰為您介紹。它通過將細胞懸浮液通過流式細胞儀進行分析,可以快速、準確地獲取大量細胞的信息,包括細胞數(shù)量、大小、形態(tài)、表面標記物等。流式細胞檢測已經(jīng)成為細胞生物學和免疫學領(lǐng)域的重要工具,為科學家們提供了更深入的了解細胞的機制和功能。流式細胞檢測的原理是利用流式細胞儀的流動系統(tǒng)將細胞懸浮液以單個細胞的形式通過激光束進行檢測。激光束照射到細胞上時,細胞會發(fā)出散射光和熒光信號。散射光可以提供有關(guān)細胞的大小和形態(tài)信息,而熒光信號則可以用于檢測細胞表面標記物或內(nèi)部分子的表達水平。通過分析這些信號,可以對細胞進行分類、計數(shù)和定量分析。流式...
液體活檢三大標志物之一的外泌體(exosomes),近幾年研究熱度持續(xù)攀升。有關(guān)外泌體載藥、診斷、免疫療法等方向的文章陸續(xù)發(fā)表在Science、Nature等各大期刊上,外泌體已成為生命科學/基礎(chǔ)醫(yī)學研究的一大熱點。外泌體的功能外泌體可能作為細胞之間物質(zhì)和信號通訊的途徑,不同的細胞通過分泌攜帶不同組分的外泌體實現(xiàn)細胞間通訊,這些外泌體被受體細胞吸收,通過物質(zhì)交換或釋放內(nèi)含物實現(xiàn)物質(zhì)和信號的交流。外泌體與受體細胞的信息交流可能通過以下4種途徑實現(xiàn):外泌體表面膜蛋白質(zhì)被目的細胞表面的受體識別,從而靶細胞;外泌體在蛋白酶作用下產(chǎn)生的表面膜蛋白質(zhì)碎片可作為目的細胞表面受體的配體;外泌體脂膜可以與目的細...
一.細胞復蘇1、提前準備完全培養(yǎng)基并預熱至37℃(可以放至在水浴或培養(yǎng)箱中進行預熱,需要多少預熱多少,反復預熱會導致培養(yǎng)基失活);用清洗潔凈的燒杯或其他合適容器裝有適量超純水,然后放入37-38℃水浴鍋中預熱至37℃(至少需30min);把所需耗材和其他物品放置于超凈工作臺中紫外照射滅菌;2、提前查詢所取凍存管的存放位置,把整個存儲架子提起,為了降低復溫對其它細胞的影響,可把該存儲架子放置于裝有液氮的泡沫盒中,快速(存儲架離開液氮罐的時間不要超過1分鐘,否則其余細胞容易復溫死亡,凍存管子的液氮會氣化)從液氮罐中取出凍存管并放置于裝有液氮的保溫杯中(必須用用潔凈鑷子取出凍存管,以免手),立即把存...
流式細胞檢測是一種應用于生物醫(yī)學研究和臨床診斷的技術(shù)。接下來就由上海東寰為您介紹。它通過將細胞懸浮液通過流式細胞儀進行分析,可以快速、準確地獲取大量細胞的信息,包括細胞數(shù)量、大小、形態(tài)、表面標記物等。流式細胞檢測已經(jīng)成為細胞生物學和免疫學領(lǐng)域的重要工具,為科學家們提供了更深入的了解細胞的機制和功能。流式細胞檢測的原理是利用流式細胞儀的流動系統(tǒng)將細胞懸浮液以單個細胞的形式通過激光束進行檢測。激光束照射到細胞上時,細胞會發(fā)出散射光和熒光信號。散射光可以提供有關(guān)細胞的大小和形態(tài)信息,而熒光信號則可以用于檢測細胞表面標記物或內(nèi)部分子的表達水平。通過分析這些信號,可以對細胞進行分類、計數(shù)和定量分析。流式...
防止有Matrigel流經(jīng)上孔而留下殘留膠;3、需要按照細胞的生長速度定時采集圖像,并且對其成管長度、覆蓋面積、成環(huán)數(shù)和結(jié)點進行測量和記錄,并且對其進行統(tǒng)計分析;4、分上下孔的ibidi血管生成載玻片能去除凹液面,使成像效果更好。(Matrigel鋪在下孔,細胞鋪在Matrigel上,上孔充滿培養(yǎng)基)2、數(shù)據(jù)分析(在特定的時間點采集圖片,并且進行圖像分析(Wimasis全自動分析)測量小管長度,成環(huán)數(shù),細胞覆蓋面積和結(jié)點。之后在對測量結(jié)果進行統(tǒng)計分析以說明實驗結(jié)果。)三、實驗具體步驟1、準備基質(zhì)膠1)實驗前一天將Matrigel置于冰盒中,放入4度冰箱,使膠能過夜緩慢融化。(注意:同樣要準備一...
細胞生物學是生物學的一個分支,研究細胞的結(jié)構(gòu)、功能、生理和遺傳學等方面。細胞是生命的基本單位,所有生物體都是由一個或多個細胞組成的。下面就跟著上海東寰一起看看吧。細胞的結(jié)構(gòu)是細胞生物學的重要研究內(nèi)容之一。細胞由細胞膜、細胞質(zhì)、細胞核和細胞器等組成。細胞膜是細胞的外層,它控制物質(zhì)的進出,維持細胞內(nèi)外環(huán)境的穩(wěn)定。細胞質(zhì)是細胞內(nèi)的液體,其中包含了各種細胞器和細胞骨架等結(jié)構(gòu)。細胞核是細胞的控制中心,它包含了遺傳物質(zhì)DNA,控制著細胞的生長和分裂。細胞器是細胞內(nèi)的各種功能結(jié)構(gòu),如線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等,它們各自承擔著不同的生理功能。細胞的功能也是細胞生物學的研究重點之一。細胞是生命的基本單位,它們承...
食品中的大腸桿菌進行快速準確的檢測已成為了人們經(jīng)常關(guān)注的問題。下面闡述食品中的大腸桿菌檢測的方法及分析。發(fā)酵法這種方法主要是在℃下的培養(yǎng)基上進行大腸桿菌的培養(yǎng),該培養(yǎng)基含有熒光底物,需要培養(yǎng)24h。然后對熒光底物進行釋放,需要采用葡萄糖醛酸進行,讓培養(yǎng)基能夠在紫外光的照射下發(fā)出熒光。采用這樣的方式方法,還可以進行統(tǒng)計學估計原來樣品中的菌落。主要步驟包括發(fā)酵、分離培養(yǎng)、二次發(fā)酵、顯微鏡觀察等。濾膜法該方法主要過程:加入10mL左右的無菌水于濾器中,然后摻入一些無菌水進行清潔濾器的內(nèi)壁,再進行過濾,將濾膜放在M-FC培養(yǎng)基中,兩者之間不能夠有氣泡,然后進行密封,存放溫度為℃,存放時間約24h,直到...
病毒包裝技術(shù)服務病毒包裝技術(shù)服務(DH0010)一、服務介紹重組病毒以其高效和多樣性,是非常有效的將外源基因?qū)爰毎姆椒āB《鞠俨《鞠俨《鞠嚓P(guān)表達特點穩(wěn)定表達瞬時表達瞬時表達是否整合到基因組是否否免疫原性弱強弱病毒**力高很高高注:高濃度時可能有極少量整合發(fā)生。二、服務內(nèi)容及價格服務編號服務內(nèi)容服務價格服務周期(工作日)DH0010-1慢病毒包裝咨詢咨詢DH0010-2腺病毒包裝咨詢咨詢DH0010-3腺相關(guān)病毒包裝咨詢咨詢注:根據(jù)客戶實驗需要靈活定制病毒載體包裝服務,滿足客戶研究的多種需要。三、客戶提供1.客戶需提供生長狀態(tài)良好的細胞株及其他**(處理細胞**)實驗材料(默認由我方提供)...
可以發(fā)現(xiàn)與疾病發(fā)生相關(guān)的關(guān)鍵基因和蛋白質(zhì),從而為疾病的預防和檢查提供新的思路。雖然動物疾病模型在科研中發(fā)揮了巨大的作用,但也存在一些挑戰(zhàn)。首先,由于物種差異的存在,動物模型的表現(xiàn)與人類疾病可能存在差異,因此需要謹慎使用。此外,動物模型的倫理問題也不容忽視,科研人員需要在符合倫理規(guī)定的前提下進行相關(guān)研究。盡管存在挑戰(zhàn),動物疾病模型的發(fā)展前景仍然值得期待。隨著科技的不斷進步,科研人員將能夠開發(fā)出更為精確、實用的動物模型,更好地為人類健康保駕護航。同時,隨著跨學科研究的深入開展,動物疾病模型將在未來發(fā)揮更為普遍的作用,成為生命科學、醫(yī)學等領(lǐng)域的重要研究工具。總之,動物疾病模型作為研究人類疾病的工具,...
細胞凋亡與細胞壞死不同,細胞凋亡不是一件被動的過程,而是主動過程,它涉及一系列基因的ji活、表達以及調(diào)控等的作用,它并不是bing理條件下,自體損傷的一種現(xiàn)象,而是為更好地適應生存環(huán)境而主動爭取的一種死亡過程。上海東寰為您分享細胞凋亡與細胞壞死的區(qū)別。細胞凋亡與程序性死亡其實從嚴格的詞學意義上來說,細胞程序性死亡(PCD)與細胞凋亡是有很大區(qū)別的。細胞程序性死亡的概念是1956年提出的,PCD是個功能性概念,描述在一個多細胞生物體中某些細胞死亡是個體發(fā)育中的一個預定的,并受到嚴格程序把控的正常組成部分。例如蝌蚪變成青蛙,其bian態(tài)過程中尾部的消失伴隨大量細胞死亡,高等哺乳類動物指間蹼的消失、...
細胞凋亡與細胞壞死不同,細胞凋亡不是一件被動的過程,而是主動過程,它涉及一系列基因的ji活、表達以及調(diào)控等的作用,它并不是bing理條件下,自體損傷的一種現(xiàn)象,而是為更好地適應生存環(huán)境而主動爭取的一種死亡過程。上海東寰為您分享細胞凋亡與細胞壞死的區(qū)別。細胞凋亡與程序性死亡其實從嚴格的詞學意義上來說,細胞程序性死亡(PCD)與細胞凋亡是有很大區(qū)別的。細胞程序性死亡的概念是1956年提出的,PCD是個功能性概念,描述在一個多細胞生物體中某些細胞死亡是個體發(fā)育中的一個預定的,并受到嚴格程序把控的正常組成部分。例如蝌蚪變成青蛙,其bian態(tài)過程中尾部的消失伴隨大量細胞死亡,高等哺乳類動物指間蹼的消失、...
細胞增殖是生活細胞的重要生理功能之一,是生物體的重要生命特征。細胞增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基礎(chǔ)。真核生物的分裂依據(jù)過程不同有三種方式,有有絲分裂,無絲分裂,減數(shù)分裂。上海東寰為您分享有絲分裂的周期變化。有絲分裂的周期變化細胞分裂期在細胞分裂期,很明顯變化是細胞核中染色體的變化。人們?yōu)榱搜芯糠奖悖逊至哑诜譃樗膫€時期:前期,中期,后期,末期。其實,分裂期的各個時期的變化是連續(xù)的,并沒有嚴格的時期界限。前期細胞分裂的前期,很明顯的變化是細胞核中出現(xiàn)染色體。分裂間期復制的染色體,由于螺旋纏繞在一起,逐漸縮短變粗,形態(tài)越來越清楚。在光學顯微鏡下觀察這個時期的細胞,可以看到每一條染色體實際...
液體活檢三大標志物之一的外泌體(exosomes),近幾年研究熱度持續(xù)攀升。有關(guān)外泌體載藥、診斷、免疫療法等方向的文章陸續(xù)發(fā)表在Science、Nature等各大期刊上,外泌體已成為生命科學/基礎(chǔ)醫(yī)學研究的一大熱點。外泌體的功能外泌體可能作為細胞之間物質(zhì)和信號通訊的途徑,不同的細胞通過分泌攜帶不同組分的外泌體實現(xiàn)細胞間通訊,這些外泌體被受體細胞吸收,通過物質(zhì)交換或釋放內(nèi)含物實現(xiàn)物質(zhì)和信號的交流。外泌體與受體細胞的信息交流可能通過以下4種途徑實現(xiàn):外泌體表面膜蛋白質(zhì)被目的細胞表面的受體識別,從而靶細胞;外泌體在蛋白酶作用下產(chǎn)生的表面膜蛋白質(zhì)碎片可作為目的細胞表面受體的配體;外泌體脂膜可以與目的細...
操作時戴合適的手套和安全眼鏡并始終在化學通風櫥里進行。(又稱為二甲基亞砜)毒性級別:★★★實驗場景:常用于細胞培養(yǎng)中的凍存,它可以破壞氫鍵的形成,從而防止冰晶的形成對細胞造成傷害,也是實驗室中比較常用的有機溶劑。防護攻略:存在嚴重的毒性作用,具有血管毒性和肝腎毒性。用的時候要避免其揮發(fā),要準備1~5%的氨水備用,皮膚沾上之后要用大量的水洗以及稀氨水洗滌。11.疊氮鈉(NaN3)毒性級別:★★★★實驗場景:是常用防腐劑,對過氧化物酶有抑制作用,是生命科學實驗室配制儲存液,濃縮液等試劑時常用的抑菌劑。防護攻略:可阻斷細胞色素電子運送系統(tǒng),毒性非常大。可因吸入、咽下或皮膚吸收而損害健康。含有疊氮鈉的...
實驗介紹細胞遷移與侵襲實驗將Transwel小室放入培養(yǎng)板中,小室內(nèi)稱上室,培養(yǎng)板內(nèi)稱下室,上下層培養(yǎng)液以聚磚酸甜膜相隔,將研究的細胞種在上室內(nèi),由于聚碳酸脂膜有通透性,下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細跑,應用不同孔徑和經(jīng)過不同處理的聚碳酸脂膜,就可以進行共培養(yǎng)、細胞趨化、細胞遷移、細胞侵襲等多種方面的研究。一、實驗步驟:材料準備可拍照顯微鏡,Transwel小室,孔徑8um,沒包被膠的(Coste和Corning公司的也較常用),Transwel遷移實驗的細胞培養(yǎng)板24孔板。細胞培養(yǎng)板應當與購買的Transwel小室相配套,BD公司的Matiael,無血清DMEM,(1%胎生血清)DM...
流式細胞檢測工作原理是在細胞分子水平上通過單克隆抗體對單個細胞或其他生物粒子進行多參數(shù)、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個細胞,并能同時從一個細胞中測得多個參數(shù),具有速度快、精度高、準確性好的優(yōu)點,是當代先進的細胞定量分析技術(shù)之一,下面就由上海東寰給大家簡要介紹。光源、液流通路、信號檢測傳輸和數(shù)據(jù)的分析系統(tǒng)是流式細胞儀的主要組成。目前臨床中運用流式細胞儀進行外周血白細胞、骨髓細胞等檢測是臨床檢測的重要組成部分。流式細胞儀主要由四部分組成。它們是:流動室和液流系統(tǒng);激光源和光學系統(tǒng);光電管和檢測系統(tǒng);計算機和分析系統(tǒng)。上圖為其結(jié)構(gòu)示意圖。流動室由樣品管、鞘液管和噴嘴等組成,常用光學玻璃、石英等...
操作時戴合適的手套和安全眼鏡并始終在化學通風櫥里進行。(又稱為二甲基亞砜)毒性級別:★★★實驗場景:常用于細胞培養(yǎng)中的凍存,它可以破壞氫鍵的形成,從而防止冰晶的形成對細胞造成傷害,也是實驗室中比較常用的有機溶劑。防護攻略:存在嚴重的毒性作用,具有血管毒性和肝腎毒性。用的時候要避免其揮發(fā),要準備1~5%的氨水備用,皮膚沾上之后要用大量的水洗以及稀氨水洗滌。11.疊氮鈉(NaN3)毒性級別:★★★★實驗場景:是常用防腐劑,對過氧化物酶有抑制作用,是生命科學實驗室配制儲存液,濃縮液等試劑時常用的抑菌劑。防護攻略:可阻斷細胞色素電子運送系統(tǒng),毒性非常大。可因吸入、咽下或皮膚吸收而損害健康。含有疊氮鈉的...
一.細胞復蘇1、提前準備完全培養(yǎng)基并預熱至37℃(可以放至在水浴或培養(yǎng)箱中進行預熱,需要多少預熱多少,反復預熱會導致培養(yǎng)基失活);用清洗潔凈的燒杯或其他合適容器裝有適量超純水,然后放入37-38℃水浴鍋中預熱至37℃(至少需30min);把所需耗材和其他物品放置于超凈工作臺中紫外照射滅菌;2、提前查詢所取凍存管的存放位置,把整個存儲架子提起,為了降低復溫對其它細胞的影響,可把該存儲架子放置于裝有液氮的泡沫盒中,快速(存儲架離開液氮罐的時間不要超過1分鐘,否則其余細胞容易復溫死亡,凍存管子的液氮會氣化)從液氮罐中取出凍存管并放置于裝有液氮的保溫杯中(必須用用潔凈鑷子取出凍存管,以免手),立即把存...
1、取新鮮抗凝全血(EDTA、枸櫞酸鈉或肝素抗凝血均可)或者去纖維蛋白血液,用等體積的全血及組織稀釋液或者PBS稀釋全血。2、取一支無菌離心管,先加入試劑A,再加入試劑D,使兩者形成梯度界面(試劑A:試劑D的體積比為3:2,如稀釋后的血液樣本小于5ml,則先后加入3ml試劑A和2ml試劑D;如稀釋后的血液樣本大于5ml,試劑總量與稀釋后的血液樣本量相等),兩種試劑的分層一定要清晰。3、將稀釋后的血液平鋪到分離液液面上方,注意保持兩液面界面清晰。(可以使用巴氏德吸管吸取血液,然后將血液小心的平鋪于分離液上,因為兩者的密度差異,將形成明顯的分層界面。如果樣品較多,加樣的時間較長,在離心之前出現(xiàn)紅細...
細胞增殖是生活細胞的重要生理功能之一,是生物體的重要生命特征。細胞增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基礎(chǔ)。真核生物的分裂依據(jù)過程不同有三種方式,有有絲分裂,無絲分裂,減數(shù)分裂。上海東寰為您分享有絲分裂的周期變化。有絲分裂的周期變化細胞分裂期在細胞分裂期,很明顯變化是細胞核中染色體的變化。人們?yōu)榱搜芯糠奖悖逊至哑诜譃樗膫€時期:前期,中期,后期,末期。其實,分裂期的各個時期的變化是連續(xù)的,并沒有嚴格的時期界限。前期細胞分裂的前期,很明顯的變化是細胞核中出現(xiàn)染色體。分裂間期復制的染色體,由于螺旋纏繞在一起,逐漸縮短變粗,形態(tài)越來越清楚。在光學顯微鏡下觀察這個時期的細胞,可以看到每一條染色體實際...
細胞增殖通俗點講,細胞增殖也就是細胞分裂,就像我們每個人的生命起點都是由一個受精卵不斷的分裂而來,然后形成由非常多的細胞組成的個體,當然在增殖期間也不斷有衰老和死亡的細胞出現(xiàn),這就是細胞增殖。增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖及遺傳的基礎(chǔ)。大家了解細胞增殖說明了什么嗎?細胞增殖的狀態(tài)是什么樣的?上海東寰給大家講解一下。細胞增殖簡單來說,只要有增殖就說明細胞還活著,所以細胞增殖是生物體的重要生命特征。科研小伙伴研究它干什么呢?舉幾個例子,比如某小伙伴發(fā)現(xiàn)了一種可能殺死腫的小分子,那如果要驗證這個小分子是否有效,那就要研究加入這個小分子后的腫細胞增殖情況,又比如某個科研小伙伴突發(fā)奇想,把細胞的某段基因給...
由于RNA酶是無處不在的,所以需要加入DEPC使RNA酶失活,阻止RNA的降解。防護攻略:可滅活各種蛋白質(zhì),是RNA酶的強抑制劑。DEPC是一種潛在的致物質(zhì),在操作中應盡量在通風的條件下進行,并避免接觸皮膚。DEPC毒性并不是很強,但吸入的毒性是強的,使用時戴口罩,不小心占到手上注意立即沖洗。毒性級別:★★★實驗場景:PCR,NorthernBlot等實驗中,Trizol是一種常用的總RNA抽提試劑,可以直接從細胞或組織中提取總RNA。其含有苯環(huán)類等物質(zhì),能迅速破碎細胞并抑制細胞釋放出的核酸酶。在樣品裂解過程中Trizol能夠抑制RNA酶活性保持RNA完整性。防護攻略:含有大量苯環(huán)類有毒物質(zhì),...
原代細胞定制(DH0001)相關(guān)知識:將動物某組織,經(jīng)酶法或機械處理法分離成單細胞,并在合適的培養(yǎng)基中篩選出特定細胞,使得目的細胞得以生存、生長和繁殖,稱為原代細胞分離培養(yǎng)。服務說明:1、客戶需提供新鮮無菌的足量組織樣本或動物模型。2、請與我方溝通該組織(或動物模型)的取材部分、要求、儲存及運輸條件,以方便原代細胞取材,保證實驗的順利進行。3、若需要在我方構(gòu)建動物模型,需提前告知,我方好提前做好模型動物飼養(yǎng)和動物模型的構(gòu)建。4、原代細胞鑒定用的一抗或特殊染液需由客戶提供或者我方代為購買5、若有原代細胞的培養(yǎng)條件及相關(guān)的實驗方案或參考文獻也可提供給我方(保密信息除外),以方便我方實驗順利進行;若...
流式細胞檢測工作原理是在細胞分子水平上通過單克隆抗體對單個細胞或其他生物粒子進行多參數(shù)、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個細胞,并能同時從一個細胞中測得多個參數(shù),具有速度快、精度高、準確性好的優(yōu)點,是當代先進的細胞定量分析技術(shù)之一,下面就由上海東寰給大家簡要介紹。光源、液流通路、信號檢測傳輸和數(shù)據(jù)的分析系統(tǒng)是流式細胞儀的主要組成。目前臨床中運用流式細胞儀進行外周血白細胞、骨髓細胞等檢測是臨床檢測的重要組成部分。流式細胞儀主要由四部分組成。它們是:流動室和液流系統(tǒng);激光源和光學系統(tǒng);光電管和檢測系統(tǒng);計算機和分析系統(tǒng)。上圖為其結(jié)構(gòu)示意圖。流動室由樣品管、鞘液管和噴嘴等組成,常用光學玻璃、石英等...
1.甲醛(HCOH)毒性級別:★★★★實驗場景:免疫組化實驗中,取材后的組織或細胞需立刻投于固定劑中,使組織和細胞的蛋白質(zhì)凝固,終止內(nèi)源性或外源性酶反應,防止組織自溶或異溶,以保持原有結(jié)構(gòu)和形態(tài)。防護攻略:甲醛(福爾馬林)有很大的毒性并易揮發(fā),也是一種致劑(不做科研的人都知道)。很容易通過皮膚吸收,對眼睛、黏膜和上呼吸道有刺激和損傷。避免吸入其揮發(fā)的汽霧。要戴合適的手套和護目鏡,始終在化學通風櫥內(nèi)進行操作,遠離熱源、火花及明火。2.二甲苯毒性級別:★★★★實驗場景:用于免疫組織化學實驗中組織的透明和石蠟切片的脫蠟。防護攻略:二甲苯對眼及上呼吸道有刺激作用,高濃度時,對中樞系統(tǒng)有麻醉作用。急性中...
原理以慢病毒包裝為例,主要包括3個質(zhì)粒:質(zhì)粒DNA可以轉(zhuǎn)錄出慢病毒遺傳物質(zhì)(RNA),但不能翻譯出慢病毒的外殼及蛋白成分的載體質(zhì)粒,其同時含有目的基因和報告基因,psPAX2是可以表達慢病毒外殼的質(zhì)粒,其表達產(chǎn)物可通過粘附機制更易穿過細胞膜。為慢病毒的膜蛋白質(zhì)粒,通過脂質(zhì)體進行三質(zhì)粒共轉(zhuǎn)到靶細胞基因組中,宿主基因組在表達時,隨宿主基因轉(zhuǎn)錄出的目的基因RNA與psPAX2、基因翻譯出的蛋白組裝為慢病毒。病毒進入細胞后,其遺傳物質(zhì)RNA逆轉(zhuǎn)錄出DNA,該基因再整合到靶細胞的基因組中,完成轉(zhuǎn)染過程。因為質(zhì)粒DNA只能轉(zhuǎn)錄出病毒RNA和表達目的基因卻不能表達出病毒的外殼和膜蛋白成分,因此其不能像普通的...
由于RNA酶是無處不在的,所以需要加入DEPC使RNA酶失活,阻止RNA的降解。防護攻略:可滅活各種蛋白質(zhì),是RNA酶的強抑制劑。DEPC是一種潛在的致物質(zhì),在操作中應盡量在通風的條件下進行,并避免接觸皮膚。DEPC毒性并不是很強,但吸入的毒性是強的,使用時戴口罩,不小心占到手上注意立即沖洗。毒性級別:★★★實驗場景:PCR,NorthernBlot等實驗中,Trizol是一種常用的總RNA抽提試劑,可以直接從細胞或組織中提取總RNA。其含有苯環(huán)類等物質(zhì),能迅速破碎細胞并抑制細胞釋放出的核酸酶。在樣品裂解過程中Trizol能夠抑制RNA酶活性保持RNA完整性。防護攻略:含有大量苯環(huán)類有毒物質(zhì),...