外泌體的提取、分離方法：超高速離心法。常用的是超高速離心法，該方法是被譽為分離外泌體的“金標準”。該方法利用離心力從細胞培養液或生物流體獲得外泌體，經過400×g、2000×g、10000×g的低速離心，除去細胞及大的細胞分泌物；較后超高速100000×g離心...

細胞外基質的主要類型及功能:a.骨的胞外基質表現為剛硬的特點，以滿足支撐的作用b.軟骨是另一種結締組織，其胞外基質具有一定的韌性c.眼角膜中胞外基質是透明的保護層。如前所述,動物組織的構建既是多細胞相互作用的結果，也是細胞與胞外基質相互作用和接觸的結果。胞外基...

大量關于一些病癥相關巨噬細胞的研究表明，一些病癥相關巨噬細胞通過與一些病癥細胞進行細胞間通訊，與一些病癥進展和轉移相關，然而對TAM與一些病癥細胞之間通信的研究限制于可溶性因子，例如促炎細胞因子，其中包括趨化因子、炎癥因子和生長因子等。較近的研究證據表明，外泌...

外泌體與肺病預后：外泌體mirRNA和蛋白質被認為是NSCLC的預后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預后的生物標志物時發現，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外，還有研究表明，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平mi...

細胞外基質的主要類型及功能：細胞外基質多細胞生物不光光由細胞組成，還包括分布于細胞外空間，由細胞分泌的蛋白質和多糖所構成的網絡結構————細胞外基質（extracellularmatrik，ECM）。細胞外基質在結締組織中較為豐富，占據了結締組織的大部分空間，...

外泌體提純試劑盒的特色與優勢：純化和富集的完整血漿/血清，尿液和細胞培養基中外泌體的可用于功能研究；樣本輸入量多樣；無需耗時的超速離心，過濾或特殊注射器；無需沉淀試劑，也無需過夜培養；無需蛋白酶處理；適用于多種物種；外泌體被純化并且不含任何其他RNA結合蛋白；...

當其由宿主細胞被分泌到受體細胞中時，外泌體可通過其攜帶的蛋白質、核酸、脂類等來調節受體細胞的生物學活性。外泌體介導的細胞間通訊主要通過以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜蛋白結合，進而啟動靶細胞細胞內的信號通路。二是在細胞外基質中，外泌體膜蛋白可以被蛋...

構成細胞外基質的大分子：前α鏈在粗面內質網上合成，并在形成三股螺旋之前于脯氨酸及賴氨酸殘基上進行羥基化修飾，脯氨酸殘基的羥化反應是在與膜結合的脯氨酰-4羥化酶及脯氨酰-3羥化酶的催化下進行的。維生素C是這兩種酶所必需的輔助因子。維生素C缺乏導致膠原的羥化反應不...

聚乙二醇（PEG）可與疏水性蛋白和脂質分子結合共沉淀，早先應用于從血清等樣本中收集細菌，現在也被用來沉淀外泌體，其原理可能與競爭性結合游離水分子有關。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽性），顆粒大小不均一，產生難以去除的聚合...

外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法，這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多，但是純度不足，電鏡鑒定時發現外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒有非常統一的鑒定標準，也有一些研究認為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過濾離心，這種操...

構成細胞外基質的大分子：Ⅰ型膠原的原纖維平行排列成較粗大的束，成為光鏡下可見的膠原纖維，抗張強度超過鋼筋。其三股螺旋由二條α1（Ⅰ）鏈及一條α2（Ⅰ）鏈構成。每條α鏈約含1050個氨基酸殘基，由重復的Gly-X-Y序列構成。X常為Pro（脯氨酸），Y常為羥脯氨...

細胞可以通過施力和測量產生的反作用力來感知環境的機械特性。這發揮著重要作用，因為它有助于調節許多重要的細胞過程，包括細胞收縮，細胞遷移，細胞增殖，分化[和細胞死亡(凋亡)。克制非肌肉肌球蛋白ⅱ阻斷了大部分這些效應，表明它們確實與細胞外基質的機械特性有關，這在過...

細胞外基質的化學組成包括3類：氨基聚糖和蛋白聚糖、膠原和彈性蛋白以及纖連蛋白和層粘連蛋白。主要功能表現在：對細胞組織起支持、保護、提供營養，以及胚胎發育形態建成、細胞分裂、細胞分化、細胞運動遷移、細胞識別、細胞黏著和通信聯絡等方面。植物細胞的細胞壁相當于植物體...

將濃縮液加至20mmol/LTris/30%蔗糖/45%蔗糖(pH7.4)的密度梯度液上行4℃超速離心100000×g(水平轉子SW-41)8h,吸取位于蔗糖之上的顏色明顯較深條帶的液體約5mL,以10倍PBS稀釋混勻后再次用100-ku超濾離心管(Milli...

在無菌條件下提取人體體液，并用PBS緩沖液進行稀釋，然后通過離心篩選初步去除體液中的細胞成分和細胞碎片，制成體液樣本備用；體液樣本純化：通過過濾膜對上述體液樣本進行過濾，進一步去除體液中的細胞殘片及其他雜質，靜置10～15分鐘，留取沉淀物備用；外泌體提?。簩⑸?..

所有培養的細胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關他們分泌和攝取及其組成、“運載物”和相應功能的精確分子機制剛剛開始研究。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡，參與細胞間通訊，對外泌體的研究興趣日益增長，無論是研...

ECM與腎臟纖維化:各種原發性和/或繼發性致病原因所導致ECM合成與降解的動態失衡，促使大量ECM積聚而沉積于腎小球、腎間質內，導致腎臟各級血管堵塞，混亂分隔形成腎臟組織形態學改變，較終導致腎單位喪失，腎功能衰竭，進一步發展成為不可逆轉的腎小球硬化，細胞外基質...

外泌體的形成與鑒定：首先，細胞膜內陷形成一個杯狀結構，包括細胞表面蛋白和與細胞外環境相關的可溶性蛋白，導致早期胞內體(early-sortingendosome，ESE)的從頭形成，或者是杯狀結構直接和已經存在的ESEs融合；trans-高爾基體和內質網也能協...

可以。為了能夠高效提取細胞培養上清中的外泌體，磁珠可重復使用5次（同一樣品）。試劑盒里的緩沖液含5次提取需要的量。1mL體積以上細胞上清樣本建議進行濃縮后再回收，提取時可進行反復抽提，提高提取效率。用血液樣品進行實驗時，需要根據磁珠狀況來判斷是否能重復利用；若...

構成細胞外基質的大分子：Ⅰ型膠原的原纖維平行排列成較粗大的束，成為光鏡下可見的膠原纖維，抗張強度超過鋼筋。其三股螺旋由二條α1（Ⅰ）鏈及一條α2（Ⅰ）鏈構成。每條α鏈約含1050個氨基酸殘基，由重復的Gly-X-Y序列構成。X常為Pro（脯氨酸），Y常為羥脯氨...

用于外泌體提取的體液收集注意事項：1、選擇血清還是血漿？推薦大多數研究選擇血漿。血液凝固過程中血小板會產生大量外泌體，含量占血清中外泌體的50%以上，選擇血漿可避免不必要的影響。2、注意抗凝劑的選擇。肝素類抗凝劑與PCR假陰性有關，這可能是因為肝素與引物和/或...

蛋白組學揭示細胞外基質在部位和部位間質中的不同作用：部位間質是部位組織中除部位細胞外其他成分的統稱，部位間質和部位細胞相互作用共同決定部位的生物學行為（生長，浸潤，轉移等）。早期針對部位的思路往往局限于部位細胞本身，致使人類的抗部位征途異常艱難曲折。對部位間質...

外泌體(Exosome)是由細胞分泌而來的微小囊泡，直徑約為30-200nm，密度在1.13-1.21g/ml，具有杯狀形態、雙層膜結構，天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和細胞培養基等生物體液中。包括瘤細胞在內幾乎所有類型的細胞（免疫細胞、神經細胞、干細胞)，...

細胞外基質和膠原的結構：膠原（collgen)的結構：在膠原纖維中，膠原的分子單位稱為原膠原，由3條多肽鏈組成3股螺旋結構，相對分子質量約30萬左右，長達300nm,而直徑為1.5nm。原膠原分子中每隔64~70nm即有易于染色的極性部位存在，而在膠原微纖維中...

外泌體的提取分離：1、超速離心法（差速離心）。超離法是常用的外泌體純化手段，采用低速離心、高速離心交替進行（如圖所示），可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡單，獲得的囊泡數量較多而廣受歡迎，但過程比較費時，且回收率不穩定（可能與轉子類型有關），純度也受到...

近年來，隨著外泌體研究的不斷深入，它的應用已經涉及一些病癥治病領域、醫學基礎和免疫領域、寄生蟲領域；臨床研究上已涉及心血管系統、內分泌代謝系統等。外泌體來源及內含物。幾乎所有類型的細胞都可以分泌外泌體，同時外泌體也普遍存在于體液中，包括血液、眼淚、尿液、唾液、...

功能：由于其不同的性質和組成，細胞外基質可以發揮許多功能，例如提供支持、將組織相互隔離以及調節細胞間的通訊。細胞外基質調節細胞的動態行為。此外，它能隔離多種細胞生長因子，并充當它們的局部儲存庫。生理條件的變化會引發蛋白酶活性，從而導致這類物質在局部釋放。這允許...

外泌體提取：1、過濾。超濾膜也可用于分離外泌體。根據外泌體的大小，從蛋白質和其他大分子中分離外泌體。較常見的過濾膜具有0.8μm、0.45μm或0.22μm的孔徑，可用于收集大于800nm、400nm或200nm的外泌體，也有設計成微柱多孔硅纖毛結構以分離40...

1983年，外泌體初次于綿羊網織紅細胞中被發現，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。所有培養的細胞類型...

外泌體的生物學功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒，而傳統超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。李記生物自主開發的外泌體快速提取試劑盒，組分經過優化處理，適用于細胞培養上清液、血清、血漿、尿液及其他體液（腦脊液、腹水、羊水、乳汁以及唾液等）中的外泌體提取...