外泌體的表征方法：根據藥物遞送系統(DDS)表征外泌體結構至關重要，因為它決定了DDS的特性，例如細胞或組織親和力、應激反應、吸收途徑和藥物釋放。2014年和2018年國際細胞外囊泡學會(MISEV2018)提出了外泌體（包括研究和外泌體制備）應滿足的基本要求...

分離外泌體的方法之超速離心：離心是一種利用不同的離心力根據顆粒成分的密度、大小和形狀沉淀顆粒成分的過程。超速離心是一種離心過程，較多使用6×106g離心力，有助于隔離更小的組件，例如，核糖體、蛋白質、病毒、外泌體和其他EV。加速度（g）、旋轉半徑、樣品粘度和沉...

探針法qPCR試劑盒特點：細菌（Bacteria）廣義的細菌即為原核生物是指一大類細胞核無核膜包裹只存在稱作擬核區（nuclearregion)（或擬核）的裸露DNA的原始單細胞生物，包括真細菌（eubacteria）和古生菌（archaea）兩大類群。人們通...

逆轉錄酶實驗流程：從細胞材料中提取RNA→RNA加入到含有逆轉錄酶、引物、dNTPs的反應體系中→退火，引物與RNA鏈配對→延伸，逆轉錄酶合成互補cDNA鏈變性→常規PCR反應流程（變性、退火、延伸，如此多次循環）。RT-PCR“兩步法”與“一步法”RT-PC...

DNA提取的原則：1.保證核酸一級結構的完整性；2.核酸樣品中不應存在對酶有抑制作用的有機溶劑和過高濃度的金屬離子；3.其他生物大分子如蛋白質、多糖和脂類分子的污染應降低到較低程度；4.其他核酸分子，如RNA，也應盡量去除。DNA提取的樣品準備：生物組織：一....

人體中也有逆轉錄過程，比如端粒的復制。端粒（telomere）是染色體末端的特殊結構，由重復的DNA序列（TTAGGG）和核的蛋白組成，可以保護染色體末端，維持基因組完整性。端粒的末端是單鏈3'末端，形成一種緊湊的T環結構，可保持其穩定性。其表面覆蓋著Shel...

各類型試劑盒的原理：進行檢測時，反應后洗滌微孔，就可以將體系中多余的物質去除，微孔中只留下吸附在其上的原料和相應的免疫復合物。此后可以采用多種指示方法進行檢測。板式試劑來源于實驗室，較初是為了提高手工反應的效率而設計，現在也有自動化設備進行操作。板式試劑的特點...

逆轉錄的發現有重要的理論意義和實踐意義。對分子生物學的中心法則進行了修正和補充。經典的中心法則認為：DNA的功能兼有遺傳信息的傳遞和表達，因此，DNA處于生命活動的中心位置。逆轉錄現象說明：至少在某些生物中，RNA同樣兼有遺傳信息傳遞和表達功能。修正后的中心法...

逆轉錄的端粒復制：逆轉錄經常與細胞惡性轉化有關，艾滋、乙肝等很多疾病也有逆轉錄過程。所以相關研究可以為很多疾病的研究和防治提供幫助。逆轉錄酶抑制劑就一直是藥物研發熱點，例如抗HIV的nevirapine。逆轉錄酶缺乏校對（3'-5'核酸外切酶）功能，所以容易出...

骨組織RNA提取方法及步驟：頭一次使用前請先在漂洗液RW瓶加入指定量無水乙醇!取1ml裂解液CLB至離心管內(如果CLB有析出或者沉淀需先置于65°C水浴重新溶解），在裂解液CLB中加入100μlP的LANTaid，顛倒混勻后65°C水浴中預熱。多個樣品按照比...

骨組織RNA提取方法及步驟：適用于快速提取骨組織細胞總RNA，使用獨有基因組DNA清理柱技術可有效清理電泳可見gDNA殘留，RNA可用于反轉錄PCR，熒光定量PCR等。骨組織堅硬、骨細胞密度低、而且外周基質含有大量黏蛋白（蛋白多糖）和RNA難以分離，無法用傳統...

DNA提取的基本步驟：1.細胞裂解與細胞裂解緩沖液裂解細胞膜；2.脂質被洗滌劑和表面活性劑分解；3.通過添加蛋白酶消化蛋白質；4.通過添加RNase消化RNA；5.通過加入濃鹽然后離心分離細胞碎片、消化蛋白質、脂質和RNA；6.用冰冷的乙醇或異丙醇乙醇沉淀DN...

逆轉錄的端粒復制：逆轉錄經常與細胞惡性轉化有關，艾滋、乙肝等很多疾病也有逆轉錄過程。所以相關研究可以為很多疾病的研究和防治提供幫助。逆轉錄酶抑制劑就一直是藥物研發熱點，例如抗HIV的nevirapine。逆轉錄酶缺乏校對（3'-5'核酸外切酶）功能，所以容易出...

microRNA提取方法及步驟：動物組織（例如鼠肝腦）a.新鮮組織用解剖刀迅速切成小碎塊,根據處理組織的質量，按照50-100mg加入1ml的比例加入Lysis/Bindingbuffer后電動或者手動徹底勻漿。或者在液氮中研磨組織成細粉后，取適量組織細粉（約...

磁珠法DNA提取：磁珠法的原理是在磁珠表面修飾有對核酸有吸附作用的特定活性官能基團，通過不同的裂解液結合液洗滌液在特定的條件下能夠與目的物質進行特異性結合，同時利用磁珠自身的磁性，在外磁場的作用下可以方便的實現定向移動與富集，從而達到核酸與雜質分離的目的，進而...

該如何選擇高質量、使用方便和廉價物美的試劑盒？生化診斷試劑盒的質量是保證實驗室檢測結果準確性的關鍵因素之一。目前，由于臨床生化自動分析儀器的普及應用，商品化的不斷涌現。因此，如何選擇和評價高質量的、符合實驗室分析要求的，以及使用方便和價廉的試劑盒，不只是檢驗工...

試劑盒生產流程：包被：1、包被前預吸檢查頭頭是否合格，水流是否一同，不一同者應geng換頭頭，包被應選用好的頭頭，每包被一塊板，應將頭頭套緊，并且在包被的過程中要留意檢查吸液是否一同，在包被過程中若出現任何小問題，都應將此塊板做出記號，以便后期組裝入庫時篩選。...

逆轉錄（reversetranscription）是以RNA為模板合成DNA的過程，即RNA指導下的DNA合成。此過程中，核酸合成與轉錄（DNA到RNA）過程與遺傳信息的流動方向（RNA到DNA）相反，故稱為逆轉錄。逆轉錄與反轉錄嚴格意義上來說沒有什么區別，但...

如何選擇DNA提取試劑盒？實驗室工作中，經常會需要用到純化的DNA，這時我們通常需要使用一個商業的DNA提取試劑盒對目的DNA進行分離純化。市面上有很多類型的提取試劑盒，當使用不太熟悉的樣本類型時，選擇合適的盒子是尤為關鍵的，試劑盒組分：目前大多數DNA提取試...

莖環法逆轉錄技術具有許多優點。首先，該技術可以在樣品數量較少的情況下擴增RNA分子，從而避免了RNA樣品的純化和濃縮操作。其次，莖環法逆轉錄技術可以特異性地擴增目標RNA分子，避免了隨機引物引起的非特異擴增，從而提高了檢測的準確性和可靠性。此外，莖環法逆轉錄技...

microRNA提取方法及步驟：室溫放置5分鐘以充分分離核酸蛋白復合物。加入200μl氯仿，劇烈振蕩15秒。室溫放置2-3分鐘，13，000rpm離心10分鐘。小心取上清（約600μl）轉入到新的離心管，加入1.5倍體積的無水乙醇（必須是室溫的，通常900μl...

外泌體試劑盒原理：傳統的外泌體研究，基本都是用WB之類來檢測和表征外泌體，比如用SDS-PAGE電泳可分析Exosome中蛋白的大致含量及種類（通過條帶的位置和條帶的粗細）；Western-Blot可以檢測Exosome中某特定蛋白的表達情況，就跟我們檢測其他...

試劑盒生產流程：包被：1、包被前預吸檢查頭頭是否合格，水流是否一同，不一同者應geng換頭頭，包被應選用好的頭頭，每包被一塊板，應將頭頭套緊，并且在包被的過程中要留意檢查吸液是否一同，在包被過程中若出現任何小問題，都應將此塊板做出記號，以便后期組裝入庫時篩選。...

該如何選擇高質量、使用方便和廉價物美的試劑盒？穩定性試驗：試劑盒的穩定性是指試劑盒試劑的不同狀態在不同條件貯存后所保持其測定準確性的性能。生產廠家在試劑盒的研制過程中，都已做過穩定性試驗，并加有適當的穩定劑。但用戶在選擇和鑒定試劑盒時，仍需要檢查其穩定性，尤其...

逆轉錄的轉錄過程：基因的轉錄是由RNA聚合酶催化進行的。基因的上游具有結合RNA聚合酶的區域，叫作啟動子。啟動子是一段具有特定序列的DNA，具有和RNA聚合酶特異性結合的位點，決定了基因轉錄的起始位點。RNA聚合酶與啟動子結合后，在特定區域將DNA雙螺旋兩條鏈...

該如何選擇高質量、使用方便和廉價物美的試劑盒？生化診斷試劑盒的質量是保證實驗室檢測結果準確性的關鍵因素之一。目前，由于臨床生化自動分析儀器的普及應用，商品化的不斷涌現。因此，如何選擇和評價高質量的、符合實驗室分析要求的，以及使用方便和價廉的試劑盒，不只是檢驗工...

現在都有哪些類型的試劑盒？根據不同的指示反應原理和試劑形態，也有另外的分類方法。比如免疫試劑中，目前市面上流行的有酶聯免疫試劑（ELISA）、化學發光試劑（CLIA）、熒光免疫試劑（FIA）和膠體金（金標）試劑等。這些試劑主要在指示試劑上有所不同，但與待測物質...

探針法qPCR試劑盒具有下列特點：1.即開即用，用戶只需要提供樣品DNA模板。2.引物和探針經過優化，靈敏性高。3.提供陽性對照，便于區分假陰性樣品。4.特異性高，引物是根據細菌高度保守區設計，不會跟其他病原菌DNA發生交叉反應。5.本產品足夠50次20μL體...

microRNA提取方法及步驟：近年來對RNA干擾和調節性小RNA的普遍研究迫切需要一種能有效提取15--30核苷酸左右大小RNA（包括siRNA和miRNA）的方法。但是傳統的RNA提取方法如硅膠膜不能有效吸附回收，酚/胍抽提和乙醇沉淀并不能有效沉淀回收微小...

使用差速離心法分離外泌體主要需要注意的是轉子的選擇。“擺動桶”(SW)轉子和“定角”(FA)轉子，這些轉子的幾何形狀根本不同，因此沉降特性也不同。這些轉子之間的主要區別在于：FA轉子，與旋轉半徑相比，沉積顆粒的較大路徑長度通常較小，允許近似恒定遷移率并簡化描述...