骨組織RNA提取之其它骨組織破碎方法：立刻將混合物(每次小于720μl，多可以分兩次加入)加入一個吸附柱RA中，（吸附柱放入收集管中）13,000rpm離心2分鐘，棄掉廢液。確保離心后液體全部濾過去，膜上沒有殘留，如有必要，可以加大離心力和離心時間。加700μ...

該如何選擇高質量、使用方便和廉價物美的試劑盒？測定線性范圍：生化診斷試劑盒的線性測定范圍既是衡量其質量的重要指標，也是保證正確使用和鑒定試劑盒的關鍵指標之一。一般試劑盒的線性范圍要求能覆蓋臨床上的參考值和常見疾病的醫學決定水平，以減少標本稀釋重測的機會。一旦線...

骨組織RNA提取之其它骨組織破碎方法：取出吸附柱RA，放入一個RNasefree離心管中，根據預期RNA產量在吸附膜的中間部位加30-50μlRNasefreewater（事先在70-90℃水浴中加熱可提高產量），室溫放置1分鐘，12,000rpm離心1分鐘。...

離心柱法DNA提取：離心柱法主要原理是將對核酸有吸附作用的官能基團固定在離心柱模上，通過加入不同的裂解試劑、洗滌試劑并反復離心，以達到核酸與雜質分離的目的，獲得純化的核酸。離心柱法DNA提取它的優點是比傳統的酚氯法提取的純度高，有利于RNA保護，而且能進行微量...

人體內多種細胞及體液均可分泌外泌體，包括內皮細胞、免疫細胞、血小板、平滑肌細胞等。當其由宿主細胞被分泌到受體細胞中時，外泌體可通過其攜帶的蛋白質、核酸、脂類等來調節受體細胞的生物學活性。外泌體介導的細胞間通訊主要通過以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜...

逆轉錄的作用：除了病毒外，逆轉錄還在其他方面發揮了重要的作用。例如，在一些動物體內，逆轉錄過程會導致基因的重組。這種重組可以使新的基因產生，從而使動物產生新的特征。此外，逆轉錄還可以作為某些基因的調節機制，從而控制基因的表達和功能。逆轉錄的研究一直是生物學領域...

探針法qPCR試劑盒使用方法：數據處理：1、如果把本試劑盒用于定量檢測，則以陽性對照濃度的log值為橫軸，以Ct值為縱軸，繪制標準曲線。再以待測樣品的Ct值從標準曲線上推算出樣品RNA濃度的log值，再推算出其濃度。2、如果把本試劑盒用于定性檢測，只判斷陽性或...

分離外泌體的方法之免疫親和相互作用：免疫親和法是利用外泌體表面蛋白（抗原）與其靶抗體或分離配體分子之間的免疫親和相互作用原理分離純外泌體的理想方法。它有助于根據其表面標志物分離特定類型的外泌體。基于微孔板的酶聯免疫吸附測定（ELISA）是免疫親和分離試劑盒的一...

外泌體的表征方法：根據藥物遞送系統(DDS)表征外泌體結構至關重要，因為它決定了DDS的特性，例如細胞或組織親和力、應激反應、吸收途徑和藥物釋放。2014年和2018年國際細胞外囊泡學會(MISEV2018)提出了外泌體（包括研究和外泌體制備）應滿足的基本要求...

外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30-150nm)，現今，其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。1983年，外泌體頭次于綿羊網織紅細胞中被發現，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其...

外泌體的提取主要包括以下幾種方式：一是色譜法，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設備，應用不普遍。二是微流控分離法，該方法通過負壓及震蕩等機械原理分離外泌體，產量純度均具有較大幅度提高，但需要特定設備配合。外泌體分離方法之納米粒徑分析法：確...

DNA提取的一些問題，提取的細菌基因組DNA有降解，為什么？確認選用的培養菌體是否新鮮，如果菌體需要保存時，請于-80℃保存。起始菌液量過多，導致菌液裂解不充分，部分DNA降解。菌體本身富含DNA酶活性，加入Digestionsolution后再加20uL0....

莖環法逆轉錄是一種逆轉錄反應的技術，它利用莖環結構的RNA分子作為反向引物，在逆轉錄過程中特異性地擴增目標RNA分子。該技術在分子生物學和醫學研究中得到了普遍的應用，特別是在RNA的研究和檢測中具有獨特的優勢。莖環法逆轉錄技術的基本原理是利用逆轉錄酶和莖環結構...

磁珠法DNA提取：磁珠法的原理是在磁珠表面修飾有對核酸有吸附作用的特定活性官能基團，通過不同的裂解液結合液洗滌液在特定的條件下能夠與目的物質進行特異性結合，同時利用磁珠自身的磁性，在外磁場的作用下可以方便的實現定向移動與富集，從而達到核酸與雜質分離的目的，進而...

過柱法DNA提取的優勢：離心柱法DNA提取它的優點是比傳統的酚氯法提取的純度高，有利于RNA保護，而且能進行微量操作，以其低廉的價格和相對便捷的操作，漸逐取代了傳統DNA提取方法，被高校科研所等市場普遍接受。離心柱法DNA提取的缺點是需要較多的樣本，耗材多，對...

莖環法試劑盒使用注意：1）較佳RT引物濃度依據具體實驗而定，引物濃度范圍可在200nM～800nM之間優化；2）RT反應結束后請立即將cDNA產物取出，快速置于冰上冷卻；3）內參引物（U6，5S等）的使用與miRNA的檢測方法一致。miRNAqPCR反應：1）...

DNA提取濃縮：一.固體聚乙二醇（PEG）濃縮：用透析袋外敷PEG至合適量。二.丁醇抽提濃縮：DNA溶液中水可分配到正丁醇或仲丁醇，但DNA不會。因此重復幾次可明顯減少DNA體積。三.乙醇或異丙醇沉淀：（1）需要陽離子鹽的存在，NaAc較常用,NaCl對含SD...

差速離心法分離外泌體的實驗原理：與等密度和梯度離心相反，差速離心從離心管內顆粒的均勻初始分布開始。在開始一輪離心過程中，位于管底部附近的一部分目標小顆粒不可避免地與較大顆粒共同沉淀。這種共沉淀導致較小顆粒的產量降低。然而，選擇大顆粒，起初位于管半月板附近，在開...

DNA提取方法：核酸（nucleicacid）在生物界中堪稱主宰，是一類非常重要的生物大分子，它在生物的繁衍、發育、維持、衰老和死亡等一切生命活動中扮演著重要的角色，目前，核酸已成為生物化學、遺傳學以及其他有關生命學科的熱門研究課題，其覆蓋面之廣、進展之速為其...

外泌體DNA提取過程：操作步驟：1.請自行準備：無水乙醇、1.5mL離心管。2.取出洗滌液，按以下操作：a)洗滌液A：21mL加入9mL無水乙醇；42mL加入18mL無水乙醇，混勻。b)洗滌液B：9mL加入21mL無水乙醇；18mL加入42mL無水乙醇，混勻。...

什么是DNA？DNA表示脫氧核糖核酸。它是儲存遺傳信息的主要核酸類型。DNA提取是研究基因和遺傳學的基礎，對于生物科學的發展至關重要。1953年頭次發現并描述了DNA的結構。將DNA描述為雙螺旋結構。脫氧核糖核苷酸是DNA的組成部分。因此，脫氧核糖核苷酸有三個...

逆轉錄過程是病毒的復制形式之一，如RNA病毒中的逆轉錄病毒，DNA病毒中的擬逆轉錄病毒的復制均需要經過逆轉錄。逆轉錄過程在真核細胞中也同樣存在，例如逆轉座子和端粒DNA的延長均存在逆轉錄過程，需逆轉錄酶的催化，端粒酶即為真核細胞中的逆轉錄酶。逆轉錄過程的揭示是...

DNA提取鑒定方法：分光光度法：在260nm和280nm處測定DNA溶液的光吸收，A260與A280之比應在1.75-1.80之間。低于此值表明制備物中殘留蛋白質成分較高或含有酚，高于此值表明有RNA的殘留。凝膠電泳分析：影響瓊脂糖凝膠電泳DNA遷移率的因素：...

目前新型的冠狀病毒所用的核酸檢測試劑盒，則是利用了PCR的原理，簡單來說就是通過DNA雙螺旋結構的特點來進行檢測，因為DNA雙螺旋結構是堿基互補配對的，也就是說我們可以在體外通過病毒的核酸序列做出一條互補鏈，然后用這個互補鏈做成試劑盒，如果你的體液里面還有這種...

RNA逆轉錄實驗注意事項：防止RNA模板的降解：毫無疑問，RNA質量對cDNA合成結果會產生重要影響。但RNA很脆弱，易于降解。為了保證RNA的完整性，我們需要小心又小心，比如在冰上操作，用RNase-free的頭頭和離心管，減少操作時間等。在反應體系中加入R...

人體內多種細胞及體液均可分泌外泌體，包括內皮細胞、免疫細胞、血小板、平滑肌細胞等。當其由宿主細胞被分泌到受體細胞中時，外泌體可通過其攜帶的蛋白質、核酸、脂類等來調節受體細胞的生物學活性。外泌體介導的細胞間通訊主要通過以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜...

miRNA的加尾法逆轉錄和qPCR，miRNA加尾法逆轉錄：增加miRNA逆轉錄產物長度較直接的方法就是增加miRNA的長度，即在miRNA的3端后面添加一段序列，然后進行逆轉錄反應。因此，加尾法是由兩個酶共同作用完成的，它們分別是PolyA聚合酶和逆轉錄酶。...

人體內多種細胞及體液均可分泌外泌體，包括內皮細胞、免疫細胞、血小板、平滑肌細胞等。當其由宿主細胞被分泌到受體細胞中時，外泌體可通過其攜帶的蛋白質、核酸、脂類等來調節受體細胞的生物學活性。外泌體介導的細胞間通訊主要通過以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜...

探針法qPCR試劑盒使用方法：ProbeqPCR反應（20μL體系，在樣品制備室進行）：1、如果做定量分析并且只做1次重復，則標記N+9個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照（用水做模板），6個用于標準曲線。如果做定性分析，...

植物蛋白提取試劑盒提取方法之等電點法：原理：在等電點時，蛋白質分子以兩性離子形式存在，其分子凈電荷為零(即正負電荷相等)，此時蛋白質分子顆粒在溶液中因沒有相同電荷的相互排斥，分子相互之間的作用力減弱，其顆粒很容易碰撞、凝聚而產生沉淀，所以蛋白質在等電點時，其溶...