N-乙酰谷氨酸(NAG)合成酶可催化谷氨酰胺和乙酰-輔酶A合成N-乙酰谷氨酸,其僅存在于肝臟細胞和小腸粘膜細胞的線粒體內(Wakabayashi等,1991;Bush等,2002)。N-乙酰谷氨酸合成酶是I型氨甲酰磷酸合成酶的一種重要的變構***劑(Meijer等,1990),它可合成鳥氨酸轉化成瓜氨酸時所必需的線粒體氨基甲酰磷酸(圖2)。此外,我們最近發現N-乙酰谷氨酸是腸上皮細胞線粒體中P5C合成酶的一個***劑,因為mM的N-乙酰谷氨酸可使其活性提高124%(Wu等,2004d)。因此,對14日齡仔豬而言,在腸上皮細胞的培養基中添加N-胺基甲基麩胺酸(NCG,一種在代謝上很穩定的N-乙酰谷氨酸類似物)可促進14日齡仔豬腸上皮細胞中谷氨酰胺和脯氨酸向瓜氨酸的轉化(Wu等,2004d)。很明顯,酶學和代謝研究表明,在14~21日齡的仔豬中,因線粒體N-乙酰谷氨酸合成酶活性降低而引發的N-乙酰谷氨酸利用率低下,是造成小腸利用谷氨酰胺或脯氨酸合成瓜氨酸受到限制的統一生化機制,因此是新生仔豬精氨酸缺乏的主要原因(Wu等,2004d)。 上海飼料精氨酸生素產品供應商
Wu說,自2006年起,該國際性飼料聯合大企業開始將此添加劑推向飼料市場,供小型豬場應用。自此以后已逐漸開發出一個可以滿足較大規模行業生產需要的配方。他說:“大型豬場需要能夠進行長時間儲存并大批量生產的產品。”首先,精氨酸的儲存穩定性并不利于以工業規模的大批量銷售。“我建議Nutreco公司如何提高此產品的儲存穩定性,現在此產品正銷往美國、西班牙和澳大利亞的大型畜牧業生產者。”該公司報道,商用精氨酸添加劑在其變得容易降解前的保質期為24個月。美國Nutreco公司養豬專家DwainGuggenbiller說:“我們對Wu博士的研究充滿信心,否則我們決不會推廣此產品的。”由于改良型配方提高了精氨酸添加劑的保質期且是商業秘密,Wu和Nutreco不愿對促使此產品成功的特殊成分或方法發表評論。Wu說:“這是一項極具開拓性的工作。”其它飼料公司想必會進行評價,特別是分析已公布的經濟效益。 豬飼料精氨酸生素品牌
:精氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、脯氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、鳥氨酸和瓜氨酸可在大多數哺乳動物(包括豬)體內通過復雜的***間代謝進行相互轉化。小腸、腎臟和肝臟是這些氨基酸代謝的主要場所,皮質醇則是這些代謝的一個重要調控***。由于這些氨基酸(除鳥氨酸和瓜氨酸之外)通常大量地存在于植物和動物的**蛋白中,所以養豬生產者習慣上不大關心豬日糧中精氨酸族氨基酸的添加問題。然而,最近的研究結果表明,這些氨基酸在養分代謝和免疫應答上起著重要的調控作用,從而會影響豬的飼料利用率。精氨酸和谷氨酸就是其中的典型**,它們具有明確的功能,因此被***地應用于豬肉生產中。由瓜氨酸在小腸中合成減少所引起的精氨酸缺乏,是限制哺乳仔豬獲得比較好生長性能的主要因素。酶學和代謝學研究結果均表明,對于7~21日齡哺乳仔豬而言,腸上皮細胞線粒體內N-乙酰谷氨酸的生物利用率低下應為通過谷氨酸和脯氨酸合成瓜氨酸受到阻礙負責。因此,無論在日糧中添加精氨酸還是口服N-胺基甲基麩胺酸(N-carbamylglutamate,N-乙酰谷氨酸的一種穩定的代謝類似物)都能提高哺乳仔豬的肌肉蛋白合成率和增重。此外,在早期斷奶的仔豬日糧中添加谷氨酸已可防治其小腸萎縮。
14~21日齡仔豬利用谷氨酰胺合成瓜氨酸的速率低于0~7日齡的仔豬(Wu等,1995b)。因此,我們假定瓜氨酸小腸合成的另一種前體物質為吮乳仔豬提供了額外的精氨酸。有趣的是,當給母乳哺育的仔豬服用氨基-2,3-二羥基安息香酸(Gabaculine,一種鳥氨酸轉氨酶***劑,該酶能夠將P5C轉化為鳥氨酸)后,其血漿中谷氨酰胺和脯氨酸的濃度提高了2倍(Flynn和Wu,1996),這表明脯氨酸可能是通過鳥氨酸轉氨酶催化合成瓜氨酸的底物。這種假設得到了豬小腸內含有脯氨酸氧化酶的證據所支持,不過未能確定表達這種酶活性的細胞類型(Samuelset等,1989)。我們利用放射化學檢測法發現,豬的腸上皮細胞通過線粒體脯氨酸氧化酶通道,將脯氨酸大量分解為P5C、瓜氨酸和精氨酸(Wu,1997)。脯氨酸轉化成瓜氨酸需要有氨和谷氨酸的參與,而它們都可通過谷氨酰胺的降解獲得(Wu等,1995b)。因為仔豬小腸從動脈血液中獲得的脯氨酸很少(Wu等.,1994a,b),所以通過腸道從豬乳中獲得大量的脯氨酸對彌補精氨酸的缺乏是至關重要的(圖4)。Ball及其合作伙伴(Brunton等,1999)的報道支持了這個觀點,他們發現仔豬很少利用動脈血中的脯氨酸合成精氨酸,因此給新生仔豬胃內服用脯氨酸對緩解精氨酸的缺乏非常有效。
在動物消化道內,精氨酸的吸收與色氨酸、賴氨酸和組氨酸等拮抗,因此,直接口服補充精氨酸得不到比較好效果。Arg是合成NO的***底物,過量的外源性L-Arg使機體在短時間內的NO含量急劇增高,NO的負作用突出,不僅不能保護機體免受致死性損害,反而導致***的機體損傷,對機體造成強烈破壞(Wink等,1998)。在14d仔豬日糧中添加%的精氨酸的生長性能低于對照組,而且第6d和10d血清賴氨酸含量***降低(Zhan等,2008)。而通過調控內源性精氨酸的合成補充機體內精氨酸的不足則可以避免其毒副作用。因此,非常有必要進一步研究內源性精氨酸的合成通路及其限速酶。精氨酸在體內主要參與鳥氨酸循環,在精氨酸酶Ⅰ的作用下脫胍基生成尿素和鳥氨酸,尿素進入血液循環,鳥氨酸在肝(或者腎臟以及腸粘膜)細胞中生成瓜氨酸,在線粒體合成后,即被轉運到胞液,在胞液經精氨酸代琥珀酸合成酶的催化下,與天冬氨酸反應生成精氨酸代琥珀酸,此反應由ATP供能。其后,精氨酸代琥珀酸再經精氨酸代琥珀酸裂解酶作用下,裂解成精氨酸及延胡索酸,反應部位在胞液(吳信等,2009)。其中N-乙酰谷氨酸(N-acetylglutamate,NAG)是氨基甲酰磷酸合成酶-Ⅰ(carbamoylphosphatesynthase-Ⅰ。
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Kim等(2004)在7~21日齡仔豬日糧中添加%和%精氨酸(通過乳飼喂系統進行人工喂養),發現血漿中精氨酸濃度隨之增加(30%和61%),增重增加(28%和66%)。Leibholz(1982)、黃琳等(2008a、b)和姚康等(2008)也有類似報道,提示滿足哺乳仔豬比較好生長的外源精氨酸的需要量比Southern和Baker(1983)、Baker(1997)估計的要高。哺乳仔豬的精氨酸缺乏是造成其亞生長的重要因素。但單純口服補充精氨酸或瓜氨酸并不提高哺乳仔豬氨基酸營養(Wu等,2004),應混合于日糧或人工乳中飼喂才能發揮其應有的功效。在精氨酸合成的代謝鏈中,N-乙酰谷氨酸(NAG)是氨甲酰磷酸合成酶-Ⅰ(CPS-Ⅰ)的變構***劑(Wu等,1998),對線粒體氨甲酰磷酸的生成有重要調控作用。Wu等(2004)認為,線粒體NAG是通過控制P5CS和CPS-Ⅰ的活性而在調節體內腸道合成瓜氨酸和精氨酸方面扮演關鍵角色,增加線粒體NAG有效性可能會刺激腸道瓜氨酸和精氨酸的生成,從而增強內源精氨酸的供給。但是哺乳動物的細胞質(包括線粒體)含有一種高活性的降解酶分解NAG,因此限制了通過細胞外NAG來增加線粒體NAG濃度的使用(Meijer等,1985)。N-氨甲酰谷氨酸(NCG)結構上與NAG類似且不易被降解。
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