根據我們對新生仔豬腸上皮細胞中瓜氨酸和精氨酸合成所進行研究獲得的結果,我們提出了此通道是否也會出現在豬胎兒上的問題(Dekaney等,2001,2003)。在對不同妊娠時期的母豬胎兒液進行分析后,我們發現母豬妊娠第40天(整個妊娠期為114d)時尿囊液中的精氨酸含量異常豐富(4~6mM),而在母體血漿精氨酸濃度卻為~mM(Wu等,1995a,1996a,1998a)。此外,我們發現母豬妊娠第40天時尿囊液中的鳥氨酸和谷氨酰胺水平分別達1~3mM和3~4mM的特高水平,而母體血漿濃度卻分別僅為~mM和~mM(Wu等,1995a,1996a)。尤為***的是,母豬妊娠第30~40天間,其尿囊液的精氨酸、鳥氨酸和谷氨酰胺含量分別提高23、18和4倍,而這3種氨基酸的氮含量占游離α-氨基酸氮總含氮量的67%(Wu等,1996a)。胎液中精氨酸族氨基酸(AFAA)的異常豐富可導致妊娠前半階段中NO和多胺的合成達到比較大化(Wu等,2003;Wu等,2005a),此階段是胎盤生長最快的時期(Knight等,1977;Self等,2004)。這些新的研究結果表明,精氨酸依賴型代謝通道在孕體生長和發育過程中起著至關重要的作用。妊娠母豬日糧添加精氨酸可提高其妊娠性能現代高產母豬每次排卵多達20~30個,但由于出生前的高損失使至妊娠終止時僅產9~15頭仔豬。
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Wu等,2004)。首先,日糧中添加精氨酸生素對血漿色氨酸、賴氨酸和組氨酸濃度沒有影響,說明AAA不影響小腸對這些氨基酸的吸收;第二,因為腸道中瓜氨酸和精氨酸的合成處于持續的***狀態,相對于母乳中其它基本氨基酸供給,日糧中添加AAA保證哺乳仔豬精氨酸的平衡;第三,AAA作P5C合成酶和CPS-1的代謝***體,低劑量的AAA在增加仔豬內源性精氨酸具有高敏感性;AAA在胞漿不被分解,在體內的腸道粘膜中的半衰期可能要更長(大概8~10h),每天加兩次可以有效提高血清精氨酸的濃度(Frank等,2007)。而且精氨酸生素AAA對人和動物沒0性,根據對大鼠的研究以及臨床用于***遺傳性NAGS缺點嬰兒的高氨血癥二十多年來,還沒有發現其副作用(Cohen等,1950)。傳統上認為,豬乳是能夠提供足夠量的氨基酸以滿足哺乳仔豬的生長需要,但近來的研究卻表明當豬乳作為仔豬***的日糧蛋白來源時,哺乳仔豬卻并不能夠獲得比較好的生長性能(Frank等,2007)。人工喂養仔豬試驗表明,出生后仔豬的生長生物學潛能至少是400g/d(從出生到21日齡時的平均值),比哺育母豬乳的仔豬(230g/d)高了74%。***研究表明,AAA可有效地提高內源性精氨酸的合成與供給,進而促進蛋白質的合成。以新生仔豬為模型。
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新生仔豬對精氨酸需求量很高,僅靠母乳很難滿足其比較好需要。Wu等(2000c)研究證實,7日齡的仔豬精氨酸需要量約為g/(kgBW°§d),母乳能提供的精氨酸僅為g/(kgBW°§d)。Dana等(2004)的研究也得出類似結論,4~7日齡仔豬精氨酸需要量為g/(kgBW°§d),而母乳僅能提供g/(kgBW°§d),即母乳最多提供仔豬所需精氨酸的55%,遠不能滿足仔豬比較好生長需要。除了母乳供給外,精氨酸的另一種來源是內源合成(見圖1),其對維持新生仔豬體內精氨酸平衡具有重要意義(Flynn和Wu,1996)。母乳中的谷氨酰胺/谷氨酸和脯氨酸是新生仔豬最初幾天腸細胞生成瓜氨酸和精氨酸的重要前體(Wu,1997;Wu等,1997)。此后,由于腸細胞二氫吡咯-5-羧酸合成酶(P5CS)活性很低,由谷氨酰胺/谷氨酸合成的精氨酸非常有限(Wu等,1994),脯氨酸便成為仔豬腸道合成精氨酸的主要前體(Urschel等,2007;Wilkinson等,2004)。1~7日齡的仔豬絕大多數腸細胞合成的瓜氨酸在高活性的精氨琥珀酸合成酶和精氨琥珀酸裂解酶作用下隨即轉化成精氨酸(Wu和Knabe,1995)。但稍大些的仔豬(14~21日齡),由于精氨琥珀酸合成酶活性降低,限制了瓜氨酸轉化成精氨酸的能力。
利用精氨酸獲得較大體重的仔豬刊登在《動物科學雜志(JournalofAnimalScience)》上的一篇論文指出,“母豬在哺乳期喂給添加了精氨酸的日糧,其哺育仔豬0~7日齡和0~21日齡的增重要高于飼喂對照組日糧的哺乳母豬哺育仔豬的增重。”總的說來,本研究結果表明了日糧中添加精氨酸對提高初產母豬的泌乳性能具有潛在的有益作用。Bazer說:“像豬等畜產動物的初生重與斷奶時的成活力之間存在著較高的相關性。如果我們能夠提高畜產動物的初生重和窩重,那么這將提高農場主能夠收益的生產動物數量。”Wu和Bazer說,至今為止他們的研究成果已經使母豬的窩產活仔豬數提高了2頭、窩活仔重提高了24%。Bazer說:“當每窩仔豬數多于7頭———如果所有仔豬都成活———那么屆時就是你賺錢的時候。”在日糧中加入混合氨基酸是一種常規的營養策略。“農場主是否要開始在日糧中添加精氨酸取決于成本效益的問題。”Wu說,很容易計算出對精氨酸添加進行投資是否將在生產后期獲得***的回報。Wu說:“多增的2頭新生仔豬可使每窩仔豬的獲利增加高達90美元。這一效益對豬肉生產者是極為有利的。
母豬妊娠階段,精氨酸對胚胎、胎盤和胎兒的發育具有重要作用。妊娠30~40d期間,豬尿囊液中精氨酸和鳥氨酸的濃度分別增加23和18倍,其含氮量占所有α-氨基酸含氮量的一半以上(Mateo等,2008)。胎兒尿囊液中精氨酸和鳥氨酸的含量升高,與前1/2妊娠期胎盤合成的NO和多胺量增加有關,這時的胎盤生長也最快,提示以精氨酸為主的代謝途徑在孕體生長發育過程中至關重要。這些營養物質可通過調節細胞內蛋白質周轉和細胞增殖對胚胎發生和著床、血管生成、胎盤生長和發育以及胎兒生長發揮作用。在哺乳動物胎兒期和哺乳期,精氨酸是一種必需氨基酸(Wu等,2004)。新生動物自身內源精氨酸合成對維持其體內的精氨酸平衡起著關鍵的作用。Wu等(1997)研究報道,哺乳仔豬在7日齡時其小腸合成瓜氨。源精氨酸來源)的速度比0~2日齡仔豬低70%~73%,并且在14~21日齡進一步下降(Wu等,1997)。Flynn等(2000)又進一步證實,在仔豬出生后的第3~14d,其血漿中的精氨酸濃度和其直接的前體物質(鳥氨酸和瓜氨酸)相比下降了20%~41%,然而血漿中氨的濃度卻逐漸升高了18%~46%(Flynn等,2000)。但就仔豬對精氨酸的需要量相對奶中的供應量來看,母乳中精氨酸量并不能夠滿足仔豬的比較好生長。
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鑒于已有的報道均表明口服精胺降低乳糖酶的活性[11,16],因此本試驗中乳糖酶活性的提高原因可能是由于母豬飼糧精氨酸通過影響母乳中IGF2Ⅰ等活性成分,刺激了腸腺的發育與成熟,從而增強了該酶的活性,為仔豬有效消化吸收營養物質提供支持。Young等[23]報道IGF2Ⅰ可提高大鼠腸黏膜乳糖酶的活性。Hartke等[24]研究發現,給仔豬口服IGF2Ⅰ可以使乳糖酶水解酶活性增加18%,蔗糖酶活性增加45%。Houle等[10]報道,初生仔豬每天攝入200mg/kg重組人IGF2Ⅰ,7d后在近端和中端回腸乳糖酶活性提高2倍,蔗糖酶活性提高50%。小腸上皮細胞在新陳代謝過程中,會不斷產生活性氧代謝物———自由基,當自由基產生過多時,超過機體***氧自由基的能力,即誘發氧化應激,引起脂質、蛋白質和DNA的過氧化,最終導致**、***的損傷[25]。小腸對氧自由基的損傷極為敏感,腸黏膜含有高濃度的非蛋白質巰基,氧自由基作用于巰基使蛋白質變性、酶失活,氧自由基與膜內多不飽和脂肪酸結合造成脂質過氧化損害,損傷腸黏膜**,這種損傷不僅降低腸細胞的吸收能力,還將導致膜的通透性加大,造成腸道細菌和內toxin移位,病原菌侵入的增加,使得巨噬細胞在吞噬過程中釋放活性氧數量增加。
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