NAG是內源性精氨酸合成過程中的限制因素之一。小豬腸上皮細胞線粒體NAG的含量較低,從而降低腸道瓜氨酸和精氨酸的合成,導致仔豬精氨酸缺乏(Wu等,2004)。與新生仔豬相比,7~14日齡仔豬小腸上皮細胞線粒體中NAG濃度降低,7日齡哺乳仔豬小腸合成的精氨酸減少了70%左右,在14~21日齡更進一步下降,與此時小腸合成精氨酸減少一致。研究表明,其原因可能是細胞5-羧基-吡咯啉合成酶(pyrroline-5-carboxylatesynthase,P5CS)和N-乙酰谷氨酸合成酶(N-acetylglutamatesynthase,NAGS)的活性降低。在2~21日齡仔豬,小腸CPS-Ⅰ的蛋白含量相似。NAGS只分布于肝臟和小腸黏膜細胞線粒體內,其功能是催化谷氨酸和乙酰輔酶A合成NAG。因而腸上皮細胞線粒體NAGS是內源精氨酸生成關鍵的限速酶,由此導致的NAG缺乏是限制仔豬腸內源性精氨酸合成的生化機制。貴州精氨酸生素品牌
N-乙酰谷氨酸(NAG)合成酶可催化谷氨酰胺和乙酰-輔酶A合成N-乙酰谷氨酸,其*存在于肝臟細胞和小腸粘膜細胞的線粒體內(Wakabayashi等,1991;Bush等,2002)。N-乙酰谷氨酸合成酶是I型氨甲酰磷酸合成酶的一種重要的變構***劑(Meijer等,1990),它可合成鳥氨酸轉化成瓜氨酸時所必需的線粒體氨基甲酰磷酸(圖2)。此外,我們**近發現N-乙酰谷氨酸是腸上皮細胞線粒體中P5C合成酶的一個***劑,因為mM的N-乙酰谷氨酸可使其活性提高124%(Wu等,2004d)。因此,對14日齡仔豬而言,在腸上皮細胞的培養基中添加N-胺基甲基麩胺酸(NCG,一種在代謝上很穩定的N-乙酰谷氨酸類似物)可促進14日齡仔豬腸上皮細胞中谷氨酰胺和脯氨酸向瓜氨酸的轉化(Wu等,2004d)。很明顯,酶學和代謝研究表明,在14~21日齡的仔豬中,因線粒體N-乙酰谷氨酸合成酶活性降低而引發的N-乙酰谷氨酸利用率低下,是造成小腸利用谷氨酰胺或脯氨酸合成瓜氨酸受到限制的統一生化機制,因此是新生仔豬精氨酸缺乏的主要原因(Wu等,2004d)。 質量精氨酸生素階格
由斷奶誘導產生的小腸精氨酸代謝增強與仔豬日齡或日糧變化無關(Dugan等,1995),但與血漿皮質醇濃度的上升有關(Worsae和Schmidt,1980)。給斷奶仔豬服用RU486(一種糖皮質***受體拮抗劑),會明顯減弱已增強的精氨酸代謝關鍵酶的表達,以及利用谷氨酰胺進行的精氨酸合成、腸上皮細胞中氨向尿素的轉化以及多胺的合成(Flynn和Wu,1997a,b;Wu等,2000a,b)。我們還發現,給14~21日齡哺乳仔豬服用皮質醇,***提高了小腸精氨酸的合成和降解速度,但當與RU486一起服用時這種效應就消失(Flynn和Wu,1997a,b)。這些結果表明,皮質醇激增(通過糖皮質***受體介導機制產生)在調控仔豬斷奶期間小腸精氨酸和脯氨酸代謝中起著重要的作用。我們的研究結果也從分子學機理的角度解釋了精氨酸和脯氨酸為何是哺乳仔豬和幼齡仔豬的必需氨基酸而不是斷奶后生長豬的必需氨基酸。應該記住的是,這并不一定意味著內源性合成的精氨酸足以滿足生長-肥育豬實現比較好生長性能時的需求。還需作深入的研究以確定生長-肥育豬日糧中添加精氨酸能否有利地改變重要**中蛋白質組以及細胞的信號傳導通道,進而提高機體內的蛋白沉積而降低脂肪的蓄積。
我們注意到,我們測得的母豬初乳和常乳的游離型和蛋白結合型精氨酸含量(Wu和Knabe,1994;Kim等,2004)均***低于一些研究人員所報道的結果(Csap®?等,1996;King等,1993),這可能是由于所用分析技術上的主要差異所致。例如,在我們的研究中,對氨基酸的分析包括鄰苯二甲醛柱前衍生化法、以高效液相色譜法分離氨基酸衍生物并用熒光分析法進行檢測(Wu和Knabe,1994;Kim等,2004)。而King等(1993)和Csap®?等(1996)在測定精氨酸族氨基酸時,先用離子交換層析法分離AFAA,再以茚三酮柱后衍生化法進行檢測。目前尚不清楚在使用柱后衍生離子色譜法時,豬乳中是否有一種或多種含氮化合物與精氨酸一起洗脫出來,進而導致豬乳樣本中精氨酸含量估值過高。就這一點而言,值得注意的是盡管Csap®?等(1996)的研究和Wu和Knabe(1994)的研究在日糧粗蛋白含量上*存在少量的差異(16%對14%),但前者所報道的母豬初乳中游離型精氨酸含量分別是后者的11倍和4倍。
在動物消化道內,精氨酸的吸收與色氨酸、賴氨酸和組氨酸等拮抗,因此,直接口服補充精氨酸得不到比較好效果。Arg是合成NO的***底物,過量的外源性L-Arg使機體在短時間內的NO含量急劇增高,NO的負作用突出,不僅不能保護機體免受致死性損害,反而導致***的機體損傷,對機體造成強烈破壞(Wink等,1998)。在14d仔豬日糧中添加%的精氨酸的生長性能低于對照組,而且第6d和10d血清賴氨酸含量***降低(Zhan等,2008)。而通過調控內源性精氨酸的合成補充機體內精氨酸的不足則可以避免其毒副作用。因此,非常有必要進一步研究內源性精氨酸的合成通路及其限速酶。精氨酸在體內主要參與鳥氨酸循環,在精氨酸酶Ⅰ的作用下脫胍基生成尿素和鳥氨酸,尿素進入血液循環,鳥氨酸在肝(或者腎臟以及腸粘膜)細胞中生成瓜氨酸,在線粒體合成后,即被轉運到胞液,在胞液經精氨酸代琥珀酸合成酶的催化下,與天冬氨酸反應生成精氨酸代琥珀酸,此反應由ATP供能。其后,精氨酸代琥珀酸再經精氨酸代琥珀酸裂解酶作用下,裂解成精氨酸及延胡索酸,反應部位在胞液(吳信等,2009)。其中N-乙酰谷氨酸(N-acetylglutamate,NAG)是氨基甲酰磷酸合成酶-Ⅰ(carbamoylphosphatesynthase-Ⅰ。
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除了作為CPS-Ⅰ和腸P5CS的***劑外無其他細胞反應,且易進入細胞和線粒體而發揮作用(Caldovic和Tuchman,2003)。NCG不但可以通過提高CPS-Ⅰ和P5CS的活性來增加腸道瓜氨酸和精氨酸合成,改善新生仔豬精氨酸營養供給(Wu等,2004),還能夠增加仔豬骨骼肌的蛋白合成,從而提高仔豬日增重(Frank等,2007)。對精氨酸的促生長機理的研究證實補充精氨酸對哺乳仔豬骨骼肌蛋白合成以及腸道蛋白合成具有重要作用(Corl等,2008;Yao等,2008)。除此之外,日糧添加精氨酸還能夠促進超早期斷奶仔豬的腸道發育,阻止腸絨毛萎縮,改善腸道消化與免疫機能(譚碧娥等,2008;黃琳等,2008b),有利于早期斷奶仔豬腸道微血管系統的發育,提高腸道的吸收功能(Zhan等,2008)。仔豬自出生至7日齡,母乳和內源合成的精氨酸基本能滿足其需要,此后母乳精氨酸含量下降,內源精氨酸合成減少,滿足不了仔豬比較好生長的需要,從而表現出低于比較大生長速度的亞生長。貴州精氨酸生素品牌
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