即外源腐胺進入小腸黏膜上皮細胞后代謝為精脒和精胺,進而促進小腸成熟[17219]。除此之外,口服IGF2Ⅰ能***增加仔豬小腸重量、DNA和RNA濃度以及空腸和回腸絨毛高度[9210],并能提高仔豬小腸吸收養分的能力[628]。312泌乳母豬飼糧精氨酸水平影響哺乳仔豬小腸黏膜機能的作用機理小腸是動物體內最重要的消化***,其中消化酶活性最能反映其消化機能。較早對小腸消化酶活性發育的研究,主要以黏膜層消化酶活性變化為衡量指標,其原因之一是小腸乳糖酶、麥芽糖酶和堿性磷酸酶等水解酶主要定位于絨毛刷狀緣,而并不分泌至腸腔[20222]。母乳是新生仔豬***的食物來源,而乳糖是母乳中最為重要的碳水化合物,因此乳糖酶的成熟對新生仔豬消化機能顯得特別重要。腸上皮細胞刷狀緣分布的堿性磷酸酶主要作用是催化多種磷酸單酯的水解,此外還與分泌型免疫球蛋白(SIgA)、杯狀細胞分泌的黏液組成動物與外界的一層屏障,阻止絕大多數外來致病原侵入。因此檢測小腸黏膜乳糖酶和堿性磷酸酶的活性可以在一定程度上反映小腸黏膜的消化機能。本研究對哺乳仔豬小腸黏膜中的乳糖酶和堿性磷酸酶活性進行了分析測定,結果表明,增加泌乳母豬飼糧精氨酸水平能夠提高哺乳仔豬小腸黏膜乳糖酶和堿性磷酸酶的活性。
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新生仔豬對精氨酸需求量很高,僅靠母乳很難滿足其比較好需要。Wu等(2000c)研究證實,7日齡的仔豬精氨酸需要量約為g/(kgBW°§d),母乳能提供的精氨酸僅為g/(kgBW°§d)。Dana等(2004)的研究也得出類似結論,4~7日齡仔豬精氨酸需要量為g/(kgBW°§d),而母乳僅能提供g/(kgBW°§d),即母乳最多提供仔豬所需精氨酸的55%,遠不能滿足仔豬比較好生長需要。除了母乳供給外,精氨酸的另一種來源是內源合成(見圖1),其對維持新生仔豬體內精氨酸平衡具有重要意義(Flynn和Wu,1996)。母乳中的谷氨酰胺/谷氨酸和脯氨酸是新生仔豬最初幾天腸細胞生成瓜氨酸和精氨酸的重要前體(Wu,1997;Wu等,1997)。此后,由于腸細胞二氫吡咯-5-羧酸合成酶(P5CS)活性很低,由谷氨酰胺/谷氨酸合成的精氨酸非常有限(Wu等,1994),脯氨酸便成為仔豬腸道合成精氨酸的主要前體(Urschel等,2007;Wilkinson等,2004)。1~7日齡的仔豬絕大多數腸細胞合成的瓜氨酸在高活性的精氨琥珀酸合成酶和精氨琥珀酸裂解酶作用下隨即轉化成精氨酸(Wu和Knabe,1995)。但稍大些的仔豬(14~21日齡),由于精氨琥珀酸合成酶活性降低,限制了瓜氨酸轉化成精氨酸的能力。 可行的精氨酸生素主要成分
NAG是內源性精氨酸合成過程中的限制因素之一。小豬腸上皮細胞線粒體NAG的含量較低,從而降低腸道瓜氨酸和精氨酸的合成,導致仔豬精氨酸缺乏(Wu等,2004)。與新生仔豬相比,7~14日齡仔豬小腸上皮細胞線粒體中NAG濃度降低,7日齡哺乳仔豬小腸合成的精氨酸減少了70%左右,在14~21日齡更進一步下降,與此時小腸合成精氨酸減少一致。研究表明,其原因可能是細胞5-羧基-吡咯啉合成酶(pyrroline-5-carboxylatesynthase,P5CS)和N-乙酰谷氨酸合成酶(N-acetylglutamatesynthase,NAGS)的活性降低。在2~21日齡仔豬,小腸CPS-Ⅰ的蛋白含量相似。NAGS只分布于肝臟和小腸黏膜細胞線粒體內,其功能是催化谷氨酸和乙酰輔酶A合成NAG。因而腸上皮細胞線粒體NAGS是內源精氨酸生成關鍵的限速酶,由此導致的NAG缺乏是限制仔豬腸內源性精氨酸合成的生化機制。
Wu和Knabe,1995)。事實上,斷奶仔豬前腸上皮細胞中精氨酸酶的缺乏導致了通過小腸進入門脈循環的精氨酸數量達到了比較大化(Wu等,1996b,2007)。有趣的是,腸內飼喂的仔豬利用灌胃的谷氨酸和脯氨酸所進行的精氨酸內源性合成受日糧精氨酸的攝入量調控(Wilkinson等,2004)。借助肝臟隔離灌注(IsolatedLiverPerfusion,ILP)技術(Wu等,1991)和氨基酸高效液相色譜(HPLC)分析法(Wu等,1994b)可以發現,當將Krebs重碳酸鹽緩沖液(含5mM葡萄糖和、或瓜氨酸以及血漿濃度的其他氨基酸)按每千克體重30mL/min的速度灌注14日齡哺乳豬的肝臟時,無證據表明肝臟攝入的瓜氨酸來自門靜脈(Wu等,1997)。而當以同樣的方法用Krebs重碳酸鹽緩沖液(含、或的L-精氨酸和血漿濃度的其它氨基酸)對14日齡哺乳仔豬的肝臟進行灌注時,肝臟從門靜脈中吸收的精氨酸分別為(±)%、(±)%和(±)%(平均數±SEM,n=8)。因此,正如從成年大鼠上獲得的研究結果一樣(Windmueller,1982;Dhanakoti等,1990),豬小腸所釋放的瓜氨酸未能被肝臟吸收,而是被肝外**(主要是腎臟)和細胞用來合成精氨酸(Wu和Brosnan,1992;Wu和Knabe,1995)。同樣,由于豬和大鼠的肝細胞氨基酸轉運系統y+。
通過提高細胞線粒體NAG水平,可能促進小腸瓜氨酸合成,從而增加內源性精氨酸供給。哺乳仔豬日糧中添加NAG可以成為***腸道瓜氨酸合成下降的一個有效方式,進而促進精氨酸的營養,提高日糧氨基酸合成蛋白質的利用率(Wu等,2004)。然而,哺乳動物的腸上皮細胞中降解NAG的脫酰(基)酶的活性很高,而限制了通過外源性添加NAG提高其線粒體濃度的途徑(Meijer等,1985)。。精氨酸生素(ArginineActivatorAdditive,AAA)是尿素循環中鳥氨酸生成瓜氨酸的中間體-NAG的類似物,可以***尿素循環中的***個酶CPS-Ⅰ——腸上皮細胞合成精氨酸過程中的一個關鍵的酶(Elhaji等,2004)。用AAA***NAGS缺乏的病人后,同位素標記的15N,血氨和血中谷氨酰胺含量***降低,血清尿素含量提高了2~3倍(Tuchman等,2008);用AAA***甲基丙二酸尿的病人,***增加了尿素含量,同時降低了血中谷氨酰胺、丙氨酸和甘氨酸含量,表明AAA的攝入影響氮代謝(Gebhardt等,2005,Jones等,2008)。許多研究發現,AAA在內源性精氨酸的調控中具有明顯的效果。體內和體外試驗證明,AAA促進了14日齡仔豬小腸上皮細胞瓜氨酸和精氨酸合成(Wu等,2004)。從日糧的管理途徑提高哺乳仔豬精氨酸或者瓜氨酸來說,添加AAA具有獨特的優勢。
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