近年來,隨著玻璃化冷凍技術的不斷發展,成熟卵母細胞紡錘體的冷凍保存研究取得了進展。研究表明,采用玻璃化冷凍法冷凍保存的成熟卵母細胞,在解凍后其紡錘體和染色體的形態及功能均能得到較好的保持。這主要得益于玻璃化冷凍過程中避免了冰晶形成對細胞的損傷,以及冷凍保護劑對細胞的有效保護。然而,值得注意的是,盡管玻璃化冷凍法在提高解凍存活率和妊娠成功率方面取得了成效,但仍存在一些問題。例如,冷凍過程中紡錘體的微管結構可能受到低溫的影響而發生解聚,導致染色體分離異常。此外,冷凍保護劑的毒性也可能對卵母細胞造成一定的損傷。為了克服這些問題,研究者們進行了大量的實驗和優化工作。例如,通過改進冷凍保護劑的配方和濃度,降低其對細胞的毒性;通過優化冷凍速率和程序,減少冷凍過程中對細胞的機械損傷;以及通過篩選和評估不同冷凍載體和保存時間對卵母細胞冷凍效果的影響,尋找好的冷凍保存條件。紡錘體的形成與細胞骨架的重構密切相關。北京Hamilton Thorne紡錘體卵細胞評價
在生殖醫學與輔助生殖技術的快速發展中,卵母細胞的冷凍保存技術顯得尤為重要。然而,卵母細胞,尤其是其內部的紡錘體結構,對低溫環境極為敏感,冷凍過程中的損傷往往影響解凍后卵母細胞的存活率及發育潛能。偏光成像技術,特別是Polscope偏振光顯微成像系統,結合了液晶可變減速器、電子成像及數碼成像技術,能夠捕捉到具有雙折性特征的細胞結構,如紡錘體。紡錘體由微管等高分子物質有序排列而成,這些物質能夠使偏振光發生折射現象,從而被檢偏器捕捉并通過偏振光顯微鏡觀察。這一技術無需對細胞進行固定和染色,能夠動態評估卵母細胞的質量與紡錘體的相關性,為卵母細胞冷凍保存的研究提供了新的手段。北京無需染色紡錘體兼容大部分顯微鏡紡錘體在細胞分裂中的穩定性對于細胞存活至關重要。
對于因疾病、年齡或其他原因可能失去生育能力的女性來說,MI期紡錘體卵冷凍技術提供了一種有效的生育能力保存方式。通過冷凍保存MI期卵母細胞并在適當的時候進行解凍和受精操作,可以實現生育愿望的延續。在輔助生殖技術中,MI期紡錘體卵冷凍技術可以用于提高試管嬰兒的成功率。通過選擇質量優良的MI期卵母細胞進行冷凍保存并在需要時進行解凍和受精操作,可以篩選出更具發育潛能的胚胎進行移植。MI期紡錘體卵冷凍技術還可以與遺傳病篩查技術相結合,通過檢測卵母細胞中的遺傳物質來篩選出健康的胚胎進行移植。這有助于降低遺傳病在后代中的發病率,提高出生人口的質量。
在紡錘體卵冷凍過程中,利用紡錘體實時成像技術可以實時監測紡錘體的變化。通過觀察冷凍過程中紡錘體的形態、位置及動態變化,研究者可以判斷冷凍保護劑的效果、冷凍速率等因素對紡錘體的影響,從而優化冷凍方案,減少紡錘體損傷。解凍后,利用紡錘體實時成像技術可以對卵母細胞內的紡錘體進行再次評估。通過比較解凍前后紡錘體的形態和穩定性,研究者可以判斷冷凍過程對紡錘體的損傷程度,并篩選出紡錘體形態完好的卵母細胞進行后續操作,提高受精率和胚胎發育質量。紡錘體形成缺陷是多種遺傳疾病的共同特征。
秋水仙素會使動物細胞染色體加倍嗎微管蛋白按照來源可分為植物微管蛋白和動物腦蛋白。因植物微管蛋白難以制備,秋水仙堿與動物腦微管蛋白結合反應研究得要更多一些。秋水仙堿是從植物秋水仙中提純出的一種生物堿,又名秋水仙素,構成微管的α、β微管蛋白異源二聚體是秋水仙素分子的結合靶點。當秋水仙堿與正在進行有絲分裂的細胞接觸時,秋水仙堿結合到微管蛋白的特定位點,導致α微管蛋白與β微管蛋白二聚體結構變形,從而阻斷微管蛋白組裝成微管,但并不影響微管蛋白的解聚,所以紡錘體會迅速消失。
秋水仙堿的濃度和作用時間對動、植物細胞染色體加倍的影響是關鍵。有研究結果表明,在花粉母細胞減數分裂細線期與粗線期進行美洲黑楊2n花粉的誘導效果比較好,總體上在減數分裂粗線期進行誘導得到的2n花粉**多,并且誘導的比較好濃度為0.5%。劉愛生等在利用人類外周血淋巴細胞進行染色體G顯帶制作中,在阻斷培養的4h內任意時間加入相應劑量的秋水仙素,能獲得用于G顯帶的形態完好、大小適中、分散均勻、輪廓清楚的中期染色體標本相。陳長超等利用秋水仙堿處理MⅠ期卵母細胞,結果發現Ml期紡錘體發生解聚,染色體周圍紡錘體微管全部消失或部分殘留,染色體排列異常。 紡錘體微管的排列和穩定性受到細胞骨架的支撐。上海卵母細胞紡錘體液晶偏光補償器
紡錘體在減數分裂中也發揮重要作用,確保生殖細胞染色體正確分離。北京Hamilton Thorne紡錘體卵細胞評價
冷凍與解凍過程中涉及多個環節,包括溫度控制、時間控制、冷凍保護劑的添加與去除等。這些環節中的任何一步操作不當都可能導致紡錘體損傷。因此,需要不斷優化冷凍與解凍技術,以減少對紡錘體的不良影響。近年來,研究者們通過不斷嘗試和優化冷凍保護劑的配方,取得了進展。例如,甘油、二甲基亞砜(DMSO)等滲透性保護劑被用于哺乳動物卵母細胞的冷凍保存中,它們能夠迅速降低細胞內水分含量,減少冰晶形成。同時,一些非滲透性保護劑如蔗糖、海藻糖等也被發現對紡錘體具有一定的保護作用。北京Hamilton Thorne紡錘體卵細胞評價