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發(fā)布時(shí)間:2024-10-29
在卵母細(xì)胞冷凍保存過(guò)程中,紡錘體的形態(tài)變化是評(píng)估冷凍效果的重要指標(biāo)之一。傳統(tǒng)的紡錘體觀察方法往往需要將卵母細(xì)胞固定并進(jìn)行免疫熒光染色,這不僅破壞了細(xì)胞的活性,還限制了進(jìn)一步觀察其發(fā)育潛能的機(jī)會(huì)。而偏光成像技術(shù)則能夠在不解凍、不染色的情況下,直接觀察紡錘體的形態(tài)變化。通過(guò)Polscope系統(tǒng),研究者可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)冷凍過(guò)程中紡錘體的形態(tài)變化,評(píng)估冷凍保護(hù)劑對(duì)紡錘體的保護(hù)效果,以及解凍后紡錘體的恢復(fù)情況。冷凍后的卵母細(xì)胞紡錘體及染色體異常率增高,這將直接影響解凍后卵母細(xì)胞的減數(shù)分裂進(jìn)程和胚胎的染色體正常性。利用偏光成像技術(shù),研究者可以準(zhǔn)確評(píng)估冷凍前后紡錘體的異常率,包括紡錘體的形態(tài)、位置、穩(wěn)定性等參數(shù)。通過(guò)對(duì)比分析,可以明確冷凍過(guò)程對(duì)紡錘體的具體影響,為優(yōu)化冷凍保存條件提供科學(xué)依據(jù)。紡錘體在細(xì)胞分裂過(guò)程中經(jīng)歷明顯的形態(tài)和結(jié)構(gòu)變化。北京紡錘體實(shí)時(shí)成像紡錘體
隨著科技的進(jìn)步,冷凍與解凍技術(shù)也在不斷創(chuàng)新。例如,玻璃化冷凍技術(shù)因其快速冷凍和解凍的特點(diǎn),能夠有效減少冷凍過(guò)程中的冰晶形成和滲透壓變化對(duì)紡錘體的損傷。此外,一些研究者還嘗試將微流控技術(shù)應(yīng)用于卵母細(xì)胞的冷凍保存中,以實(shí)現(xiàn)更精確的溫度控制和更均勻的冷凍保護(hù)劑分布。無(wú)損觀察技術(shù)如偏光顯微鏡(Polscope)和冷凍電鏡(Cryo-EM)等的應(yīng)用為MI期紡錘體卵冷凍研究提供了新的視角。這些技術(shù)能夠在不破壞卵母細(xì)胞活性的情況下實(shí)時(shí)觀察紡錘體的形態(tài)和變化,從而更準(zhǔn)確地評(píng)估冷凍保存的效果。北京紡錘體實(shí)時(shí)成像紡錘體紡錘體微管的動(dòng)態(tài)變化是細(xì)胞分裂周期的重要標(biāo)志。
紡錘體是卵母細(xì)胞在減數(shù)分裂過(guò)程中形成的一種微管結(jié)構(gòu),負(fù)責(zé)精確分離染色體。然而,紡錘體對(duì)環(huán)境溫度、滲透壓等外部條件極為敏感,在冷凍保存過(guò)程中容易發(fā)生損傷,導(dǎo)致染色體分離異常,進(jìn)而影響卵母細(xì)胞的發(fā)育潛力和受精后的胚胎質(zhì)量。因此,如何有效監(jiān)測(cè)和評(píng)估冷凍過(guò)程中紡錘體的變化,成為紡錘體卵冷凍研究的重要課題。紡錘體實(shí)時(shí)成像技術(shù)的出現(xiàn),為這一問(wèn)題的解決提供了可能。紡錘體實(shí)時(shí)成像技術(shù)主要利用高分辨率顯微鏡結(jié)合熒光標(biāo)記技術(shù),對(duì)卵母細(xì)胞內(nèi)的紡錘體進(jìn)行實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)的觀察和記錄。常用的熒光標(biāo)記方法包括使用綠色熒光蛋白(GFP)標(biāo)記微管蛋白,以及利用特定抗體對(duì)紡錘體相關(guān)蛋白進(jìn)行染色。通過(guò)這些方法,研究者可以清晰地觀察到紡錘體的形態(tài)、位置、動(dòng)態(tài)變化等信息,從而準(zhǔn)確評(píng)估冷凍過(guò)程中紡錘體的穩(wěn)定性和完整性。
紡錘體卵冷凍保存技術(shù)一直是研究的熱點(diǎn)。紡錘體作為卵母細(xì)胞減數(shù)分裂過(guò)程中的主要結(jié)構(gòu),其穩(wěn)定性和形態(tài)直接關(guān)系到卵母細(xì)胞的發(fā)育潛力和受精后的胚胎質(zhì)量。然而,傳統(tǒng)的紡錘體觀測(cè)方法往往需要對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行固定和染色,這不僅破壞了細(xì)胞的活性,還可能引入額外的損傷。因此,非侵入式成像技術(shù)作為一種新興的研究手段,在紡錘體卵冷凍研究中展現(xiàn)出了巨大的潛力和優(yōu)勢(shì)。非侵入式成像技術(shù)是指在不破壞細(xì)胞完整性和活性的前提下,通過(guò)光學(xué)、聲學(xué)、電磁等物理手段對(duì)細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)進(jìn)行成像的方法。這類(lèi)技術(shù)避免了傳統(tǒng)方法中細(xì)胞固定和染色帶來(lái)的損傷,能夠?qū)崟r(shí)、動(dòng)態(tài)地觀察細(xì)胞內(nèi)部的變化,為研究者提供了更加真實(shí)、準(zhǔn)確的細(xì)胞信息。在紡錘體卵冷凍研究中,非侵入式成像技術(shù)能夠直接觀測(cè)到冷凍和解凍過(guò)程中紡錘體的形態(tài)和動(dòng)態(tài)變化,為評(píng)估冷凍效果和優(yōu)化冷凍方案提供了有力支持。紡錘體,作為細(xì)胞分裂的“引擎”,驅(qū)動(dòng)著生命的延續(xù)與多樣性。
紡錘體觀測(cè)新技術(shù)提升“試管嬰兒”胚胎受精率
什么是紡錘體觀測(cè)儀?
紡錘體觀測(cè)儀是利用光線(xiàn)經(jīng)過(guò)雙折射性的物體時(shí)產(chǎn)生的光程差,對(duì)卵母細(xì)胞內(nèi)的紡錘體進(jìn)行動(dòng)態(tài)及無(wú)創(chuàng)觀察的顯微觀測(cè)系統(tǒng)。
紡錘體觀測(cè)儀主要有什么用處?
紡錘體觀測(cè)儀主要用于ICSI注射時(shí)紡錘**置觀測(cè),避免ICSI注射時(shí)對(duì)卵子的紡錘體損傷。
目前的ICSI注射方法是:假定成熟的MII卵母細(xì)胞的紡錘體靠近***極體,通過(guò)定位***極**置于6點(diǎn)或12點(diǎn)方向,在垂直于***極體的3點(diǎn)鐘方向注入精子。但事實(shí)上,紡錘體的位置不是固定不變的,***極體不能精細(xì)預(yù)測(cè)所有卵母細(xì)胞紡錘體的位置,約39%的紡錘體并不能通過(guò)***極體預(yù)測(cè)。傳統(tǒng)的ICSI注射很可能損壞紡錘體,若紡錘體損傷很可能導(dǎo)致卵母細(xì)胞死亡或染色體異常。因此,在ICSI注射時(shí)對(duì)紡錘體進(jìn)行觀察,對(duì)于ICSI操作和受精結(jié)局都有非常重要的意義,可以顯著提高ICSI受精率,有大量文獻(xiàn)報(bào)道正常受精率在觀察到紡錘體的卵子中***高于未觀察到紡錘體的卵子(83.3% VS 77.2%)。
紡錘體儀還有什么作用?
紡錘體觀測(cè)儀還可以對(duì)一代受精后的卵母細(xì)胞受精情況進(jìn)行評(píng)估,選擇未受精的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI***。 紡錘體的形成與細(xì)胞骨架的重構(gòu)密切相關(guān)。上海無(wú)損觀察紡錘體Oosight Meta
紡錘體形成過(guò)程中的任何錯(cuò)誤都可能影響細(xì)胞的命運(yùn)。北京紡錘體實(shí)時(shí)成像紡錘體
解凍后的卵母細(xì)胞在無(wú)損觀察技術(shù)的支持下,可以直接進(jìn)行紡錘體觀察,無(wú)需進(jìn)行任何形式的固定和染色處理。這一技術(shù)能夠迅速評(píng)估解凍后卵母細(xì)胞的質(zhì)量,包括紡錘體的形態(tài)、位置、穩(wěn)定性等關(guān)鍵指標(biāo),為后續(xù)的受精和胚胎發(fā)育提供重要參考。無(wú)損觀察紡錘體技術(shù)已逐步應(yīng)用于臨床輔助生殖技術(shù)中。醫(yī)生可以在不破壞卵母細(xì)胞活性的情況下,通過(guò)該技術(shù)評(píng)估其質(zhì)量并選擇合適的卵母細(xì)胞進(jìn)行受精和胚胎移植。這不僅提高了妊娠率和胚胎質(zhì)量,還減少了因卵母細(xì)胞質(zhì)量不佳而導(dǎo)致的移植失敗和流產(chǎn)風(fēng)險(xiǎn)。北京紡錘體實(shí)時(shí)成像紡錘體