浙江推薦的HE染色檢測

HE染色堿染料染主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著色。學上常用的一種染色方法為蘇木精 伊紅染色法。蘇木精 伊紅染色法 （ hematoxylin-eosin staining ） ，簡稱HE染色法 ，石蠟切片技術里常用的染色法之一 。蘇木精染液為堿 ，主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著紫藍色 ；伊紅為酸染料 ，主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色 。細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色，軟骨基質、鈣鹽顆粒呈深藍色，粘液呈灰藍色。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色，胞漿內嗜酸顆粒呈強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色，力纖維呈亮粉紅色，紅血球呈橘紅色，蛋白液體呈粉紅色。HE染色需要哪些材料及實驗步驟。浙江推薦的HE染色檢測

HE染色切片中出現(xiàn)類似色素樣的點狀結晶和黑色光滑的細胞核原因：切片封片前放置在空氣中時間太長，以至于二甲苯揮發(fā)切片干燥所致。對策：移去組織切片上的蓋玻片和封固劑，重新處理。將切片水洗數分鐘，然后重新脫水、透明、封固。封片過程中要保持組織切片的輕度濕潤，盡量不要讓其干燥。細胞核呈紅、棕色改變原因：蘇木精染色液過度氧化和切片在蘇木精染液染色后返藍不足。對策：首先，每次染色之前檢查蘇木精染色液的染色能力，發(fā)現(xiàn)氧化過度應及時更換。其次，可用流水、溫水或弱堿性溶液如稀氨水、0.2%碳酸氫鈉等，在蘇木精染色后，給切片以足夠的藍化時間。浙江推薦的HE染色檢測海馬組織HE染色如何觀察。

HE染色樣本組織固定與切片：首先將組織樣本進行常規(guī)的石蠟包埋。在模具中加入液態(tài)石蠟，將待包埋的組織樣本放入石蠟中，確保組織位置規(guī)整。補充少許液態(tài)的石蠟后，進行降溫冷凍，使石蠟變?yōu)楣虘B(tài)達到組織固定的效果，然后使用石蠟切片機進行切片，厚度在４-８um左右。將切完后的組織切片放入載玻片上使用40℃溫水浸泡使組織充分伸展。組織樣本脫蠟：將待測組織樣本切片放于二甲苯中，充分浸泡10min，浸泡完后更換二甲苯繼續(xù)浸泡10min，目的是使用二甲苯將切片中的石蠟溶解，這樣可以在進行染液染色的時候，染液可以充分進入組織種，同時，二甲苯還可以起到透明的作用，使切片更容易觀察。

HE染色：在組織病理學中，蘇木素-伊紅染色是一種日常使用比較普遍的常規(guī)染色方法。常規(guī)蘇木素染色的對比染色是用伊紅，也有采用焰紅，因為焰紅比伊紅色澤更鮮明，還有采用橘黃G，比布里希猩紅，波爾多紅等作為對比染色。伊紅是比較常用的胞質染料，本身溶于醇而不溶于水，為磚紅色粉末狀或醬紅色結晶。配方：伊紅Y（水溶）0.5-1g，蒸餾水99ml。如果取用伊紅Y（醇溶性）應當溶于99ml 75%或95%的乙醇中。如果在伊紅液中加入0.5ml冰醋酸，可以加速其染色過程，使得胞質的色澤更加艷麗。結果是細胞核呈藍色，胞質、肌肉、結締組織、紅細胞和嗜伊紅顆粒呈不同程度的紅色。鈣鹽和各種微生物也可染成藍色或紫藍色。肺部組織HE染色如何觀察。

HE染色脫蠟不凈的原因及驗證方法：1)二甲苯使用過久，含蠟成分太高或脫蠟效果差：可更換二甲苯驗證。2)切片經烤片，冷卻后放入二甲苯脫蠟或室溫太低；延長拖拉時間或用熱的切片脫蠟驗證。3)脫蠟時間太短或振蕩太少，幅度太小；可延長脫蠟時間或以多振蕩來驗證。4)洗滌二甲苯用的乙醇使用時間過久，導致乙醇中二甲苯含量過高，二甲苯殘留在切片上（由于二甲苯與水不相溶，切片上有二甲苯的地方，蘇木精就沒有辦法滲透進去，在切片染色完成后留下了點狀的不著**域）：更換各道乙醇驗證。5)二甲苯、乙醇質量不佳（偶有試劑瓶內裝的試劑與試劑名不相符）：換批號驗證。6)更換脫蠟液體時試劑拿錯：需重新配置驗證。7)更換脫蠟液體時試劑次序放錯：需重新配置驗證。8)烤片時間短，切片上水分沒有烤干，也會導致著色不勻，出現(xiàn)點狀發(fā)白區(qū)域。HE染色切片知識以及如何做出漂亮的切片。浙江推薦的HE染色檢測

HE染色規(guī)范化流程以及注意事項。浙江推薦的HE染色檢測

HE染色原理：一、細胞核染色原理：蘇木精為堿性天然染料，可使細胞核著色。細胞核內染色質的成分主要是DNA，在DNA的雙螺旋結構中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外。使DNA雙螺旋的外側帶負電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色，所以細胞核被染成藍色。二、細胞漿染色原理：細胞漿內主要成分是蛋白質，為兩性化合物、細胞漿的染色與pH值有密切關系，當pH調到蛋白質等電點4.7-5.0時，胞漿對外不顯電性，此時酸或堿性染料不易染色。當pH調到6.7-6.8時，大于蛋白質的等電點pH值，表現(xiàn)酸性電離，而帶負電荷的陰離子，可被帶正電荷的染料染色，現(xiàn)時胞核也被染色，核和胞漿難以區(qū)分。因此必須把pH調至胞漿等電點以下，在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷（陽離子），就可被帶負電荷（陰離子）的染料染色。伊紅Y是一種化學合成的酸性染料，在水中離解成帶負電荷的陰離子，與蛋白質的氨基正電荷（陽離子）結合而使細胞漿染色，細胞漿、紅細胞、肌肉、結締組織，嗜伊紅顆料等被***成不同程度的紅色或粉紅色，與藍色的細胞核形成鮮明的對比浙江推薦的HE染色檢測