FIR 逆轉 circACTN4 在 BC 細胞中的**促進作用
為了進一步研究 circACTN4 是否通過 circACTN4/FUBP1/MYC 軸發揮其生物學作用,在 OE-FIR 或 sh-FIR 與circACTN4或si-circ#2 共轉染后,在 BC 細胞中進行了一系列拯救實驗。結果表明,FIR 過表達可以顯著逆轉 circACTN4 上調在 BC 細胞增殖、遷移和侵襲中的促進作用,而 FIR 敲低通過傷口愈合、EdU 和 transwell 測定減弱了 BC 細胞中 circACTN4 下調介導的抑制作用。此外,IF 分析還表明 FIR 過表達和敲低可以明顯逆轉 circACTN4 上調和下調對 MYC 表達的影響。IF發現與*旁組織相比,在BC 組織中 MYC 高表達。WB分析表明,FIR的上調和下調可以通過過表達和沉默circACTN4來抵消對MYC及其下游蛋白CDK4和CCND2表達的增強和抑制作用。綜上所述,上述結果進一步證明circACTN4可能與FUBP1競爭性結合,阻斷FIR對MYC的轉錄抑制作用,從而促進BC的**發生和進展。 這些數據表明大黃酸***可以消除尿酸引起的腸道通透性增強。糖尿病科研整體服務
5)過表達miR-337-3p和miR-137抑制子宮內膜*細胞的惡性生物學行為
為了研究miR-337-3p和miR-137在子宮內膜*生物學行為中的可能作用,我們分別用agomir-337-3p/137和antagomir-3373p/137轉染Ishikawa和HEC-1A細胞。使用CCK-8和EdU檢測細胞增殖(圖5A和5B)。傷口愈合和Transwell檢測分別用于評估細胞遷移和侵襲。過表達miR-33373p和miR-137降低了Ishikawa和HEC-1A細胞的遷移和侵襲能力(圖5C和5D)。流式細胞術檢測并分析細胞周期分布(圖5E)。以上實驗結果證實,與miR-NC組相比,miR-337-3p和miR-137過表達***抑制了細胞的增殖、侵襲和遷移。 陽性染色科研英拜生物您隨身的科研小助手。
靶向**相關巨噬細胞(TAMs)是一種很有前途的策略,可以改變免疫抑制**微環境,改善**免疫***。單胺氧化酶A (MAO-A)是一種因其在大腦中的功能而***的酶,小分子MAO抑制劑(MAOIs)用于臨床***神經系統疾病。這里作者發現MAO-A誘導人和小鼠的TAMs進而可用于**的免疫***。該文2021年6月發表于《nature communications》IF:14.919期刊上。
主要實驗結果:1、MAO-A缺陷小鼠顯示與TAM極化改變相關的**生長減少
將同基因B16-OVA黑色素瘤接種給C57BL/6J小鼠,分離出TAM并評估TAM基因表達譜。除了參與調節巨噬細胞免疫應答的經典基因的變化,還觀察到一個Maoa基因在TAMs中的上調表達(圖1a),這表明MAO-A可能參與了TAM活性的調節。
Circ-0004872(本研究稱為““circMAPK1”)來自MAPK1基因的第2-4個外顯子,形成一個490 nt的重疊環狀轉錄本(圖1e)。Sanger測序證實了擴增的circMAPK1的頭尾剪接(圖1f)。接下來,我們研究了circMAPK1在GC細胞系中的表達水平。如圖1g所示,與正常的胃粘膜上皮細胞系相比,培養的GC細胞系中circMAPK1表達***下調。另外,circMAPK1*從cDNA中擴增,而不是從gDNA中擴增(圖1h),說明circMAPK1的環結構是由back-splicing產生的。然后我們進一步評估了circMAPK1的穩定性和定位。經過放線菌素D處理后,circMAPK1的半衰期明顯長于線性MAPK1(圖1i)。與MAPK1 mRNA的線性形式相比,circMAPK1對RNase R的降解具有抗性(圖1j)。隨后的細胞組分qRT-PCR分析(圖1k)和熒光原位雜交分析(圖1l)顯示,circMAPK1主要定位于細胞質而不是細胞核。嘌呤在細胞中執行許多重要的功能。
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細胞間的相互作用在**進展和轉移中發揮關鍵作用。目前關于這些**細胞是如何與其他細胞相互交流的仍有很多是未知的。**釋放的外泌體被認為是**進行細胞間溝通的有效介質。Dong等探索了肝細胞*(HCC)外泌體在其轉移和預后價值中的功能。本文于2021年6月發表在《Signal Transduction and Targeted Therapy》期刊上,IF:13.493。
1、外泌體的分離與鑒定以及HCC細胞的釋放和吸收
使用投射電子顯微鏡觀察了外泌體的形態和形狀;納米粒子**分析發現外泌體直徑在40-200nm之間,并且在6個HCC細胞系外泌體中都檢測到了外泌體標志物CD63,CD9,和Alix的表達;然后使用DIO標記高轉移性HCC細胞的外泌體(HMH-exo)和低轉移性HCC細胞外泌體(LMH-exo),在激光掃描共焦顯微鏡下觀察到綠色標記的HMH-exo和LMH-exo都可以被低轉移性HCC細胞細胞系有效吸收(圖1)。這些結果表明已經成功分離和純化HCC來源的外泌體并且他們可以被其它HCC細胞吸收。 糖尿病科研整體服務
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1.整體課題外包服務:RNA甲基化研究專題,外泌體研究專題,wnt/VEGF/toll等經典通路研究,設計的課題均具有后續實驗課題的延展性,為您的標書奠定較好的基礎
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4.二代測序:轉錄組測序、smallRNA測序、snoRNA測序、TRF測序
5.芯片:信號通路pcr芯片蛋白芯片
6.表觀遺傳實驗:DNA甲基化實驗(BSP,MSP,焦磷酸測序),RNA甲基化實驗
7.實時定量PCR(mRNA,LncRNA,microRNA,circRNA),WB,RNA功能驗證實驗(靶基因驗證,過表達,干擾),基因突變及SNP檢測,FISH,RNA-PULLdown,rip,chip實驗以及細胞增殖,凋亡,流式等細胞功能學實驗