上海細胞發(fā)育與分化科研

4）M1-BMDMs來源的外泌體在體內(nèi)阻礙脊髓損傷后的運動功能恢復和破壞BSCB

為了進一步研究巨噬細胞在SCI微環(huán)境中的作用及其對血管內(nèi)皮細胞的潛在影響，我們提取并鑒定了來自M1-BMDMs(M1-Exos)的外泌體。脊髓損傷后立即注射外泌體，在指定時間進行一系列行為評估(圖4A)。BMS行為分析表明，M1-Exos注射可導致脊髓損傷后后肢運動功能評分降低(圖4B)。足跡分析、電生理測試和游泳測試顯示了類似的結(jié)果，M1-Exos處理導致更短的步幅(圖4C)，更低的MEPs振幅(圖4D)，更傾斜的身體角度，更下垂的尾巴(圖4E)。EB外滲實驗顯示，M1-Exos處理組有更多EB染料滲漏到間隙中(圖4F)，TEM下血管TJs的電子密度遠低于PBS組，兩內(nèi)皮細胞之間的間隙也更明顯(圖4G)。此外，注射M1-Exos后，脊髓病變中血管ZO-1的熒光強度***減弱(圖4H)；TJs蛋白表達水平也明顯下調(diào)(圖4I)。我們還發(fā)現(xiàn)，M1-Exos給藥后，病變區(qū)域更多的α-SMA與CD31共存(圖4J)；I型膠原、III型膠原和α-SMA蛋白水平上調(diào)，CD31表達降低(圖4K)。以上結(jié)果表明，M1-Exos可能誘發(fā)EndoMT加重脊髓損傷后BSCB的損傷，阻礙運動功能恢復。 文章使用FMT(糞微生態(tài)移植)來確定大黃酸改變的腸道菌群是否對結(jié)腸炎有療效。上海細胞發(fā)育與分化科研

7.抑制NF-kB可抑制LPS和MCD誘導的Caspase-11表達

NF-kB已被證明在Caspase-11的表達和NASH發(fā)展中起重要作用。為了檢測NF-kB是否參與LPS和MCD誘導的Caspase-11表達，我們在LPS處理的原代肝細胞和MCD處理的小鼠中使用NF-kB抑制劑JSH-23。如圖7A所示，LPS處理促進了Caspase-11mRNA的表達，而JSH-23則抑制了LPS誘導的caspase-11的上調(diào)。相應的，我們檢測到LPS處理的原代肝細胞中pro-caspase-11蛋白水平***升高，而JSH-23/LPS處理的原代肝細胞中pro-caspase-11蛋白水平***降低(圖7B和C)。MCD處理誘導野生型小鼠肝臟中Caspase-11mRNA(圖7D)和蛋白(圖7E和F)的表達。相比之下，JSH-23***可抑制MCD誘導的Caspase-11的表達。 細胞功能科研省自然科學基金英拜提供一年三節(jié)的購物卡津貼。

第二次Ca2+升高，與RSL3處理常見，并被Fer-1抑制，對應的是針對鐵下垂的胞質(zhì)Ca2+增加(Ca2+sp) (圖2F)。在Erastin-1處理后，Ca2+un增加，隨后Ca2+sp上升，細胞周圍和**終的PI攝入(圖2C-E)。相比之下，RSL3處理的細胞具有獨特和特定的Ca2+上升，隨后細胞圓整和**終的PI攝入(圖2F-H)。通過脂質(zhì)過氧化傳感器C11 BODIPY 581/591觀察到RSL3處理促進了質(zhì)膜和亞細胞膜上的脂質(zhì)過氧化（圖2I），脂質(zhì)過氧化先于細胞圓化(圖2J, K)。考慮到胞質(zhì)Ca2+增加到細胞圓化之間的滯后時間始終低于脂質(zhì)過氧化到細胞圓化之間的滯后時間，可以估計Ca2+的增加發(fā)生在脂質(zhì)過氧化之后(圖2M)。這一估計是基于fluo- 4am(圖2F-H)和BODIPY氧化比(圖2K, L)的**動力學之間的推斷。

3）RIC8A與circPDE4B相互作用，參與OA

為了鑒別與circPDE4B相互作用的蛋白，我們采用RPD-MS(圖3A)，共鑒定出112個與circPDE4B相互作用的蛋白(圖3B)，確定了RIC8A。HCs中的RNA-蛋白共定位也證實了RIC8A和circPDE4B之間的相互作用(圖3C)。RPD實驗表明，體外線性轉(zhuǎn)錄的circPDE4B能夠拉下重組RIC8A(圖3D)。然后，我們使用catRAPID工具預測circPDE4B和RIC8A的相互作用區(qū)域(圖3E)。為了識別預測的結(jié)合位點，我們將FLcircPDE4B截短為3個片段。根據(jù)預測，RIP結(jié)果顯示只有FL和S3被RIC8A拉下(圖3F)。有綜合來看，這些結(jié)果表明circPDE4B在HCs中與RIC8A相互作用。 降低腸上皮細胞尿酸的產(chǎn)生。

五、npm1突變的AML亞型可預測總生存率

評估了原始亞型和committed亞型是否與患者總生存期相關(圖5A;補充圖22)。與committed亞型相比，原始亞型與明顯更差的生存率相關(Log-rank檢驗p=0.002)。為了確定我們的聚類是否超出了已建立的預測因素，我們還擬合了一個多變量Cox比例風險模型，調(diào)整了臨床病理參數(shù)，如性別、白細胞計數(shù)、年齡、核型和突變，包括FLT3-itd、FLT3-TKD、DNMT3A、NRAS和KRAS。多變量分析顯示，原始亞型和committed亞型具有***的互補預后價值(p-值=0.01，圖5B)。 METTL14上調(diào)促進胰腺*生長和轉(zhuǎn)移。野生型科研實驗外包

發(fā)現(xiàn)乳酸菌上清液降低了尿酸濃度。上海細胞發(fā)育與分化科研

PTEN是一種**抑制因子，調(diào)節(jié)多種細胞功能，包括***，PI3K/AKT信號通路是PTEN通過其磷酸酶活性靶向的**重要通路之一。因此，推測PI3K/AKT信號通路可能參與CRC細胞來源的外泌體miR-934誘導M2巨噬細胞極化。WB結(jié)果顯示過表達PTEN可以部分減弱miR-934和HCT-8細胞源外泌體對p-AKT和p-PI3K表達的增強作用，而沉默PTEN則相反（Fig. 5k）。更重要的是，當與HCT-8細胞來源的外泌體和PI3K抑制劑(LY294002)共培養(yǎng)時，PMA處理的THP-1細胞中p-AKT和M2標記物(CD206、arginase-1和CD163)的表達下調(diào)（Fig. 5l, m）。綜上所述，CRC細胞來源的外泌體miR-934可以通過下調(diào)PTEN表達和***PI3K/AKT信號通路誘導M2巨噬細胞極化。上海細胞發(fā)育與分化科研

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