CRC細胞外泌體的表征
作者分離從CRC細胞表面脫落的各種囊泡,通過電子顯微鏡、納米顆粒大小電位分析和蛋白質印跡鑒定外泌體。為了確定外泌體是否可以被CRC細胞內化,用熒光染料PKH67標記外泌體,然后將它們與SW480細胞共培養,結果顯示SW480細胞表現出高吸收效率。與PKH67標記的外泌體孵育24小時后,超過90%的SW480細胞對PKH67熒光呈陽性,表明外泌體被SW480細胞內化。
轉移性CRCSW620細胞分泌的外泌體促進CRC細胞的遷移、侵襲和EMT
作者使用細胞系SW480和SW620作為實驗模型,通過CCK-8在24小時、48小時和72小時測定細胞活力。結果表明,SW480-exo或SW620-exo細胞對細胞生長沒有顯著影響。此外,平板集落形成分析顯示SW480-exo或SW620-exo細胞之間的生長沒有差異。然而,來自轉移性CRCSW620細胞的外泌體通過Transwell測定顯著促進了SW480細胞的遷移和侵襲。此外,與SW480-exo和對照組相比,SW620-exo提高了SW480細胞的傷口愈合能力。蛋白質印跡分析以確定與EMT相關的蛋白質的表達水平。結果表明,相對于SW480-exo處理,SW620-exo處理顯著增加波形蛋白、纖連蛋白和N-鈣粘蛋白的表達并降低E-鈣粘蛋白的表達,表明源自轉移性CRC細胞的外泌體在SW480中誘導了EMT。 zVAD預處理也略微增加了IR后PTEN-398A細胞中未解決的DNA損傷灶的數量。自噬課題實驗外包
4、白樺素能改善小鼠血液、肝臟和脂肪組織中的脂質參數
測量了血液和其他組織中的脂質水平,如圖5所示。洛伐他汀和白樺素處理的小鼠的血清總膽固醇(TC)和甘油三酸酯(TG)的水平顯著低于對照***的小鼠(圖5A和5B)。值得注意的是,與洛伐他汀相似,白樺素降低了LDL膽固醇(LDL-c)的含量并增加了HDL膽固醇(HDL-c)(圖5C和5D)。有趣的是,盡管白樺素和洛伐他汀均降低了肝臟的TC水平,但只有白樺素顯著降低了肝臟的TG含量(圖5E和5F)。 VEGF課題分子生物學我們比較了Pex和Npex組間的HSC的RNA測序基因表達譜。
表達PTENWT的細胞,在雙胸苷激酶阻斷和輻射釋放后被阻滯在S期,表現出低水平的CDK2磷酸化(圖5A)。相反,經過相同處理的PTEN-398A細胞有更高水平的磷酸化CDK2(圖5A),這與DNA損傷檢查點的缺陷***一致。與PTEN-WT細胞相比,PTEN-398細胞中磷酸化的AKT和磷酸化的p27Kip1水平更高(圖5B)。雖然p27Kip1與CDK2和CyclinE在照射過的PTEN-WT細胞中有效地共免疫沉淀,但在PTEN-398A細胞中這些相互作用減弱(圖5C,D)。與我們在MCF10A細胞中觀察到的結果一致,免疫印跡分析顯示PTEN398A/398A裂解物中磷酸化的AKT和磷酸化的p27Kip1水平更高;MMTVNeu**與Pten+/+;MMTVNeu對應**進行比較(圖5E-H)??傊?,抑制ATM對PTEN的磷酸化增加了DNA損傷后AKT和p27Kip1的***,反過來有利于CDK2/CyclinE復合物的活性,并驅動細胞周期進程。
4、hnRNPA2B1在外泌體miR-934向巨噬細胞轉移中發揮作用
據報道,外泌體RNA的分泌需要一種特定的RNA結合蛋白來轉運。通過RNApull-down分析和質譜分析,鑒定了三種可能參與miR-934轉運的RNA結合蛋白,并發現敲除hnRNPA2B1可以降低外泌體miR-934的表達(Fig.4a,b)。hnRNPA2B1是一種RNA結合蛋白,通過與特定基序GGAG/CCCU結合,參與miRNAs的運輸和轉錄后調控。特別是,由于miR-934序列中有兩個GGAG基序,我們推測hnRNPA2B1可能通過與GGAG序列結合,介導miR-934包裝成外泌體的過程。此外,miRNApull-down分析顯示,在細胞質和外泌體中,miR-934和hnRNPA2B1之間存在***的結合關系,然而,突變miR-934的結合序列(GGAG)可削弱這種結合(Fig.4c)。RNA免疫沉淀分析進一步證明,無論是在CRC細胞及其外泌體裂解物中,miR-934在anti-hnrnpa2b1抗體組中比在anti-IgG抗體組中更***富集(Fig.4d)。此外,敲除hnRNPA2B1可以抑制外泌體miR-934從HCT8和LoVo細胞轉移到巨噬細胞的過程(Fig.4e)。因此,這些結果證實hnRNPA2B1可以通過與miR-934的GGAG序列結合,介導miR-934包裝到CRC細胞外泌體中,并將外泌體miR-934轉移到巨噬細胞中。 英拜生物致力于分子生物行業十余年。
YTHDF1水平的降低導致MGC-803移植**的**進展延遲(補充圖S2D和S2E);與對照組相比,YTHDF1缺陷**的重量和體積***減少(圖2D)。因此,在YTHDF1缺陷**中,增殖標記物Ki-67下調,凋亡標記物cleavedcaspase-3上調(圖2E)。通過兩種轉移模型探討YTHDF1是否參與了胃*的體內轉移。尾靜脈注射MGC-803-sicontrol細胞導致肺轉移,而注射MGC-803-siYTHDF1l細胞幾乎完全消除轉移淋巴結的形成。***建立了PDX模型,發現敲除YTHDF1抑制了**的生長和重量。上述結果表明YTHDF1在胃*發生中起重要作用。使用motif和CHIP-seq預測影響基因簇表達的轉錄因子。星形膠質細胞課題CRO
***ATM對PTEN的磷酸化增加了DNA損傷后AKT和p27Kip1的***。自噬課題實驗外包
是一家致力于提供生物、醫學等方向的科研技術服務的高新技術公司,本公司擁有一支功底深厚、經驗豐富、敬業守信的、多學科背景的**團隊。我們的工作人員一直關注于生命醫學領域前沿、熱點的研究方向與研究話題。我們將根據您提供的資料,幫您確定您的研究課題,以便您開展進一步的實驗。tRFRNAtRNA可分為兩類:tiRNA和tRFs。其在體內參與多種生理及病理過程,包括病毒、氧化應激、神經退行性疾病、遺傳性代謝疾病等。tRFRNA是目前研究的新穎點,在國外的期刊雜志上已經發表,且影響因子也高,接下來也會是研究的熱點??蛻舭咐齮RFRNA在、神經性疾病以及一些免疫代謝疾病方面取得了較大進展,并且在影響因子較高的期刊雜志上發表了文章。提供服務課題設計的原價:雜志的影響因子原價3分以下6000元3-5分10000元5-8分15000元8-10分23000元。自噬課題實驗外包
公司特色是以各式高通量二代測序為基礎,利用生物數據信息分析手段,通過英拜生物自有的分子、病理以及細胞實驗平臺,提供課題整體設計外包、撰寫SCI論文一站式服務。公司實驗平臺落座在漕河涇開發區浦江園區,實驗平臺開放參觀,客戶可隨時參觀實驗并參與實驗課題的進度,保證您的實驗是在您的指導下完成。
1.整體課題外包服務:RNA甲基化研究專題,外泌體研究專題,wnt/VEGF/toll等經典通路研究,設計的課題均具有后續實驗課題的延展性,為您的標書奠定較好的基礎
2.標書申請:提供標書課題設計、撰寫,標書部分基礎實驗的開展,設計的標書均符合科研前沿熱點,中標率很高。
3.提供熱點**文獻技術支持,探討科研前沿熱點研究:trfRNA,DNA/RNA甲基化,外泌體,自噬,WNT等相關研究
4.二代測序:轉錄組測序、smallRNA測序、snoRNA測序、TRF測序
5.芯片:信號通路pcr芯片蛋白芯片
6.表觀遺傳實驗:DNA甲基化實驗(BSP,MSP,焦磷酸測序),RNA甲基化實驗
7.實時定量PCR(mRNA,LncRNA,microRNA,circRNA),WB,RNA功能驗證實驗(靶基因驗證,過表達,干擾),基因突變及SNP檢測,FISH,RNA-PULLdown,rip,chip實驗以及細胞增殖,凋亡,流式等細胞功能學實驗