此外，Ago2 RIP 分析表明 miR-1252-5p、circ_0072083、ALKBH5 和 NANOG 可以在同一復合物上富集。此外，在U251/TR和U87/TR 細胞中，通過circ_0072083 沉默，miR-1252-5p 水平明顯增強。miR-1252-5p 過表達顯著降低了 U251/TR 和 U87/TR 細胞中的 ALKBH5 和 NANOG 水平。此外，在用 sh-NC + anti-NC、sh-circ_0072083 + anti-NC 或 sh-circ_0072083 + anti-miR-1252-轉染的細胞中研究了 circ_0072083/miR-1252-5p 軸對 ALKBH5 和 NANOG 水平的影響。ALKBH5和NANOG 水平通過circ_0072083沉默顯著降低，這通過miR-1252-5p 敲低恢復。此外，miR-1252-5p 敲低逆轉了 circ_0072083沉默介導的 TMZ IC50 降低、細胞增殖、遷移和侵襲以及促進 U251/TR 和 U87/TR 細胞凋亡。這些結果表明 circ_0072083 可以調節 miR-1252-5p/ALKBH5/NANOG 軸以控制膠質瘤細胞中的 TMZ 抗性。英拜生物是國內承接各類高通量測序科研項目以及一站式的測序文章發表服務的公司之一。遼寧細胞能動性科研
ircPLCE1編碼一種新的蛋白circPLCE1–411
為了研究CRC中circPLCE1的詳細機制，我們首先使用編碼潛能評估工具分析了circPLCE1的編碼潛能，提示circPLCE1的蛋白編碼概率大于0.999。接下來，我們分析了circPLCE1的ORF。在circPLCE1中存在一個潛在的跨越連接ORF編碼一個411氨基酸蛋白(以下簡稱circPLCE1-411，圖3A)。通過雙熒光素酶分析驗證了驅動ORF翻譯的內部核糖體進入位點的活性(圖3B)。接下來，我們構建了flag標記的質粒以確定circPLCE1-411的存在。通過qRT-PCR檢測circPLCE1和線性PLCE1的表達(圖3C)。此外，我們發現PLCE1抗體在circPLCE1-411中具有相同的免疫原序列(圖3D)。 解剖學科研地區科學基金英拜生物您隨身的科研小助手。
接下來，在低氧條件下，在HCCLM3和Hep3B細胞中敲低CFL1的表達（圖5A）。結果表明，CFL1敲除***逆轉了缺氧誘導的HCCLM3細胞增殖、細胞遷移和侵襲以及EMT（圖5A-D）。綜上所述，這些結果表明CFL1表達受HIF-1α的轉錄調控，介導缺氧誘導的HCC進展。
6、CFL1通過抑制泛素介導的PLD1降解來維持PLD1的表達為了進一步探索CFL1在HCC中致*作用的下游機制，利用KEGG數據庫篩選了受CFL1影響的通路。其中CFL1的高表達與細胞膜中細胞粘附分子和蛋白的定位密切相關（圖6A）。然后，基于蛋白質相互作用數據庫預測了CFL1和PLD1之間的潛在相互作用（圖6B）。CFL1敲低降低了HCCLM3細胞中PLD1的蛋白水平，而CFL1過表達增強了Hep3B細胞中PLD1蛋白表達（圖6C）。co-IP實驗表明，CFL1與PLD1相互作用，敲低CFL1可促進肝*細胞中PLD1的泛素化(圖6D-E)。用放線菌酮(CHX，2μg/mL)阻斷肝*細胞蛋白質合成。繪制蛋白降解曲線，表明CFL1敲低時PLD1蛋白降解更快（圖6F）。此外，蛋白酶體抑制劑MG132(25μM)處理可阻斷CFL1敲低誘導的HCC細胞中PLD1降解（圖6F）。因此，這些結果表明CFL1抑制肝*細胞中泛素介導的PLD1蛋白水解。
1）SsD在AML中表現出抗增殖活性
為了闡明SsD在白血病中的藥理作用，我們在10個人白血病細胞系中探討了一系列SsD濃度的影響。我們發現SsD在大多數白血病細胞系中以劑量依賴的方式抑制細胞活力(圖1A)。為了進一步研究SsD對白血病的抑制作用，我們在4種白血病細胞系NB4、kas1、MV4-11和U937(SsD敏感性排名前4位的細胞)進行了集落實驗。與細胞活力結果相似，SsD***抑制了所測細胞系的集落數量和大小(圖1B-E)。有趣的是，SsD對細胞增殖和活力的抑制可能是由于細胞周期阻滯在G1期和NB4細胞凋亡增加(圖1F-G)。 增加乳酸桿菌水平導致尿酸水平下降。
1、白樺素作為SREBP加工特異性抑制劑的鑒定
構建了一個由含SRE啟動子驅動的熒光素酶報告基因，并從人肝*細胞系Huh-7中生成了穩定表達該報告基因的細胞系(命名為Huh-7/SRE-Luc)。然后將該細胞與不同化合物孵育，并進行熒光素酶活性測定。有趣的是，只有白樺素[lup-20(29)-ene-3b,28-diol]有效降低了熒光素酶的活性。白樺素是一種天然存在的五環三萜，可以很容易地從樺樹皮中提取出來(比較高可達干重的30%)。
作者直接檢測了白樺素對SREBP加工的影響和特異性，并與25-HC進行比較。25-HC有三個主要作用：通過抑制SREBP-2的切割降低n-SREBP-2(圖1A)；***LXR，進而上調SREBP-1的轉錄，導致n-SREBP-1的增加(圖1A)；促進HMG-CoA還原酶(HMGCR)的降解，HMGCR是膽固醇生物合成中的限速酶(圖1B)。另一方面，白樺素有效降低了內源性的n-SREBP-1和n-SREBP-2(圖1A)，表明白樺素在不***LXR的情況下抑制了SREBP的加工。 2108年俞立團隊明確闡述了收集和檢測遷移體的實驗方法。丙酸科研國家自然科學基金
尿酸升高直接引起腸道屏障損傷。遼寧細胞能動性科研
circ_0072083 敲低降低了 TMZ 抗性
神經膠質瘤細胞中的 TMZ 抗性為了研究circ_0072083對TMZ抗性的作用，用sh-circ_0072083或sh-NC 轉染U251/TR和U87/TR細胞。用于穩定轉染的sh-circ_0072083是基于具有比較高敲低效率的si-circ_0072083#1序列構建的。sh-circ的轉染誘導U251/TR 和 U87/TR 細胞中circ_0072083 水平降低 65% 以上。circ_0072083 敲低明顯降低了 U251/TR 和 U87/TR 細胞中TMZ的IC50。接下來，在用TMZ (50 μg/mL) 處理的細胞中進行功能分析。在TMZ存在的情況下，circ_0072083沉默通過降低增殖和集落形成的能力顯著抑制細胞增殖。此外，在TMZ存在下，circ_0072083干擾明顯增加了U251/TR和U87/TR細胞的凋亡。此外，敲低circ_0072083顯著削弱了通過TMZ攻擊的兩種細胞系的遷移和侵襲能力。此外，在異種移植模型中研究了 circ_0072083對 TMZ 功效的影響。用sh-circ_0072083或sh-NC轉染U251/TR細胞建立異種移植模型，然后用TMZ（20mg/kg）或PBS處理小鼠。與 sh-NC + TMZ 組相比，sh-circ + TMZ 組的**體積和重量明顯減少。此外，與 sh-NC + TMZ 組相比，sh-circ_0072083 + TMZ 組中的 circ_0072083 豐度顯著降低。這些結果表明，circ_0072083 沉默減弱了膠質瘤中的 TMZ 抗性。 遼寧細胞能動性科研
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