接下來檢查了circMYH9對體內(nèi)CRC**生長的影響。將circMYH9shRNA或shCtrl對照穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的HCT116細(xì)胞和circMYH9質(zhì)粒或載體對照穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的LoVo細(xì)胞皮下注射到裸鼠體內(nèi)，注射21天后測量**體積，處死后測量**重量。與shCtrl對照細(xì)胞相比，CircMYH9敲除顯著抑制了**體積和重量，相比之下，與載體對照細(xì)胞相比，CircMYH9過表達(dá)表現(xiàn)出增加的**體積和重量。IHC分析顯示，由circMYH9shRNA轉(zhuǎn)染的HCT116細(xì)胞形成的**表現(xiàn)出較弱的Ki67染色和由過度表達(dá)circMYH9的LoVo細(xì)胞形成的細(xì)胞表現(xiàn)出比源自載體轉(zhuǎn)染細(xì)胞的**更強(qiáng)的Ki67染色。腸道微生物發(fā)酵的某些**終產(chǎn)物可進(jìn)入血液影響宿主***系統(tǒng)的生理功能。浙江甘油三酯標(biāo)書
6.FBW7通過鐵死亡和細(xì)胞凋亡增強(qiáng)吉西他濱的細(xì)胞毒性作用鐵死亡誘導(dǎo)劑RSL3也可以增加吉西他濱對胰腺*細(xì)胞的致死率，而鐵死亡抑制劑Fer-1則具有相反的作用。這表明***鐵死亡可以減輕胰腺*患者對吉西他濱的耐藥性。然后測試了FBW7對吉西他濱敏感性的影響。過表達(dá)FBW7T205A可明顯增強(qiáng)吉西他濱的細(xì)胞毒作用，而過表達(dá)FBW7R465H則無明顯變化。用Fer-1或zVAD或兩者同時預(yù)處理FBW7T205A過表達(dá)細(xì)胞。結(jié)果顯示，F(xiàn)er-1和zVAD均能部分挽救過表達(dá)FBW7T205A引起的細(xì)胞活力，而與Fer-1和zVAD聯(lián)合使用則能完全回避FBW7T205A引起的細(xì)胞活力。這些表明了FBW7通過鐵死亡和凋亡增強(qiáng)吉西他濱的細(xì)胞毒性作用。褪黑素標(biāo)書中標(biāo)率高探討SCI腸道微生物失調(diào)與神經(jīng)炎癥之間的分子相互作用。
5.腸道微生物群和循環(huán)代謝產(chǎn)物之間的聯(lián)系
采用非靶向代謝組學(xué)方法測量三組血清代謝產(chǎn)物，并研究腸道微生物組和宿主循環(huán)代謝產(chǎn)物之間的關(guān)系。主成分分析(PCA)顯示，三組間主要代謝成分差異***(圖6A)。OP***A的監(jiān)督正交投影評分圖也顯示出PCOS大鼠與對照組、DHEA+PBS組與DHEA+tempol組之間的明顯區(qū)別(圖6B)。圖6C列出了三組52種血清代謝物(包括26種脂類及類脂分子)的相對豐度，說明PCOS大鼠大部分血清代謝物的豐度與對照組大鼠完全不同，說明DHEA***對血清代謝有深遠(yuǎn)的影響。PCOS大鼠服用Tempol后，血清代謝產(chǎn)物的豐度也發(fā)生了***變化，引起28種血清代謝物豐度的變化在tempol作用下部分減弱(圖6C)。
EZH2在MB**組織中上調(diào)，是miR-101-3p的功能靶點，在MB**進(jìn)展中作為*基因
所示，**組織中EZH2mRNA相對表達(dá)量明顯高于*旁正常組織。我們還利用TargetScan數(shù)據(jù)庫研究了miR-101-3p在EZH23'UTR中是否存在匹配位點，并采用雙熒光素酶報告基因檢測證實了miR-101-3p與EZH2表達(dá)水平的相關(guān)性。轉(zhuǎn)染miR-101-3pmimic降低了由野生型EZH23’UTR驅(qū)動的熒光素酶活性，而轉(zhuǎn)染突變型后未見***變化。瞬時轉(zhuǎn)染miR-101-3p也降低了在Daoy細(xì)胞中EZH2的mRNA和蛋白水平。接下來，為了研究EZH2在MB中的功能，我們使用siRNA下調(diào)其在Daoy細(xì)胞中的表達(dá)。功能檢測顯示，EZH2的下調(diào)抑制MB細(xì)胞活力、遷移和侵襲，同時促進(jìn)MB細(xì)胞凋亡。綜上所述，這些結(jié)果表明miR-101-3p可以直接靶向EZH2和FOXP4抑制MB。 FMT***可能通過改變糞便短鏈脂肪酸介導(dǎo)宿主的病理生理變化。
3）CircMAPK1在體內(nèi)抑制胃*的發(fā)生和轉(zhuǎn)移
為了進(jìn)一步證實體外研究結(jié)果，我們在體內(nèi)驗證了circMAPK1在影響致瘤性方面的生物學(xué)作用。circMAPK1的沉默可***促進(jìn)**的生長。相比之下，過表達(dá)circMAPK1***抑制了皮下**的生長(圖3a)。接下來，我們通過對增殖細(xì)胞標(biāo)記物Ki67的染色來監(jiān)測異種移植瘤的增殖。穩(wěn)定敲除circMAPK1的**組織表現(xiàn)出更強(qiáng)的Ki67染色，而過表達(dá)circMAPK1的**組織表現(xiàn)出更弱的Ki67染色(圖3b和c)。為了研究circMAPK1在體內(nèi)的轉(zhuǎn)移潛能，我們用熒光素酶質(zhì)粒穩(wěn)定地轉(zhuǎn)染上述細(xì)胞系，然后注射到裸鼠的尾靜脈中。結(jié)果顯示，circMAPK1的敲低有效地增加了肺轉(zhuǎn)移病灶的數(shù)量和大小。相比之下，生物發(fā)光成像(圖3d和e)和H&E染色(圖3f和g)顯示，過表達(dá)circMAPK1減少了肺轉(zhuǎn)移病變。 WB結(jié)果顯示結(jié)腸中炎癥分子的相對表達(dá)似乎低于脊髓中的。TOLL標(biāo)書廣州
circSDHC是一個很有前景的RCC患者潛在的預(yù)后生物標(biāo)志物和***靶點。浙江甘油三酯標(biāo)書
miR-101-3p或miR-423-5p過表達(dá)抑制體內(nèi)**的發(fā)生
為了評估m(xù)iR-101-3p和miR-423-5p在體內(nèi)的抗**作用，將轉(zhuǎn)染LV16-miR-101-3p、LV16-miR-423-5p或LV16-NC（陰性對照）的Daoy細(xì)胞（5106）皮下注射到雄性Balb/c裸鼠體內(nèi)，并每周測量產(chǎn)生的**體積。通過RT-qPCR測定轉(zhuǎn)染慢病毒的Daoy細(xì)胞中miR-101-3p和miR-423-5p的相對表達(dá)水平。注射后2周可觸及**，植入后7周處死小鼠。與對照組相比，LV16-miR-101-3p和LV16-miR-423-5p***組的**生長受到***抑制。使用miR-101-3p或miR-423-5p***后，**重量也***降低。通過免疫組織化學(xué)評估了EZH2、FOXP4和Ki-67在異種移植**組織中的表達(dá)。與對照組織相比，表達(dá)LV16-miR-101-3p和LV16-miR-423-5p的**組織中FOXP4和Ki-67的水平均下調(diào)，而表達(dá)LV16-miR-101-3p的**組織中EZH2的水平也下調(diào)?？傊?，這些數(shù)據(jù)表明miR-101-3p和miR-423-5p通過抑制FOXP4和EZH2的表達(dá)來抑制體內(nèi)**生長。 浙江甘油三酯標(biāo)書
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