在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 則是結(jié)合了高保真性和便捷性的理想選擇。這種預(yù)混液不僅繼承了Pfu DNA聚合酶的重要的保真性,還通過(guò)添加熒光染料,為實(shí)驗(yàn)提供了更直觀的監(jiān)測(cè)手段。Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)的熒光染料。Pfu DNA聚合酶以其高保真性著稱(chēng),其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過(guò)程中糾正錯(cuò)誤摻入的堿基,提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。與普通Taq酶相比,Pfu酶的錯(cuò)誤率更低,使其成為基因克隆、突變分析和測(cè)序準(zhǔn)備等高精度實(shí)驗(yàn)的優(yōu)先工具。熒光染料的加入是該預(yù)混液的一大亮點(diǎn)。這種染料能夠在PCR過(guò)程中實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)DNA的擴(kuò)增情況,通過(guò)熒光信號(hào)的強(qiáng)度變化反映目標(biāo)基因的擴(kuò)增程度。實(shí)驗(yàn)人員無(wú)需額外添加染料或進(jìn)行復(fù)雜的后處理,即可直接在PCR儀上觀察擴(kuò)增曲線,從而實(shí)現(xiàn)快速、準(zhǔn)確的定量分析。這種設(shè)計(jì)不僅節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時(shí)間,還減少了人為操作帶來(lái)的誤差。此外,Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 的2倍濃度設(shè)計(jì)進(jìn)一步簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。實(shí)驗(yàn)人員只需加入模板DNA和引物,即可直接進(jìn)行反應(yīng),減少了手動(dòng)配制反應(yīng)體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差。
10×DNA Loading Buffer:助力DNA電泳的關(guān)鍵試劑在分子生物學(xué)研究中,DNA凝膠電泳是一種常用的技術(shù),用于分離和分析DNA片段的大小和純度。而10×DNA Loading Buffer作為電泳實(shí)驗(yàn)中的關(guān)鍵試劑,其性能和特點(diǎn)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性起著至關(guān)重要的作用。一、產(chǎn)品特點(diǎn)10×DNA Loading Buffer是一種10倍濃縮的上樣緩沖液,主要用于DNA凝膠電泳。其主要成分包括甘油、EDTA、溴酚藍(lán)和二甲苯青等。甘油的高密度特性使得DNA樣品能夠快速沉入凝膠加樣孔中,避免樣品漂浮。EDTA則可螯合反應(yīng)緩沖液中的Mg2?,終止反應(yīng),防止核酸外切酶活性導(dǎo)致的產(chǎn)物降解。此外,該緩沖液中添加了溴酚藍(lán)和二甲苯青兩種指示劑,分別用于指示電泳進(jìn)程。在1%瓊脂糖凝膠中,二甲苯青條帶約為4Kb,溴酚藍(lán)條帶約為400bp。這種雙指示劑系統(tǒng)為電泳提供了直觀的參考,幫助研究人員實(shí)時(shí)監(jiān)控電泳進(jìn)度。二、性能優(yōu)勢(shì)10×DNA Loading Buffer的性能優(yōu)勢(shì)在于其高穩(wěn)定性和適用性。它適用于多種類(lèi)型的DNA樣品,包括雙鏈DNA、單鏈DNA、DNA引物以及小RNA等。此外,該緩沖液不僅適用于瓊脂糖凝膠電泳,還可用于非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE),滿(mǎn)足不同實(shí)驗(yàn)需求。Recombinant Mouse Persephin該預(yù)混液能夠擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)5 kb的DNA片段,并且對(duì)不同抗凝劑處理的血液樣本均表現(xiàn)出良好的兼容性。
racil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Cod) (1U/μl):高效防污染的熱敏型酶Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Cod) 是一種來(lái)源于鱈魚(yú)的熱敏型尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG/UNG),能夠特異性地催化水解DNA鏈中的尿嘧啶堿基,釋放游離尿嘧啶,從而防止PCR產(chǎn)物的氣溶膠污染。產(chǎn)品特點(diǎn)該酶對(duì)單鏈和雙鏈DNA均具有活性,但對(duì)RNA無(wú)作用。其比較大特點(diǎn)是熱敏感性,可在55℃下10分鐘內(nèi)完全失活,避免了常規(guī)UDG酶滅活后可能殘留的活性對(duì)含dU擴(kuò)增產(chǎn)物的降解作用。這種特性使其在PCR和RT-qPCR反應(yīng)中表現(xiàn)出色,尤其適用于需要快速滅活的場(chǎng)景。應(yīng)用場(chǎng)景去除PCR產(chǎn)物污染:通過(guò)降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止氣溶膠污染導(dǎo)致的假陽(yáng)性結(jié)果。RT-qPCR防污染:在逆轉(zhuǎn)錄前去除殘留的PCR產(chǎn)物,避免假陽(yáng)性。單鏈或雙鏈DNA處理:用于去除DNA中的尿嘧啶堿基。在PCR反應(yīng)中,建議在反應(yīng)體系中加入1 U/50 μL的UDG/UNG,以確保完全去除含dU的模板。此外,該酶在多數(shù)PCR反應(yīng)緩沖液中均有活性,但在高離子強(qiáng)度(>200 mM)下會(huì)被抑制。
10× DNA Loading Buffer 是一種高濃度的即用型試劑,廣泛應(yīng)用于DNA凝膠電泳實(shí)驗(yàn)中。它通過(guò)添加特定的染料和高密度成分(如甘油或蔗糖),使DNA樣品在電泳過(guò)程中更容易沉降并被觀察,是DNA分析實(shí)驗(yàn)中不可或缺的工具。產(chǎn)品特點(diǎn)高密度與染料標(biāo)記:10× DNA Loading Buffer 含有高濃度的甘油或蔗糖,能夠使DNA樣品在電泳時(shí)沉降于凝膠孔底部,避免漂浮。同時(shí),其中的染料(如溴酚藍(lán)或二甲苯藍(lán))可以指示DNA遷移的位置,便于實(shí)時(shí)觀察電泳進(jìn)程。即用型設(shè)計(jì):無(wú)需額外配制,直接與DNA樣品混合即可使用,簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。兼容性強(qiáng):適用于多種類(lèi)型的DNA樣品,包括PCR產(chǎn)物、質(zhì)粒DNA、基因組DNA片段等,也兼容瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠電泳。穩(wěn)定保存:常溫保存,穩(wěn)定性高,無(wú)需特殊處理。應(yīng)用場(chǎng)景DNA片段分離:在瓊脂糖凝膠電泳中,用于分離和分析DNA片段,如PCR產(chǎn)物、質(zhì)粒DNA、限制性酶切片段等。電泳指示:染料的遷移速率可以作為DNA片段大小的參考,幫助判斷目標(biāo)片段的位置。DNA回收:在DNA回收實(shí)驗(yàn)中,幫助定位目標(biāo)條帶,便于后續(xù)的切膠回收操作。在基因編輯過(guò)程中,Pfu DNA Polymerase 可用于合成高質(zhì)量的單鏈或雙鏈DNA修復(fù)模板。
在分子生物學(xué)研究中,核酸染色是檢測(cè)DNA和RNA的關(guān)鍵步驟,而溴化乙錠(EthidiumBromide,EB)作為一種經(jīng)典的熒光染料,因其高效性和靈敏性被廣泛應(yīng)用于核酸電泳、熒光分析等領(lǐng)域。產(chǎn)品特點(diǎn)高靈敏度與特異性EB是一種多環(huán)芳烴熒光小分子,能夠特異性地嵌入雙鏈DNA和RNA中。結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度增強(qiáng),雙鏈RNA和雙鏈DNA的熒光強(qiáng)度分別可增強(qiáng)21倍和25倍。這種特性使得EB能夠檢測(cè)到低至10ng的DNA條帶,非常適合用于微量核酸的檢測(cè)。多種應(yīng)用EB不僅用于瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳中的核酸染色,還可以作為DNA聚合酶抑制劑,用于核酸的熒光分析實(shí)驗(yàn)。此外,EB還可與吖啶橙聯(lián)合使用,用于區(qū)分活細(xì)胞、凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞。便捷的使用方法10mg/ml的EB溶液是一種預(yù)制的儲(chǔ)存液,使用時(shí)只需稀釋至工作濃度(通常為0.5μg/ml),即可用于電泳前或電泳后的染色。例如,在瓊脂糖凝膠制備時(shí),每100mL膠液中加入2-5μL的10mg/mlEB溶液即可。穩(wěn)定的儲(chǔ)存條件10mg/ml的EB溶液在室溫下避光保存即可,有效期可達(dá)1-2年。這種儲(chǔ)存條件使得EB溶液在實(shí)驗(yàn)室中易于保存和管理。Hot-Start Taq DNA Polymerase 是一種經(jīng)過(guò)改良的Taq DNA聚合酶,為提高PCR反應(yīng)的特異性和靈敏度而設(shè)計(jì)。ecombinant Human Growth Hormone (Human GH)
Pfu Master Mix (2×) (Without Dye) 是一種專(zhuān)為高保真PCR擴(kuò)增設(shè)計(jì)的預(yù)混液,廣泛應(yīng)用于科研領(lǐng)域。Recombinant Biotinylated Human KIR2DL1 Protein,His-Avi Tag
高密度設(shè)計(jì),確保樣品沉降6×DNALoadingBuffer是一種六倍濃縮的上樣緩沖液,其主要成分包括甘油或蔗糖等高密度物質(zhì)。這些成分能夠增加樣品的密度,使DNA樣品在加樣后能夠迅速沉入瓊脂糖凝膠的加樣孔底部,避免樣品漂浮,從而確保電泳過(guò)程的順利進(jìn)行。雙色指示劑,直觀監(jiān)控電泳進(jìn)程該緩沖液通常含有兩種示蹤染料——溴酚藍(lán)和二甲苯青。溴酚藍(lán)的遷移速度接近300bp的雙鏈DNA,而二甲苯青的遷移速度則接近4-5kb的雙鏈DNA。通過(guò)觀察這兩種染料的遷移情況,研究人員可以直觀地判斷電泳的進(jìn)程,從而避免電泳時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或不足。穩(wěn)定樣品,防止降解6×DNALoadingBuffer中還含有EDTA等成分,能夠螯合鎂離子,防止核酸酶對(duì)DNA的降解,從而保護(hù)DNA樣品的完整性。此外,其配方優(yōu)化后,能夠在電泳過(guò)程中維持DNA的穩(wěn)定狀態(tài),確保電泳結(jié)果的可靠性。兼容性強(qiáng),適用范圍廣6×DNALoadingBuffer適用于多種類(lèi)型的核酸電泳,包括瓊脂糖凝膠電泳和非變性丙烯酰胺凝膠電泳。其優(yōu)化的配方使其在不同濃度的瓊脂糖凝膠中均能表現(xiàn)出良好的性能,且與常見(jiàn)的電泳緩沖液(如TAE和TBE)完全兼容。Recombinant Biotinylated Human KIR2DL1 Protein,His-Avi Tag