醫(yī)學(xué)科研科研贈送提供技術(shù)路線

。***，用新的基于文獻(xiàn)的化學(xué)同義詞增強(qiáng)了CTD化學(xué)頁面（以改進(jìn)查詢），并添加了1600個基于氨基酸的化合物（以增加化學(xué)景觀）?？傊?，這些更新繼續(xù)增強(qiáng)CTD作為一個強(qiáng)大的資源，以產(chǎn)生關(guān)于環(huán)境影響疾病的病因和分子機(jī)制的可測試的假設(shè)。

首先這是首頁界面，可以根據(jù)自己想了解的疾病、化學(xué)品、基因和通路等進(jìn)行搜索。我們以氣道梗阻為例，首先進(jìn)入視野的就是進(jìn)本信息，然后是化學(xué)品與基因相互作用，其次是氣道梗阻相關(guān)化學(xué)品，之后是氣道梗阻相關(guān)基因，***還有表型和通路相關(guān)數(shù)據(jù)。 專注于生命科學(xué)內(nèi)的前沿研究。醫(yī)學(xué)科研科研贈送提供技術(shù)路線

隨后，我們研究了miR-337-3p和miR-137是否負(fù)調(diào)控MIR210HG的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)過表達(dá)miR-337-3p/137會下調(diào)MIR210HG的表達(dá)，而敲除miR-337-3p/137會上調(diào)MIR210HG的表達(dá)(圖4G)。

過表達(dá)miR-337-3p和miR-137抑制子宮內(nèi)膜*細(xì)胞的惡性生物學(xué)行為

為了研究miR-337-3p和miR-137在子宮內(nèi)膜*生物學(xué)行為中的可能作用，我們分別用agomir-337-3p/137和antagomir-3373p/137轉(zhuǎn)染Ishikawa和HEC-1A細(xì)胞。使用CCK-8和EdU檢測細(xì)胞增殖(圖5A和5B)。傷口愈合和Transwell檢測分別用于評估細(xì)胞遷移和侵襲。過表達(dá)miR-33373p和miR-137降低了Ishikawa和HEC-1A細(xì)胞的遷移和侵襲能力(圖5C和5D)。流式細(xì)胞術(shù)檢測并分析細(xì)胞周期分布(圖5E)。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，與miR-NC組相比，miR-337-3p和miR-137過表達(dá)***抑制了細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移。 海南科研服務(wù)兩年英拜專注高通量測序行業(yè)的整體服務(wù)。

在這些MAOIs中，苯乙肼(phenelzine商品名:Nardil)在美國臨床可用。在接下來的研究中，以苯乙肼為**，使用兩種同基因小鼠**模型:B16-OVA黑色素瘤模型和MC38結(jié)腸*模型，研究MAOIs用于**免疫***的可能性。值得注意的是，苯乙肼是一種非選擇性不可逆的MAOI，可抑制MAO-A及其同工酶MAO-B。然而，由于小鼠巨噬細(xì)胞主要表達(dá)MAO-A，而不是MAO-B，因此在這些**模型中，苯乙肼***主要通過抑制MAO-A來調(diào)節(jié)TAM重編程。首先，研究苯乙肼在B16-OVA**預(yù)防模型中的***潛力（圖5f）。苯乙肼能有效抑制B6WT小鼠B16-OVA**的生長（圖5g-h）。當(dāng)使用氯膦酸脂質(zhì)體處理敲除小鼠TAM時，小鼠沒有觀察到**生長的差異（圖5g-h），這表明苯乙肼通過調(diào)節(jié)TAMs來抑制**生長。相應(yīng)地，從苯乙肼處理的小鼠中分離出的TAMs顯示出較低的免疫抑制表型，表現(xiàn)為其免疫抑制標(biāo)記物和特征基因的表達(dá)降低，而免疫刺激標(biāo)志物增加（圖5i-j）。在MC38**中得出類似結(jié)論。

二、阻斷atm依賴的PTEN磷酸化導(dǎo)致基因組

為了確定ATM介導(dǎo)的PTEN磷酸化如何調(diào)節(jié)DDR，構(gòu)建Pten398A/398A和Pten+/+littermatesMEFs細(xì)胞模型。PTEN蛋白水平不受398A突變的影響(補(bǔ)充圖3A,B)。此外，磷酸化AKT(PI3K通路活性的標(biāo)記物)水平在Pten398A/398A和PTEN+/+MEFs中相似(補(bǔ)充圖3B)。構(gòu)建人乳腺上皮細(xì)胞系(MCF10A)，穩(wěn)定表達(dá)野生型PTEN(PTEN-wt)，或PTEN的突變形式，不能被ATM磷酸化(PTEN-398a)。在這些細(xì)胞中，內(nèi)源性的PTEN基因被CRISPR/Cas9編輯刪除，創(chuàng)建了PTEN空細(xì)胞，然后用野生型或突變型的蛋白質(zhì)穩(wěn)定轉(zhuǎn)導(dǎo)重組。在表達(dá)PTEN-wt和PTEN-398a的MCF10A細(xì)胞中，PTEN蛋白和磷酸化AKT水平相似(補(bǔ)充圖3A)，使這些細(xì)胞成為ATM磷酸化PTEN分子作用研究的合適替代模型。Pten+/+和Pten398A/398Amef在10gyIR作用下，通過測定每個細(xì)胞的γH2AX和53bp1病灶數(shù)量來評估其修復(fù)DNA損傷的能力。在Pten+/+mef中，我們觀察到在照射后4小時，每個細(xì)胞的病灶數(shù)量達(dá)到峰值，24小時后恢復(fù)到接近基線水平(圖2AC)。Pten+/+和Pten398A/398A在ir后4小時，每個細(xì)胞聚集的病灶數(shù)量相似。然而，Pten398A/398Amef在24小時時間點(diǎn)比Pten+/+mef保留了更多的病灶數(shù)，表明DNA修復(fù)能力降低(圖2C)。 英拜的實(shí)驗(yàn)室坐落在上海漕河涇園區(qū)浦江園區(qū)。

作者進(jìn)行了PAR-CLIP實(shí)驗(yàn)，以評估SLC7A11 mRNA-YTHDC2相互作用是否依賴于m6A甲基化。結(jié)果表明，在H1299細(xì)胞中，通過過表達(dá)METTL3來提高m6A的甲基化水平，促進(jìn)YTHDC2與SLC7A11 mRNA的結(jié)合(圖6D)。無論METTL3是否過表達(dá)，YTH結(jié)構(gòu)域的缺失都阻斷了SLC7A11 mRNA-YTHDC2的相互作用(圖6D)。作者通過SLC7A11 3’-UTR探針進(jìn)行RNA-pull down實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)YTHDC2WT，優(yōu)先結(jié)合于含有m6A的SLC7A11 mRNA的3'UTR，而不是含有未甲基化腺苷的mRNA(圖6E)。此外，YTHDC2傾向于結(jié)合m6A共識基元GGAC (圖6E)。通過在H1299和H1975細(xì)胞中進(jìn)行METTL3的功能增加和丟失實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)SLC7A11 mRNA-YTHDC2的相互作用是由m6A水平?jīng)Q定的(圖6F和G)。這些數(shù)據(jù)表明YTHDC2優(yōu)先與m6A甲基化的SLC7A11 mRNA結(jié)合。文章使用FMT(糞微生態(tài)移植)來確定大黃酸改變的腸道菌群是否對結(jié)腸炎有療效。炎癥科研贈送提供技術(shù)路線

上海英拜生物設(shè)有專業(yè)的武漢技術(shù)中心。醫(yī)學(xué)科研科研贈送提供技術(shù)路線

MAP4K4是絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶家族的成員，可以通過磷酸蛋白MEKK1***MAPK通路。構(gòu)建pCMV-NM_4834.4和pCMV-NM_1242560.1質(zhì)粒，分別轉(zhuǎn)染K1細(xì)胞，并通過qRT-PCR驗(yàn)證了其轉(zhuǎn)染效率（圖6E）。這兩種變異***增強(qiáng)了K1細(xì)胞的增殖和遷移。而截?cái)嘈?NM_4834.4)比長型(NM_1242560.1)對增殖和遷移的影響更強(qiáng)（圖6F-G）。此外，MEKK1、MKK4、JNK、MEK、ERK的總磷酸化水平未發(fā)生改變，而NM_4834.4和NM_1242560.1兩種變體轉(zhuǎn)染組的磷酸化水平均高于對照組。更重要的是，與NM_1242560.1相比，NM_4834.4對磷酸- MEKK1、MKK4、JNK、MEK、ERK的影響更強(qiáng)，這表明MAP4K4中第16外顯子的剪切影響了MAPK通路下游蛋白的磷酸化（圖6H）。體內(nèi)小鼠模型結(jié)果證明，注射si-tiRNA-Gly組移植瘤中磷酸化蛋白水平明顯降低，而總蛋白水平與生理鹽水組相比沒有變化（圖6I）。這些結(jié)果表明，RBM17介導(dǎo)的tiRNA-Gly誘導(dǎo)的MAP4K4第16外顯子剪接可增強(qiáng)PTC細(xì)胞的增殖和遷移，并對MAPK通路下游蛋白進(jìn)行磷酸化。

總之，本文闡明了tiRNA-Gly結(jié)合RBM17的UHM結(jié)構(gòu)域并促進(jìn)其易位，導(dǎo)致RBM17蛋白增加，從而誘導(dǎo)PTC細(xì)胞中靶基因的選擇性剪接，**終促進(jìn)**進(jìn)展。 醫(yī)學(xué)科研科研贈送提供技術(shù)路線

公司特色是以各式高通量二代測序?yàn)榛A(chǔ)，利用生物數(shù)據(jù)信息分析手段，通過英拜生物自有的分子、病理以及細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺，提供課題整體設(shè)計(jì)外包、撰寫SCI論文一站式服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)平臺落座在漕河涇開發(fā)區(qū)浦江園區(qū)，實(shí)驗(yàn)平臺開放參觀，客戶可隨時參觀實(shí)驗(yàn)并參與實(shí)驗(yàn)課題的進(jìn)度，保證您的實(shí)驗(yàn)是在您的指導(dǎo)下完成。

1.整體課題外包服務(wù)：RNA甲基化研究專題，外泌體研究專題，wnt/VEGF/toll等經(jīng)典通路研究，設(shè)計(jì)的課題均具有后續(xù)實(shí)驗(yàn)課題的延展性，為您的標(biāo)書奠定較好的基礎(chǔ)

2.標(biāo)書申請：提供標(biāo)書課題設(shè)計(jì)、撰寫，標(biāo)書部分基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的開展，設(shè)計(jì)的標(biāo)書均符合科研前沿?zé)狳c(diǎn)，中標(biāo)率很高。

3.提供熱點(diǎn)**文獻(xiàn)技術(shù)支持，探討科研前沿?zé)狳c(diǎn)研究：trfRNA，DNA/RNA甲基化，外泌體，自噬，WNT等相關(guān)研究

4.二代測序：轉(zhuǎn)錄組測序、smallRNA測序、snoRNA測序、TRF測序

5.芯片：信號通路pcr芯片蛋白芯片

6.表觀遺傳實(shí)驗(yàn)：DNA甲基化實(shí)驗(yàn)（BSP,MSP，焦磷酸測序），RNA甲基化實(shí)驗(yàn)

7.實(shí)時定量PCR（mRNA,LncRNA,microRNA,circRNA）,WB，RNA功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)(靶基因驗(yàn)證，過表達(dá)，干擾),基因突變及SNP檢測，F(xiàn)ISH，RNA-PULLdown，rip，chip實(shí)驗(yàn)以及細(xì)胞增殖，凋亡，流式等細(xì)胞功能學(xué)實(shí)驗(yàn)