Blimp-1在持續(xù)刺激下抑制PGC1α
持久抗原對于改變向衰竭分化至關重要，但其代謝后果尚不清楚。由于連續(xù)的刺激不產生明顯的代謝抑制，持續(xù)的刺激可能***一個轉錄抑制因子，阻止代謝重編程。Blimp-1(由Prdm1編碼)就是這樣一種抑制因子，在B16黑色素瘤中**終耗盡的CD8+ T細胞中高度上調(圖4a)，并在缺氧條件下持續(xù)***(圖4b)。體外缺氧條件下持續(xù)***的T細胞也抑制PGC1α的表達(圖4c)。 進一步確定Blimp-1是否可以抑制PGC1α，發(fā)現強制表達Blimp-1可以抑制293T細胞中Ppargc1a啟動子構建的活性，而不影響其活力(圖4d)。Prdm1f/fCd4Cre小鼠的CD8+ T細胞通過在缺氧條件下持續(xù)***而抵抗功能障礙(圖4e,f)，而在持續(xù)***條件下無法抑制Ppargc1a的表達(圖4g)。在PD-1hiTim3+ TILs中，Blimp-1的缺失導致了通過IL-2和**壞死因子(TNF)產生的線粒體質量和多功能性的恢復(圖4h, i)。 METTL14上調促進胰腺*生長和轉移。常規(guī)科研創(chuàng)新服務
2、白樺素下調SREBP靶基因，降低細胞脂質水平
由于SREBP-2是其自身的直接靶標，因此白樺素將其表達下調40％（圖3A）。與SREBP-2是膽固醇生物合成的主要轉錄因子這一觀點一致，膽固醇合成途徑中的10個被測基因，例如HMGCR，HMG-CoA合酶（HMGCS）和角鯊烯環(huán)氧酶（SE），都被白樺素處理抑制了（圖3A）。類似地，與脂肪酸和甘油三酸酯合成有關的所有9個基因，例如SREBP-1c，脂肪酸合酶（FAS）和乙酰輔酶A羧化酶α（ACC），都被白樺素顯著下調（圖3B）。與早期觀察結果一致（圖1A），包括ABCG5和ABCG8在內的LXR靶基因不受白樺素的影響（圖3C）。 江蘇科研國家自然科學基金英拜生物提供專業(yè)的編輯潤色團隊保證服務到文章接收為止。
7）SsD克服了m6A介導的白血病對酪氨酸激酶抑制劑的耐藥性由于FTO抑制使耐藥細胞對酪氨酸激酶抑制劑（TKI）***敏感，我們檢測了SsD對TKI耐藥細胞的療效。我們發(fā)現SsD聯合尼洛替尼或PKC412在降低細胞活力方面更有效(圖7A)，這表明SsD***抑制了Kas-1NR和MV4-11PR細胞的增殖。細胞的分子特征也顯示TKIS介導的m6A低甲基化被挽救(圖7B-C)。雖然SsD沒有改變Kas-1NR和MV4-11PR細胞中ALKBH5、METTL3、YTHDF2的蛋白水平(圖7D)，但TKI上調的m6A相關基因MerTK、BCL-2和STAT3的表達受損(圖7E)。與上述結果一致，MerTK、BCL-2和STAT3在TKI耐藥細胞的mRNA和蛋白水平上更穩(wěn)定
3）LINC00926通過抑制乳腺*細胞中PGK1的表達來抑制糖酵解
由于PGK1是一種關鍵的糖酵解酶，而LINC00926被鑒定為負調控PGK1的lncRNA，我們想知道需氧糖酵解是否在LINC00926介導的乳腺*細胞增殖抑制中發(fā)揮作用。我們測試了LINC00926對葡萄糖攝取、乳酸生成和ATP生成的調節(jié)作用。結果表明，LINC00926降低了葡萄糖攝取、乳酸生成和ATP生成(圖3A)。在LINC00926轉染的細胞中，PGK1的表達逆轉了這些作用。LINC00926還顯示出細胞外酸化率下降(圖3B和3C)。PGK1在LINC00926轉染的細胞中重新表達挽救了這些效果。在PGK1敲低的MDA-MB-231或MCF-7細胞中敲低LINC00926對糖酵解表型沒有影響(圖3D-3F)，表明LINC00926通過PGK1抑制糖酵解表型。綜上所述，LINC00926通過抑制乳腺*細胞中PGK1的表達來抑制糖酵解。 英拜可解放您的雙手釋放您的時間。
2、miR-208b由結腸*細胞以外泌體的方式分泌
隨后，作者探究了miR-208b的存在方式是否由外泌體介導。分離鑒定了3株CRC細胞系的外泌體，并檢測了其中miR-208b的表達。外泌體中miR-208b的表達模式和在細胞中的模式一致，在SW480-OXA***高于SW480***高于NCM460。這些結果表明CRC中miR-208b的是以外泌體的模式分泌，這可能和順鉑化療敏感性有關。
3、SW480細胞分泌的外泌體miR-208b促進Treg擴增
前人研究表明順鉑會影響**免疫微環(huán)境。MiRNA可能通過促進Treg擴增誘導免疫侵襲。因此，作者探究了CRC分泌外泌體miR-208b對T細胞分化的影響。使用siRNA去除miR-208b，然后收集外泌體，將含有不同水平miR-208b的外泌體與原代CD4+T細胞共培養(yǎng)（圖4A-B）。6h后，受體CD4+T細胞中miR-208b***增加，尤其是SW480-OXA組，而外泌體miR-208b缺失組則沒有***改變，表明CD4+T細胞中miR-208b是由外泌體傳輸（圖4C-D）。此外，SW480和SW480-OXA來源外泌體處理組的CD4+CD25highFoxp3+Tregs細胞數***增加，而外泌體miR-208b缺失對其陽性細胞數則沒有明顯影響。表明外泌體miR-208b促進Treg擴增。 英拜生物是國內承接各類高通量測序科研項目以及一站式的測序文章發(fā)表服務的公司之一。鐵死亡臨床醫(yī)學科研詢問報價
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細胞內Ca2+持續(xù)增加是ferroptosis的標志
胞漿Ca2+增加、細胞腫脹以及質膜破裂被認為是壞死和焦亡的標志。為了評估這些細胞改變是否也發(fā)生在ferroptosis期間，作者通過活細胞共聚焦成像(圖1A-B)和流式細胞術(圖1C-H)檢測了用Erastin-1或RSL3處理的小鼠成纖維細胞(NIH-3T3)的胞漿Ca2+水平，同時檢測了細胞形態(tài)和質膜破裂的變化。作者使用fluo-4am作為Ca2+指示劑的熒光形式，以可視化細胞內Ca2+水平，并使用熒光DNA插入劑PI作為不可逆質膜破壞和細胞死亡的標記。結果發(fā)現在使用Erastin-1或RSL3處理后，NIH-3T3細胞胞質Ca2+濃度明顯增加(圖1A,B)。胞漿內Ca2+增加、細胞圓化和質膜破裂可被ferroptosis特異性抑制劑ferrostatin-1（fer1）抑制(圖1A-F)。 常規(guī)科研創(chuàng)新服務
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