在野生型小鼠和Caspase-11缺陷小鼠中，MCD處理***降低了pro-caspase1的蛋白水平(圖5A和F)，而增加了活性Caspase-1的蛋白水平(圖5A和G)。此外，Caspase-11缺陷小鼠的活性caspase-1水平明顯低于野生型小鼠，說明MCD處理Caspase-11缺陷小鼠肝臟中Caspase-1的***較少。同樣，我們在MCD處理的Caspase-11缺陷小鼠的肝細胞中檢測到較少的Gsdmd-N表達(圖5H和I)。這些結果表明，Caspase-11缺失減弱了MCD誘導的Gsdmd和IL-1β的***。
6.Caspase-11缺乏抑制脂多糖誘導的肝細胞焦亡和體外損傷
我們在體外評價Caspase-11缺乏對肝細胞焦亡的影響。我們用脂多糖(LPS)處理野生型小鼠原代肝細胞，發(fā)現(xiàn)LPS誘導了pro-caspase-11和caspase-11的表達(圖6A和B)，表明LPS誘導了原代肝細胞中caspase-11的***。我們進一步處理來自野生型和Caspase-11缺陷小鼠的原代肝細胞，并監(jiān)測Gsdmd的表達和***。如圖6C和D所示，LPS處理未在野生型和Caspase-11缺陷的原代肝細胞中誘導pro-Gsdmd的表達。 為了闡明胰腺*中m6A水平升高的分子機制。北京線粒體能量代謝芯片科研
miR-144在鼻咽*組織和細胞中上調
先前的文獻強調了miR-144在NPC發(fā)展過程中的促*作用。我們首先確定miR-144在NPC中的表達模式。采用qRT-PCR方法分析95例鼻咽*活檢標本和95例慢性鼻咽炎鼻咽活檢標本中miR-144的表達。結果表明，miR-144在鼻咽*組織中的表達水平高于在非*性鼻咽組織中的表達水平(圖1A)，并通過原位雜交(ISH)進一步驗證(圖1B)。如圖1C所示，相對于非*性鼻咽組織，鼻咽*組織中CD31的免疫組化染色增強。在鼻咽*組織中，CD31的表達與miR-144的表達呈正相關(圖1D)。隨后，我們通過qRT-PCR比較了人鼻咽*細胞系(C666-1和SUNE1)和鼻咽上皮細胞系NP69之間miR-144的表達水平。與預期的一樣，C666-1和SUNE1細胞表現(xiàn)出相對于NP69更高水平的miR-144表達(圖1E)。以上結果提示，miR144在鼻咽*組織和細胞中呈高表達，與CD31表達呈正相關，表明miR144與**血管生成具有潛在的相關性。 調控因子科研服務兩年Caspase-11介導的肝細胞焦亡促進非酒精性脂肪性肝炎的進展。
2）circPDE4B調節(jié)軟骨細胞活力和ECM代謝
為了評估circPDE4B在ECM代謝中的作用，我們分別用三種circPDE4BsiRNA轉染HCs(圖2A)。我們使用CCK-8方法評估了circPDE4B對軟骨細胞活力的影響。結果顯示，敲低circPDE4B的表達降低了軟骨細胞的活力(圖2B)。此外，shRNA腺病毒抑制circPDE4B***提高了MMP3、MMP13和ADAMTS4的表達，而SOX9、COL2A1(或COL2蛋白)和aggrecan在HCs/MCs中的表達下調(圖2C和圖2D)。免疫熒光進一步證實，circPDE4B敲除影響了HCs/MCs的MMP3、MMP13、COL2和aggrecan水平(圖2E、F)。同時，HCs的阿爾新藍染色顯示，circPDE4B抑制導致軟骨細胞功能障礙，蛋白多糖藍染較少(圖2G)。然后通過CCK-8實驗(圖2H)發(fā)現(xiàn)，過表達circPDE4B增加了軟骨細胞的活力。在過表達circPDE4B-HCs中，MMP3、MMP13和ADAMTS4的mRNA和蛋白水平下調，SOX9、COL2A1(或COL2蛋白)和aggrecan的mRNA和蛋白水平上調(圖2I-L)。此外，HCs的阿爾新藍染色表明，與單獨IL-1β***相比，circPDE4B過表達和IL-1β共處理減少了軟骨破壞(圖2M)。這些數(shù)據(jù)表明，circPDE4B/circPde4b在HCs中可以促進細胞活力，抑制分解代謝作用。
在CRC和HC鑒定的628個和745個tDR中，每組分別有85個和202個tDR。此外，CRC患者血漿中81個tDR較HC患者明顯增加。為了驗證小RNA測序結果，對上述3例CRC和3例HC受試者血漿樣本中5例上調的候選tDR進行了qRT-PCR檢測。CRC血漿中測量到的tDRs均較HC升高，其中5’-tRF-GlyGCC的升高幅度比較大。所有這些數(shù)據(jù)表明，與HC相比，CRC患者血漿中tDRs的表達譜存在差異;此外，5’-tRF，特別是5’-tRF-glygcc在CRC血漿中***升高。
2.CRC患者血漿中5'-tRF-GlyGCC水平5’-tRF-GlyGCC位于第1、2、6、16、17染色體上，轉錄本長度為31nt，序列為5’-GCAUGGGUGGUUCAGUGGUAGAAUUCUCGCC-3’(MINTbaseUniqueID:tRF-35-PNR8YP9LON4VN1)。小RNA-seq數(shù)據(jù)提示5’-tRF-GlyGCC在CRC患者中的升高高于其他tDR。進一步檢測了其在CRC(n=105)和HC(n=90)患者血漿中的表達。我們的數(shù)據(jù)顯示，5’-tRF-GlyGCC在CRC患者中的豐度明顯高于HC。然后分析了5’-tRF-GlyGCC在CRC患者不同病理階段(I期，n=11;階段II,n=34;III期，n=32;IV期，n=25)。結果表明，CRC各階段5’-tRF-GlyGCC含量均高于HC。結果表明5’-tRF-GlyGCC可能是一種有前景的診斷CRC患者的生物標志物。 英拜的高通量測序服務質量。
Pur-α降低AD患者Aβ負荷，防止認知功能下降**近研究表明，Pur-α在硬化癥和額顳葉癡呆中起重要作用。但對Pur-α在AD中的作用知之甚少。由于Pur-α是CircCwc27的直接靶點，研究中通過注射與腺*病毒相關的、攜帶flag標記物的Flag-AAV9-Control和Flag-AAV9-Pur-α到APP/PS1小鼠海馬體中，觀察Pur-α對AD病理的影響。注射兩個月后，在小鼠海馬體中出現(xiàn)明顯的綠色熒光，說明存在有效轉導 。然而，CircCwc27在Pur-α過表達的大腦中表達沒有變化。與對照組相比，Pur-α過表達***減少APP/PS1小鼠海馬區(qū)Aβ沉積和促炎因子。注射Flag-AAV9-Pur-α在很大程度上保護APP/PS1小鼠免于嚴重的記憶缺陷。綜上所述，Pur-α可減少Aβ沉積，挽救空間記憶損傷。上海英拜生物提供可視化實驗過程參觀。重慶克羅恩病科研
大黃酸處理沒有改變乳酸菌尿酸的產生。北京線粒體能量代謝芯片科研
5、CDK4/6預處理增強CAR-T細胞的持久性和有效性
接下來測試CDK4/6i處理是否會誘導嵌合抗原受體(CAR)-T細胞的記憶表型，并克服CAR-T細胞***成功的兩大障礙：T細胞耗竭和缺乏持久性。通過臨床試驗，以LewisY(LeY)抗原為靶點，制造了人類CAR-T細胞(Fig.5A)并發(fā)現(xiàn)暴露于CDK4/6i產生CD4+和CD8+干細胞記憶（Tscm）CAR-T細胞(Fig.5B)。CAR-T細胞的3’RNA-seq揭示CDK4/6抑制后記憶表達***改變，GSEA分析證實了記憶相對效應信號的富集，并如預期E2F靶基因下調(Fig.5C)。為了檢測在體內的持久性，使用兩個**供體的PBMC生成的LeYCAR-T細胞用CDK4/6i預處理，并轉移到NSG小鼠中(Fig.5D)。與未經(jīng)處理的對照組相比，觀察到在移植后的幾周內，血液中CD8+和CD4+預處理的CAR-T細胞的頻率和數(shù)量***增加(Fig.5E-F)。 北京線粒體能量代謝芯片科研
公司特色是以各式高通量二代測序為基礎，利用生物數(shù)據(jù)信息分析手段，通過英拜生物自有的分子、病理以及細胞實驗平臺，提供課題整體設計外包、撰寫SCI論文一站式服務。公司實驗平臺落座在漕河涇開發(fā)區(qū)浦江園區(qū)，實驗平臺開放參觀，客戶可隨時參觀實驗并參與實驗課題的進度，保證您的實驗是在您的指導下完成。
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