1.tRFRNA課題設(shè)計(jì)tRFRNA是-類(lèi)來(lái)源于成熟tRNA或tRNA前提的非編碼小RNA分子,長(zhǎng)度約為16-40nt。經(jīng)過(guò)精確剪切過(guò)程產(chǎn)生的tRNA可分為兩類(lèi):tiRNA和tRFs。其在體內(nèi)參與多種生理及病理過(guò)程,包括病毒***、氧化應(yīng)激、**、神經(jīng)退行性疾病、選傳性代謝疾病等。tRFRNA是目前研究的新穎點(diǎn),在國(guó)外的期刊雜志上已經(jīng)發(fā)表,且影響因子也高,接下來(lái)也會(huì)是研究的熱點(diǎn)。上海英拜生物科技有限公司是一家致力于提供生物、醫(yī)學(xué)等方向的科研技術(shù)服務(wù)的高新技術(shù)公司,本公司擁有一支功底深厚經(jīng)驗(yàn)豐富、敬業(yè)守信的、多學(xué)科背景的專(zhuān)家團(tuán)隊(duì)。我們的工作人員-直關(guān)注于生命醫(yī)學(xué)領(lǐng)域**前沿、**熱點(diǎn)的研究方向與研究話題。我們將根據(jù)您提供的資料,以**快的速度幫您確定您的研究課題,以便您開(kāi)展進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)。高通量測(cè)序方法能夠檢測(cè)更多類(lèi)型的RNA,例如+RNA、rRNA、snoRNA和ScaRNA。綜合tiRNA詢(xún)問(wèn)報(bào)價(jià)
轉(zhuǎn)運(yùn)RNA (tRNA)是一種參與解碼mRNA、翻譯蛋白質(zhì)的接頭分子。近年來(lái)的研究表明tRNA還能作為小非編碼RNA (sncRNA)的主要來(lái)源之一，具有獨(dú)特且多樣的功能1。這些tRNA來(lái)源的ncRNA并非隨機(jī)降解的產(chǎn)物，而是通過(guò)精確的生物發(fā)生過(guò)程產(chǎn)生的。源自tRNA的ncRNA大致分為兩大類(lèi)：tiRNA (或者tRNA halves) 和tRFs (tRNA 衍生片段) ，具有其特定的分子大小、核苷酸組成、生理功能以及生物發(fā)生1-3。
tRNA halves (tiRNAs)是由angiogenin (ANG)在多種應(yīng)激條件下在成熟tRNA的反密碼子環(huán)處特異性切割產(chǎn)生的5’-和3’- tRNA半分子，長(zhǎng)度約為29-50nt。 吉林tiRNA細(xì)胞實(shí)驗(yàn)重點(diǎn)介紹了tRF&tiRNA分子在人類(lèi)疾病中的潛在應(yīng)用,并提出了目前存在的問(wèn)題和未來(lái)的研究方向。
small RNA修飾芯片技術(shù)服務(wù)在單張芯片可定量miRNA，pre-miRNA和tRNA衍生的small RNA（tsRNA，包括tRF＆tiRNA）的堿基修飾?？蓹z測(cè)的修飾包括：8-氧代鳥(niǎo)嘌呤（o8G），7-甲基鳥(niǎo)苷（m7G），N6-甲基腺苷（m6A），假尿苷（Ψ）或5-甲基胞苷（m5C）。
芯片優(yōu)點(diǎn)
?能夠檢測(cè)及定量多種smallRNA上修飾：包括o8G，m7G，m6A，Ψ或m5C
?能夠檢測(cè)多種smallRNA：包括miRNA，pre-miRNA和tsRNAs（tRF＆tiRNA）
?金標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)確定量smallRNA的修飾:直接RNA末端標(biāo)記，避免了測(cè)序建庫(kù)過(guò)程中因修飾導(dǎo)致的cDNA延伸中止的情況，可確保對(duì)smallRNA修飾定量的高保真性。
?高靈敏度檢測(cè)低水平smallRNA的修飾：克服二代測(cè)序的局限性，對(duì)低表達(dá)或低修飾水平的smallRNA分析具有出色的分析靈敏度。
?所需樣品量少，總RNA量可低至1μg。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)是在普通PCR反應(yīng)體系中加入熒光試劑，利用熒光信號(hào)實(shí)時(shí)檢測(cè)PCR進(jìn)程，***通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。 實(shí)時(shí)熒光定量PCR能夠?qū)Ｒ弧㈧`敏、快速、高重復(fù)性地精確定量起始模板濃度。tRF & tiRNA是由tRNA切割產(chǎn)生，長(zhǎng)度約15-45個(gè)核苷酸的小RNA。由于tRF & tiRNA長(zhǎng)度太短，且與tRNA序列完全重疊，不能通過(guò)傳統(tǒng)的實(shí)時(shí)定量PCR進(jìn)行檢測(cè)。本公司通過(guò)在tRF & tiRNA兩端引入人工合成序列（adaptor），設(shè)計(jì)特殊的跨連接位點(diǎn)的定量PCR引物，可以精確檢測(cè)微量樣品中tRF & tiRNA表達(dá)水平。隨著RNA高通量測(cè)序技術(shù)的應(yīng)用和發(fā)展，越來(lái)越多的tiRNA和tFs被發(fā)現(xiàn)。
microRNA-circRNA(lncRNA)靶基因驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)環(huán)狀RNA(circRNA)和長(zhǎng)鏈非編碼RNA(lncRNA)是一類(lèi)非編碼RNA,不翻譯蛋白。但在細(xì)胞中它們能夠調(diào)控其他基因的表達(dá)變化。近年的研究表明circRNA和lncRNA分子富含microRNA結(jié)合位點(diǎn)，在細(xì)胞中起到miRNA海綿（miRNAsponge）的作用，進(jìn)而解除miRNA對(duì)其靶基因的抑制作用，升高靶基因的表達(dá)水平，這一作用機(jī)制被稱(chēng)為競(jìng)爭(zhēng)性?xún)?nèi)源RNA（ceRNA）機(jī)制。因此，通過(guò)與疾病關(guān)聯(lián)的miRNA相互作用，circRNA和lncRNA在疾病中發(fā)揮著重要的調(diào)控作用。研究cirRNA、lncRNA的調(diào)控機(jī)制需要先找到與cirRNA、lncRNA相互作用的miRNA，而熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)可以用來(lái)證明miRNA與circRNA,miRNA與lncRNA的直接相互作用。tiRNA和tRF可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物。江西tiRNA服務(wù)價(jià)格
需要注意的是5'tiRNA和3'tiRNA的成熟:依賴(lài)angiogenin的切割而不是Dicer,5'端具有羥基而不是磷酸。綜合tiRNA詢(xún)問(wèn)報(bào)價(jià)
tRF & tiRNA實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)服務(wù)流程
1.引物設(shè)計(jì)、合成
2. 樣品RNA抽提
3. RNA質(zhì)量檢測(cè)
4.RNA預(yù)處理（可選）
4.逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA使用rtStar?First-StrandcDNASynthesisKit(3’and5’adaptor)(Cat#AS-FS-003,Arraystar)試劑盒進(jìn)行接頭連接和反轉(zhuǎn),合成cDNA***鏈。
5.實(shí)時(shí)定量PCR以合成的cDNA作為模板進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR擴(kuò)增，梯度稀釋的標(biāo)準(zhǔn)同時(shí)進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR擴(kuò)增，根據(jù)Ct值制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。以同樣的方法測(cè)定每個(gè)樣品中的內(nèi)參，校正上樣誤差。
6.分析結(jié)果、提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告分析實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量樣品中的目的tRF&tiRNA。提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方法，實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和圖表。 綜合tiRNA詢(xún)問(wèn)報(bào)價(jià)
公司特色是以各式高通量二代測(cè)序?yàn)榛A(chǔ)，利用生物數(shù)據(jù)信息分析手段，通過(guò)英拜生物自有的分子、病理以及細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，提供課題整體設(shè)計(jì)外包、撰寫(xiě)SCI論文一站式服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)平臺(tái)落座在漕河涇開(kāi)發(fā)區(qū)浦江園區(qū)，實(shí)驗(yàn)平臺(tái)開(kāi)放參觀，客戶(hù)可隨時(shí)參觀實(shí)驗(yàn)并參與實(shí)驗(yàn)課題的進(jìn)度，保證您的實(shí)驗(yàn)是在您的指導(dǎo)下完成。
1.整體課題外包服務(wù)：RNA甲基化研究專(zhuān)題，外泌體研究專(zhuān)題，wnt/VEGF/toll等經(jīng)典通路研究，設(shè)計(jì)的課題均具有后續(xù)實(shí)驗(yàn)課題的延展性，為您的標(biāo)書(shū)奠定較好的基礎(chǔ)
2.標(biāo)書(shū)申請(qǐng)：提供標(biāo)書(shū)課題設(shè)計(jì)、撰寫(xiě)，標(biāo)書(shū)部分基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的開(kāi)展，設(shè)計(jì)的標(biāo)書(shū)均符合科研前沿?zé)狳c(diǎn)，中標(biāo)率很高。
3.提供熱點(diǎn)**文獻(xiàn)技術(shù)支持，探討科研前沿?zé)狳c(diǎn)研究：trfRNA，DNA/RNA甲基化，外泌體，自噬，WNT等相關(guān)研究
4.二代測(cè)序：轉(zhuǎn)錄組測(cè)序、smallRNA測(cè)序、snoRNA測(cè)序、TRF測(cè)序
5.芯片：信號(hào)通路pcr芯片蛋白芯片
6.表觀遺傳實(shí)驗(yàn)：DNA甲基化實(shí)驗(yàn)（BSP,MSP，焦磷酸測(cè)序），RNA甲基化實(shí)驗(yàn)
7.實(shí)時(shí)定量PCR（mRNA,LncRNA,microRNA,circRNA）,WB，RNA功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)(靶基因驗(yàn)證，過(guò)表達(dá)，干擾),基因突變及SNP檢測(cè)，F(xiàn)ISH，RNA-PULLdown，rip，chip實(shí)驗(yàn)以及細(xì)胞增殖，凋亡，流式等細(xì)胞功能學(xué)實(shí)驗(yàn)