個性化tiRNA國家自然科學基金

來源: 發布時間:2021-11-25

英拜優勢

超高性價比:一舉三得,同時檢測和分析tiRNA和tRF,以及miRNA。***檢測:**的tiRNA和tRF數據庫,提供***的tiRNA和tRF表達譜分析。高檢測效率:性能優化的測序方法與嚴格的質控過程,高檢測效率。一站式服務:客戶只需提供細胞、組織、體液或總RNA,云序生物為您完成從樣品準備、文庫制備、上機測序到數據分析的整套服務流程。專業的生物信息學分析:云序生物具有強大的生物信息學團隊,能夠滿足客戶的各類深入數據分析要求。 tiRNA和tRF可作為疾病診斷的生物標志物。個性化tiRNA國家自然科學基金

轉運RNA (tRNA)是一種參與解碼mRNA、翻譯蛋白質的接頭分子。近年來的研究表明tRNA還能作為小非編碼RNA (sncRNA)的主要來源之一,具有獨特且多樣的功能1。這些tRNA來源的ncRNA并非隨機降解的產物,而是通過精確的生物發生過程產生的 。源自tRNA的ncRNA大致分為兩大類:tiRNA (或者tRNA halves) 和tRFs (tRNA 衍生片段) ,具有其特定的分子大小、核苷酸組成、生理功能以及生物發生。

  tRNA halves (tiRNAs)是由angiogenin (ANG)在多種應激條件下在成熟tRNA的反密碼子環處特異性切割產生的5’-和3’- tRNA半分子,長度約為29-50nt。 單細胞相關課題tiRNA省自然科學基金成熟tRNA的5'末端至反密碼子結束的片段被稱為5'tiRNA,反密碼子開始至成熟tRNA的3末端的片段被稱為3'tiRNA。

對下一代測序數據的深入分析揭示了許多具有不同功能的小分子非編碼RNA。近年來,來源于tRNA衍生的小分子RNA(ransfer-RNAderivedsmallRNAs,tsRNAs)引起***關注。其主要有2種類型,即tRNA源性應激誘導RNA(tRNA-derivedstress-inducedRNA,tiRNA)和tRNA源性片段(tRNA-derivedfragment,tRF)。它們根據在前體或成熟tRNA轉錄物的切割位置不同而產生。這些tRF&tiRNA分子的核苷酸組成、生物發生和功能上具有異質性。新的研究表明,tRF&tiRNA分子不僅是tRNA降解的碎片,而且在許多特定的生理和病理過程中起著調節作用。本文綜述了tRF&tiRNA分子的類型,提出了tRF&tiRNA分子的生物學功能和作用機制的新概念,重點介紹了tRF&tiRNA分子在人類疾病中的潛在應用,并提出了目前存在的問題和未來的研究方向。

由于沒有有效的方法來特異性抑制或增強體內成骨細胞的EVs轉移,為了驗證EVs在體內的轉移效用,該團隊通過向小鼠注射間歇性重組甲狀旁腺***(iPTH)等方法來增加成骨細胞數量,同時測量了EVs的轉移量及其對基于骨髓的免疫反應的影響。當受到致死劑量的白色念珠菌攻擊時,小鼠表現出骨髓細胞反應的持續增加,存活率也***提高。這項研究確定了一種非常規的機制,即骨髓中的成骨細胞可以通過EVs與造血祖細胞發生聯系,其中的tiRNA提供了一種與傳統細胞因子所驅動的應激反應不同的調節信號軸,以促進粒-巨噬細胞祖細胞中蛋白質的翻譯、細胞增殖和**終分化。這種獨特形式的應激調節通訊方式,可能改變生物體的生理狀態以應對包括***在內的挑戰。tRF&tiRNA實時定量PCR技術是在普通PCR反應體系中加入熒光試劑,利用熒光信號實時檢測PCR進程.

英拜生物為您提供microRNA實時定量PCR技術服務,您只需要提供保存完好的組織或細胞標本,本公司專業的技術服務人員就可替您完成microRNA實時定量PCR實驗操作和數據分析,提供給您完整的實驗報告,為您節省大量的時間和精力。英拜生物microRNA實時定量PCR技術服務流程如下:引物設計、合成設計并合成目的microRNA的莖環RT引物、PCR引物。樣品RNA抽提a.組織樣品:取適量(50~100mg)新鮮組織或正確保存的組織樣品,勻漿后抽提RNA。b.細胞樣品:取1×106~1×107細胞,吸去培養液后用TRIZOL試劑抽提RNA。RNA質量檢測a.紫外吸收測定法測定RNA在波長260nm和280nm的吸收值,獲得RNA的濃度并通過A260/280及A260/230的吸收比值判斷RNA的純度。b.用甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳,檢測RNA純度和完整性。注:用于microRNA實時定量PCR檢測的RNA樣品,必須高純度、完整,沒有RNase污染(降解的樣品不能用于實時定量PCR檢測),同時提取方法必須保證所得樣品包含完整的小RNA部分。經過精確剪切過程產生的tRNA可分為兩類:tiRNA和tRFs。吉林tiRNA售后服務

需要注意的是5'tiRNA和3'tiRNA的成熟:依賴angiogenin的切割而不是Dicer,5'端具有羥基而不是磷酸。個性化tiRNA國家自然科學基金

上海英拜生物tRF&tiRNA實時定量PCR技術服務流程

1.引物設計、合成設計并合成目的tRF&tiRNA的特異性PCR引物。

2.樣品RNA抽提a.若實驗對象為組織樣品,取適量(50-100mg)新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品,加1ml的RNA抽提試劑Trizol(Invitrogen),勻漿后抽提RNA。b.若實驗對象為細胞樣品,每份樣品取1×106~1×107細胞,完全吸去培養液后加1ml的RNA抽提試劑Trizol(Invitrogen),裂解后抽提RNA。

3.RNA質量檢測a.紫外吸收測定法測定RNA在波長260nm和280nm的吸收值,獲得RNA的濃度并通過A260/280及A260/230的吸收比值判斷RNA的純度。b.甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳檢測RNA純度和完整性。注:用于tRF&tiRNA實時定量PCR檢測的RNA樣品,必須高純度、完整,沒有RNase污染(降解的樣品不能用于實時定量PCR檢測),同時提取方法必須保證所得樣品包含完整的小RNA部分。

4.RNA預處理(可選)使用rtStar?tRF&tiRNAPretreatmentKit(Cat#AS-FS-005,Arraystar)進行預處理,去除3’氨酰基末端與3‘環磷酸末端,磷酸化5’羥基末端,并移去m1A,m3C等多種甲基化修飾。 個性化tiRNA國家自然科學基金

公司特色是以各式高通量二代測序為基礎,利用生物數據信息分析手段,通過英拜生物自有的分子、病理以及細胞實驗平臺,提供課題整體設計外包、撰寫SCI論文一站式服務。公司實驗平臺落座在漕河涇開發區浦江園區,實驗平臺開放參觀,客戶可隨時參觀實驗并參與實驗課題的進度,保證您的實驗是在您的指導下完成。

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