miRNA芯片,microRNA-Seq數據深度發掘分析：a)芯片,測序數據聚類分析b)microRNA靶基因預測"TargetScanS*"，“miRanda(miRBase)"。"miRGen"等數據庫預測差異microRNA的所有靶基因。c)靶基因GO分析根據GeneOntology數據庫對靶基因進行功能***分析,從而篩選顯菩性功能的靶基因。d)靶基因pathway分析根據KEGG數據庫對靶基因進行Pathway分類,并進行顯菩性分析從而得到顯菩性的Pathway分類。e)構建的MicroRNA與基因的調控網絡通過構建MicroRNA與基因的調控網絡。實時熒光定量PCR能夠專--.靈敏、快速、高重復性地精確定量起始模板濃度。單細胞相關課題技術服務服務價格
PCR-LDR技術分型實驗流程：1)通過多重PCR(MultiplexPCR)獲得含有待檢測突變位點的基因片斷，2)進行多重LDR(MultiplexLDR)進行特異性分型檢測。3)***通過測序儀電泳讀取檢測結果。LDR是利用高溫連接靜實現對基因多多態性位點的識別。超存迅連接酶一旦利到DA與互樸的阿吳寺聚核行酸接關對應處存在著基因點突變類型的堿基錯配，則連接反應就不能進行。2.1標準服務流程1)客戶溝通，確認實驗位點,并進行相關分析,提示實驗可行性。2)建立實驗方案,并在此過程中和客戶保持密切溝通。3)大規模實驗,有嚴格的指控流程保證實驗結果可靠。4)補數據，盡可能提高樣本的使用率。技術服務額外提供技術路線補數據，盡可能提高樣本的使用率。
d)靶基因pathway分析根據KEGG數據庫對靶基因進行Pathway分類,并進行***性分析從而得到***性的Pathway分類。e)構建的MicroRNA與基因的調控網絡通過構建MicroRNA與基因的調控網絡。可以從中找出hub基因及hubmicroRNAf)microRNA、靶基因、轉錄因子調控網絡microRNA也會受到轉錄因子調控造成表達差異,通過系統研究轉錄因子與基因間的調控關系,可以為尋找重要轉錄因子及重要基因提供線索。g)microRNA啟動子分析及甲基化位點分析當microRNA研究日趨火熱,越來越多的研究者開始關注microRNA本身甲基化變化。MicroRNA基因的甲基化變化也是造成microRNA表達差異的重要原因。
轉運RNA(tRNA)是一種參與解碼mRNA、翻譯蛋白質的接頭分子。近年來的研究表明tRNA還能作為小非編碼RNA(sncRNA)的主要來源之一，具有獨特且多樣的功能1。這些tRNA來源的ncRNA并非隨機降解的產物,而是通過精確的生物發生過程產生的(圖.1)。源自tRNA的ncRNA大致分為兩大類:tiRNA(或者tRNAhalves)和tRFs(tRNA衍生片段)，具有其特定的分子大小、核苷酸組成、生理功能以及生物發生1-3。tRNAhalves(tiRNAs)是由angiogenin(ANG)在多種應激條件下在成熟tRNA的反密碼子環處特異性切割產生的5'-和3'-tRNA半分子,長度約為29-50nt。
特殊設計的莖環結構反轉錄引物配合實時定量PCR引物及SYBRGreen染料可精確檢測微量樣品中microRNA表達水平。
SouthernBlot是檢測基因組樣本中特定DNA序列的一種方法。主要原理是根據堿基互補配對原則，具有一定同源性的兩條核酸單鏈在適宜環境中可雜交形成雙鏈。
通過凝膠電泳分離經限制性內切酶消化的待檢DNA分子，轉移至尼龍膜或其他固相支撐物上，固定后與標記好的探針進行雜交，利用放射自顯影或酶反應顯色,從而檢測特定DNA分子的含量。
SouthernBlot實驗流程基因組提取:基因組要求完整性好,純度高基因組酶切電泳分離酶切好的DNA樣品:20~40ug/泳道,25-30V穩壓電泳12-24h。轉膜.探針制備.預雜交.雜交.檢測. 每管細胞密度超過1x106/ml.細胞經neurofilament.MAP2和-ulinlI的兔疫熒光鑒定。醫學科研技術服務歡迎咨詢
用光學方法記錄單個成活神經元活動過程的技術,必須按照兩個基本問題來加以考慮,即要記錄什么和如何記錄。單細胞相關課題技術服務服務價格
microRNA靶點的預測利用Targetscan,miRanda,PicTar軟件得到目的microRNA的預測靶點序列(客戶提供)。獲得microRNA靶點序列根據提供的靶序列，合成兩條互補的單鏈DNA模板。或者,設計引物PCR打增目的microRNA靶基因3"UTR序列。microRNA靶序列克隆將合成的兩條單鏈退火成雙鏈(具有粘性末端),或將PCR產物雙酶切,后連入經過同樣雙酶切的miR-reporter載體中,連接產物轉化大腸桿菌DH5a。陽性克隆鑒定。挑選轉化的菌落,PCR篩選含有插入片段的陽性克隆,測序驗證克隆的序列和目的microRNA靶序列一致。
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公司特色是以各式高通量二代測序為基礎，利用生物數據信息分析手段，通過英拜生物自有的分子、病理以及細胞實驗平臺，提供課題整體設計外包、撰寫SCI論文一站式服務。公司實驗平臺落座在漕河涇開發區浦江園區，實驗平臺開放參觀，客戶可隨時參觀實驗并參與實驗課題的進度，保證您的實驗是在您的指導下完成。
1.整體課題外包服務：RNA甲基化研究專題，外泌體研究專題，wnt/VEGF/toll等經典通路研究，設計的課題均具有后續實驗課題的延展性，為您的標書奠定較好的基礎
2.標書申請：提供標書課題設計、撰寫，標書部分基礎實驗的開展，設計的標書均符合科研前沿熱點，中標率很高。
3.提供熱點**文獻技術支持，探討科研前沿熱點研究：trfRNA，DNA/RNA甲基化，外泌體，自噬，WNT等相關研究
4.二代測序：轉錄組測序、smallRNA測序、snoRNA測序、TRF測序
5.芯片：信號通路pcr芯片蛋白芯片
6.表觀遺傳實驗：DNA甲基化實驗（BSP,MSP，焦磷酸測序），RNA甲基化實驗
7.實時定量PCR（mRNA,LncRNA,microRNA,circRNA）,WB，RNA功能驗證實驗(靶基因驗證，過表達，干擾),基因突變及SNP檢測，FISH，RNA-PULLdown，rip，chip實驗以及細胞增殖，凋亡，流式等細胞功能學實驗