實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)是在普通PCR反應(yīng)體系中加入熒光試劑，利用熒光信號(hào)實(shí)時(shí)檢測(cè)PCR進(jìn)程，***通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR能夠?qū)Ｒ弧㈧`敏、快速、高重復(fù)性地精確定量起始模板濃度。tRF & tiRNA是由tRNA切割產(chǎn)生，長(zhǎng)度約15-45個(gè)核苷酸的小RNA。由于tRF & tiRNA長(zhǎng)度太短，且與tRNA序列完全重疊，不能通過(guò)傳統(tǒng)的實(shí)時(shí)定量PCR進(jìn)行檢測(cè)。本公司通過(guò)在tRF & tiRNA兩端引入人工合成序列，設(shè)計(jì)特殊的跨連接位點(diǎn)的定量PCR引物，可以精確檢測(cè)微量樣品中tRF & tiRNA表達(dá)水平。tRF&tiRNA實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)服務(wù)流程1.引物設(shè)計(jì)、合成2.樣品RNA抽提3.RNA質(zhì)量檢測(cè)4.RNA預(yù)處理（可選）。是什么tiRNA整體服務(wù)
piRNA測(cè)序技術(shù)服務(wù)
piRNA是一類(lèi)長(zhǎng)度約26-32nt的小非編碼RNA分子，通過(guò)與Piwi蛋白家族成員作用發(fā)揮功能。與miRNA數(shù)目只有幾百種不同，piRNA在人、小鼠、大鼠中***表達(dá)。piRNA在長(zhǎng)度、表達(dá)類(lèi)型、基因結(jié)構(gòu)和生成方式上均與miRNA截然不同。在功能上，piRNA在生殖發(fā)育和精子形成過(guò)程中保護(hù)精子基因組免受轉(zhuǎn)座子插入的危害，通過(guò)表觀遺傳調(diào)控基因表達(dá)，蛋白翻譯和mRNA更新，以及維持染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和細(xì)胞周期進(jìn)程，并與**進(jìn)程有關(guān)。
上海英拜提供多種模式piRNA測(cè)序服務(wù)，滿(mǎn)足不同客戶(hù)的研究需求：可同時(shí)對(duì)piRNA和miRNA兩種分子進(jìn)行檢測(cè)，共同進(jìn)行數(shù)據(jù)比對(duì)、注釋和分析；也可*對(duì)piRNA進(jìn)行檢測(cè)，精確的片段篩選能夠保證覆蓋所有piRNA，并為客戶(hù)提供piRNA專(zhuān)有的數(shù)據(jù)分析。 陜西tiRNA免費(fèi)設(shè)計(jì)上海英拜生物科技有限公司擁有一支功底深厚經(jīng)驗(yàn)豐富、敬業(yè)守信的、多學(xué)科背景的專(zhuān)家團(tuán)隊(duì)。
small RNA修飾芯片技術(shù)服務(wù)在單張芯片可定量miRNA，pre-miRNA和tRNA衍生的small RNA（tsRNA，包括tRF＆tiRNA）的堿基修飾。可檢測(cè)的修飾包括：8-氧代鳥(niǎo)嘌呤（o8G），7-甲基鳥(niǎo)苷（m7G），N6-甲基腺苷（m6A），假尿苷（Ψ）或5-甲基胞苷（m5C）。
芯片優(yōu)點(diǎn)
?能夠檢測(cè)及定量多種smallRNA上修飾：包括o8G，m7G，m6A，Ψ或m5C
?能夠檢測(cè)多種smallRNA：包括miRNA，pre-miRNA和tsRNAs（tRF＆tiRNA）
?金標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)確定量smallRNA的修飾:直接RNA末端標(biāo)記，避免了測(cè)序建庫(kù)過(guò)程中因修飾導(dǎo)致的cDNA延伸中止的情況，可確保對(duì)smallRNA修飾定量的高保真性。
?高靈敏度檢測(cè)低水平smallRNA的修飾：克服二代測(cè)序的局限性，對(duì)低表達(dá)或低修飾水平的smallRNA分析具有出色的分析靈敏度。
?所需樣品量少，總RNA量可低至1μg。
對(duì)下一代測(cè)序數(shù)據(jù)的深入分析揭示了許多具有不同功能的小分子非編碼RNA。近年來(lái),來(lái)源于tRNA衍生的小分子RNA(ransfer-RNAderivedsmallRNAs,tsRNAs)引起***關(guān)注。其主要有2種類(lèi)型,即tRNA源性應(yīng)激誘導(dǎo)RNA(tRNA-derivedstress-inducedRNA,tiRNA)和tRNA源性片段(tRNA-derivedfragment,tRF)。它們根據(jù)在前體或成熟tRNA轉(zhuǎn)錄物的切割位置不同而產(chǎn)生。這些tRF&tiRNA分子的核苷酸組成、生物發(fā)生和功能上具有異質(zhì)性。新的研究表明,tRF&tiRNA分子不僅是tRNA降解的碎片,而且在許多特定的生理和病理過(guò)程中起著調(diào)節(jié)作用。本文綜述了tRF&tiRNA分子的類(lèi)型,提出了tRF&tiRNA分子的生物學(xué)功能和作用機(jī)制的新概念,重點(diǎn)介紹了tRF&tiRNA分子在人類(lèi)疾病中的潛在應(yīng)用,并提出了目前存在的問(wèn)題和未來(lái)的研究方向。tRFs和tiRNAs能夠作為miRNA行使RNA干擾；替換與mRNA結(jié)合的翻譯起始因子eIF4G，直接抑制蛋白的翻譯過(guò)程。
小RNA是一類(lèi)長(zhǎng)度小于200nt、不具蛋白編碼能力的RNA分子，主要包含microRNA、tRF&tiRNA、sdRNA、piRNA、tRNA、snoRNA以及pre-microRNA等種類(lèi)。作為重要的調(diào)控分子，小RNA在基因表達(dá)、表觀遺傳、疾病發(fā)***展進(jìn)程中發(fā)揮著重要功能。此外，高豐度、高穩(wěn)定性和高特異性預(yù)示其在臨床分子標(biāo)志物(biomarker)研究中具有高潛在價(jià)值。
上海英拜基于Illumina高通量測(cè)序平臺(tái)及Arraystar***授權(quán)的數(shù)據(jù)分析體系，推出特色的small RNAs測(cè)序系列服務(wù)，包括microRNA測(cè)序、tRF&tiRNA測(cè)序、sdRNA測(cè)序、piRNA測(cè)序和small RNA(>60nt)測(cè)序。針對(duì)以上不同類(lèi)型的小RNA分子，我們提供從樣品處理到數(shù)據(jù)分析的一站式服務(wù)。針對(duì)特定類(lèi)型分子“量身訂做”的數(shù)據(jù)分析可以幫助客戶(hù)快速開(kāi)展相應(yīng)的生物學(xué)功能研究。 當(dāng)tRNAs被切割為tRFs&tiRNAs時(shí)，這些修飾（包括甲基化修飾、氨酰基末端修飾）會(huì)全部或部分的保留下來(lái)。陜西tiRNA免費(fèi)設(shè)計(jì)
因此為了準(zhǔn)確檢測(cè)tRFs&tiRNAs，這些修飾必須被有效的去除.是什么tiRNA整體服務(wù)
逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA
使用rtStar?First-StrandcDNASynthesisKit(3’and5’adaptor)(Cat#AS-FS-003,Arraystar)試劑盒進(jìn)行接頭連接和反轉(zhuǎn),合成cDNA***鏈。
實(shí)時(shí)定量PCR
以合成的cDNA作為模板進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR擴(kuò)增，梯度稀釋的標(biāo)準(zhǔn)同時(shí)進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR擴(kuò)增，根據(jù)Ct值制備標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。以同樣的方法測(cè)定每個(gè)樣品中的內(nèi)參，校正上樣誤差。6分析結(jié)果、提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告
分析實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)定量樣品中的目的tRF&tiRNA。提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方法，實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和圖表。 是什么tiRNA整體服務(wù)
公司特色是以各式高通量二代測(cè)序?yàn)榛A(chǔ)，利用生物數(shù)據(jù)信息分析手段，通過(guò)英拜生物自有的分子、病理以及細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，提供課題整體設(shè)計(jì)外包、撰寫(xiě)SCI論文一站式服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)平臺(tái)落座在漕河涇開(kāi)發(fā)區(qū)浦江園區(qū)，實(shí)驗(yàn)平臺(tái)開(kāi)放參觀，客戶(hù)可隨時(shí)參觀實(shí)驗(yàn)并參與實(shí)驗(yàn)課題的進(jìn)度，保證您的實(shí)驗(yàn)是在您的指導(dǎo)下完成。
1.整體課題外包服務(wù)：RNA甲基化研究專(zhuān)題，外泌體研究專(zhuān)題，wnt/VEGF/toll等經(jīng)典通路研究，設(shè)計(jì)的課題均具有后續(xù)實(shí)驗(yàn)課題的延展性，為您的標(biāo)書(shū)奠定較好的基礎(chǔ)
2.標(biāo)書(shū)申請(qǐng)：提供標(biāo)書(shū)課題設(shè)計(jì)、撰寫(xiě)，標(biāo)書(shū)部分基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的開(kāi)展，設(shè)計(jì)的標(biāo)書(shū)均符合科研前沿?zé)狳c(diǎn)，中標(biāo)率很高。
3.提供熱點(diǎn)**文獻(xiàn)技術(shù)支持，探討科研前沿?zé)狳c(diǎn)研究：trfRNA，DNA/RNA甲基化，外泌體，自噬，WNT等相關(guān)研究
4.二代測(cè)序：轉(zhuǎn)錄組測(cè)序、smallRNA測(cè)序、snoRNA測(cè)序、TRF測(cè)序
5.芯片：信號(hào)通路pcr芯片蛋白芯片
6.表觀遺傳實(shí)驗(yàn)：DNA甲基化實(shí)驗(yàn)（BSP,MSP，焦磷酸測(cè)序），RNA甲基化實(shí)驗(yàn)
7.實(shí)時(shí)定量PCR（mRNA,LncRNA,microRNA,circRNA）,WB，RNA功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)(靶基因驗(yàn)證，過(guò)表達(dá)，干擾),基因突變及SNP檢測(cè)，F(xiàn)ISH，RNA-PULLdown，rip，chip實(shí)驗(yàn)以及細(xì)胞增殖，凋亡，流式等細(xì)胞功能學(xué)實(shí)驗(yàn)