Human Cancer LncRNA PCR 芯片
簡介英拜CancerLncRNAPCR芯片可檢測180個已報道的與人多種**相關的金標準lncRNA，為研究人員探索**中LncRNA的功能、生物標志物及***靶點潛力提供了一個信息豐富、數據準確、操作簡單的解決方案。
HumanCancerLncRNAPCRArrayYB-001-1192-well/plate包含180個與人多種**緊密關聯的已知功能lncRNA轉錄本
?***收集已知的與**明確相關的明星LncRNA分子。?lncRNA都經過詳細分類、注釋。?收錄了經實驗驗證的lncRNA的生物學功能和調控機制。?所有引物均經過多種樣品類型的驗證，充分滿足生物標記物鑒定的需要。?轉錄本特異性PCR引物可以明確且準確地檢測每個LncRNA異構體。 細胞轉染準備將含目的microRNA靶基因的報告基因載體、內參質粒和microRNAmimics或|共轉染293T或Hela細胞。常規技術服務實驗外包
人原代細胞分離技術：
成纖維細胞是來源于中胚層的一種間充質細胞。它被廣泛應用于細胞和分子的研究。這主要是因為因為它是一種較容易培養的，耐受性較好的細胞,因具有些特性,成纖維細胞可應用于從基因轉染到顯微注射等多種操作。血管動脈外膜的成纖維細胞，位于血管**外層的結締組織,在血管損傷修復中起重要作用。它們具有瞬時的形態變化和增殖能力,并促進動脈外膜中細胞外基質的聚集。這種變化在病理狀態下血管壁重塑中起著重要作用,這也預示著通過血管外膜成纖維細胞來進行特定位置的血管壁基因***以調節血管緊張度方面有巨大潛力。HBVAF分離自人大腦組織，原代凍存,冰凍運輸。每管細胞密度超過5x105/ml。細胞呈紡錘型,經Fibronectin免疫熒光鑒定。本細胞經檢測不含HIV-1、HBV.HCV.支原體、細菌、酵母螢和***。如采用ScienCell實驗室特制的培養基,可保證此細胞達到15次或以上的倍增。 常規技術服務實驗外包b。用甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳。檢測RNA純度和完整性。
專業提供分子生物學技術服務:高通量測序：人全基因組重測序、外顯子測序、宏基因組測序、RNA-seq、miRNA-seq、lncRNA-seq、單細胞測序、CHIP-seq；DNA水平：SNP檢測、甲基化檢測、CHIP；RNA水平：、功能分類PCR芯片、表達譜基因芯片、實時熒光定量PCR、原位雜交；蛋白水平：WB、抗體芯片、免疫組化、免疫熒光；報告基因實驗細胞實驗：細胞培養及轉染、干擾及過表達、細胞增殖、細胞周期、細胞凋亡、細胞遷移、細胞侵襲；生物信息學：芯片數據分析、高通量測序分析、個化分析方案；SCI協同服務：限量實驗整體外包服務（IF1-10）,SCI評估、潤色、翻譯、調整等服務。
英拜生物microRNA報告基因實驗流程：
靶點的預測利用Targetscan,miRanda,PicTar軟件得到目的microRNA的預測靶點序列。
2.獲得microRNA靶點序列根據提供的靶序列，合成兩條互補的單鏈DNA模板。或者，設計引物PCR擴增microRNA靶基因序列(lncRNA,circRNA全長序列或靶標序列)。
靶序列克隆將合成的兩條單鏈退火成雙鏈（具有粘性末端），或將PCR產物雙酶切，后連入經過同樣雙酶切的Psicheck-2載體中，連接產物轉化大腸桿菌DH5α。
4.陽性克隆鑒定。挑選轉化的菌落，PCR篩選含有插入片段的陽性克隆，測序驗證克隆的序列和目的microRNA靶序列一致。
5.細胞轉染準備將psicheck-2報告基因載體、microRNAmimics或microRNAnegativecontrol共轉染293T或Hela細胞。
6.熒光素酶檢測報告基因載體與microRNAmimics或microRNAnegativecontrol共轉染293T或Hela細胞24-72h后，進行雙熒光素酶檢測，確定目的microRNA的靶基因。
7.整理分析數據，得出結論。提供有microRNA靶序列的報告基因質粒、甘油保存菌株各一支。附實驗報告，包括載體構建過程，鑒定記錄，測序報告，細胞轉染，熒光檢測。 免疫組化技術服務利用了抗原與抗體特異性結合的原理。
英拜生物microRNA實時定量PCR技術服務流程如下：
引物設計、合成設計并合成目的microRNA的莖環RT引物、PCR引物。
樣品RNA抽提a．組織樣品：取適量（50～100mg）新鮮組織或正確保存的組織樣品，勻漿后抽提RNA。b．細胞樣品：取1×106～1×107細胞，吸去培養液后用TRIZOL試劑抽提RNA。
RNA質量檢測a．紫外吸收測定法測定RNA在波長260nm和280nm的吸收值，獲得RNA的濃度并通過A260/280及A260/230的吸收比值判斷RNA的純度。b．用甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳，檢測RNA純度和完整性。
注：用于microRNA實時定量PCR檢測的RNA樣品，必須高純度、完整，沒有RNase污染（降解的樣品不能用于實時定量PCR檢測），同時提取方法必須保證所得樣品包含完整的小RNA部分。逆轉錄合成cDNA利用莖環引物逆轉錄合成cDNA***鏈。實時定量PCR以合成的cDNA作為模板進行實時定量PCR擴增（同時測定每個樣品中U6snRNA含量作為內參以校正上樣誤差）。分析結果、提供實驗報告分析實時定量PCR結果，根據標準曲線定量樣品中的目的microRNA。提供實驗報告，包括詳細的實驗方法，實時定量PCR實驗數據和圖表。 英拜生物microRNA實時定量PCR技術服務流程:引物設計、合成設計并合成目的microRNA的莖環RT引物、PCR引物。安徽技術服務動物模型構建
另外,還提供短片段的測 序服務( 50-100bp)。 適用于細菌和病毒分型等研究領域。常規技術服務實驗外包
2.1標準服務流程1)客戶溝通,確認實驗位點,并進行相關分析,提示實驗可行性。2)建立實驗方案,并在此過程中和客戶保持密切溝通。3)大規模實驗,有嚴格的指控流程保證實驗結果可靠。4)補數據,盡可能提高樣本的使用率。2.2實驗數據質量控制流程1)所有分型信號要求信號清晰***,排除不確定信號干擾。2)每板數據中都有陰性對照,質控PCR和LDR污染數據。3)整個實驗服務流程有15%的雙盲重復對照,保證數據準確可靠。4)利用HWE原理進行數據評估。常規技術服務實驗外包
公司特色是以各式高通量二代測序為基礎，利用生物數據信息分析手段，通過英拜生物自有的分子、病理以及細胞實驗平臺，提供課題整體設計外包、撰寫SCI論文一站式服務。公司實驗平臺落座在漕河涇開發區浦江園區，實驗平臺開放參觀，客戶可隨時參觀實驗并參與實驗課題的進度，保證您的實驗是在您的指導下完成。
1.整體課題外包服務：RNA甲基化研究專題，外泌體研究專題，wnt/VEGF/toll等經典通路研究，設計的課題均具有后續實驗課題的延展性，為您的標書奠定較好的基礎
2.標書申請：提供標書課題設計、撰寫，標書部分基礎實驗的開展，設計的標書均符合科研前沿熱點，中標率很高。
3.提供熱點**文獻技術支持，探討科研前沿熱點研究：trfRNA，DNA/RNA甲基化，外泌體，自噬，WNT等相關研究
4.二代測序：轉錄組測序、smallRNA測序、snoRNA測序、TRF測序
5.芯片：信號通路pcr芯片蛋白芯片
6.表觀遺傳實驗：DNA甲基化實驗（BSP,MSP，焦磷酸測序），RNA甲基化實驗
7.實時定量PCR（mRNA,LncRNA,microRNA,circRNA）,WB，RNA功能驗證實驗(靶基因驗證，過表達，干擾),基因突變及SNP檢測，FISH，RNA-PULLdown，rip，chip實驗以及細胞增殖，凋亡，流式等細胞功能學實驗