Circ-0004872(本研究稱為““circMAPK1”)來自MAPK1基因的第2-4個外顯子,形成一個490 nt的重疊環狀轉錄本(圖1e)。Sanger測序證實了擴增的circMAPK1的頭尾剪接(圖1f)。接下來,我們研究了circMAPK1在GC細胞系中的表達水平。如圖1g所示,與正常的胃粘膜上皮細胞系相比,培養的GC細胞系中circMAPK1表達***下調。另外,circMAPK1*從cDNA中擴增,而不是從gDNA中擴增(圖1h),說明circMAPK1的環結構是由back-splicing產生的。然后我們進一步評估了circMAPK1的穩定性和定位。經過放線菌素D處理后,circMAPK1的半衰期明顯長于線性MAPK1(圖1i)。與MAPK1 mRNA的線性形式相比,circMAPK1對RNase R的降解具有抗性(圖1j)。隨后的細胞組分qRT-PCR分析(圖1k)和熒光原位雜交分析(圖1l)顯示,circMAPK1主要定位于細胞質而不是細胞核。在786-O細胞中穩定轉染靶向circSDHC的shRNA.推廣標書動物模型構建
因為CXCL13是一種趨化劑,可以促進表達CXCR5的細胞趨化,使用IHC染色評估其在CRC中的表達,結果顯示CXCR-5在結直腸*組織中的染色強于正常組織,說明M2極化巨噬細胞分泌的CXCL13主要作用于CRC細胞(Fig. 7d)。PMA預處理后的THP-1細胞轉染miR-934 mimics,并與加入anti-CXCL13抗體或IgG的SW480細胞或RKO細胞共培養。此外,上述TPH-1細胞液與敲除CXCR5的細胞共培養。體外transwell實驗顯示,在與miR-934過表達PMA處理的THP-1細胞的CM共培養組中,anti-CXCL13抗體抑制了CRC細胞的遷移和侵襲;轉染了shCXCR5的SW480和RKO細胞與miR-934過表達PMA處理的THP-1細胞共培養時,遷移和侵襲能力降低(Fig. 7e, f)。此外,小鼠體內肝轉移檢測表明,與對照組相比,用anti-CXCL13抗體或敲除CXCR5的CRC細胞的肝轉移菌落減少(Fig. 7g–i)。炎癥標書詢問報價circSDHC在ccRCC中過表達且其過表達與低存活率相關.
揭示轉錄因子如何隨著時間的推移在DNA、RNA和蛋白質水平上調節其靶標,對于定義基因調控網絡(GRN)和分配正常和疾病狀態的機制至關重要。RNA-seq是一種使用已建立的分析階段測量基因調控的標準方法。然而,目前可用的用于解釋有序基因組數據(在時間或空間上)的管道方法都沒有使用時間序列模型來分配GRN內的因果關系。此外,也需要將有序的RNA-seq數據與蛋白質-DNA結合數據相結合以區分直接與間接相互作用的方法。
TIMEOR是***個基于Web的自適應時間序列多組學管道方法,它可以推斷基因調控事件之間的關系。TIMEOR通過利用時間序列RNA-seq、基序分析、蛋白質-DNA結合數據和蛋白質-蛋白質相互作用網絡,解決了對確定因果調節機制網絡的方法的關鍵需求。
一、人胎肝和骨髓造血室的單細胞轉錄組
為獲取胚胎發育期間造血細胞的全部譜系,研究者從17 – 22 PCW的胚胎肝臟、股骨和髖骨中對表型確定的血液群體進行單細胞分類,并對15個胚胎的單個細胞進行scRNA-seq檢測(圖1)。基于差異表達分析和標準化表達***性排名前20的標記基因,標注了23個不同的群體,發現在肝臟或股骨中檢測不到任何T細胞或先天淋巴細胞(ILCs),單細胞分析顯示在所有免疫表型定義的干細胞和祖細胞群體中存在大量的轉錄異質性,其中一些表型祖細胞群體(如HSCs,MPPs,CMPs,GMPs,MEPs和CLPs)由10多個不同的轉錄表型定義群體組成,這進一步證明人類臍帶血的祖細胞室具有高度的異質性。此外,該研究分析表明當前使用的細胞表面標記物不能很好地預測人類胚胎造血祖細胞的轉錄狀態。 FMT處理***增加了SCI小鼠腸道菌群的豐富度。
有趣的是,我們發現內源性PGK1蛋白水平和LINC00926水平在5種乳腺*細胞系(MCF-7、T47D、ZR75-1、MDA-MB-453、MDA-MB-231)中均呈負表達。在相對轉移性細胞系MDA-MB-231中PGK1表達量比較高,LINC00926表達量比較低;而惡性程度較低的細胞系MCF-7中PGK1表達量較低,LINC00926表達量較高(圖1G)。敲除LINC00926后,MCF-7細胞中PGK1的表達***增加,而過表達LINC00926后,MDA-MB-231細胞中PGK1的表達***降低(圖1H)。這些結果表明,LINC00926下調PGK1的表達,可能與PGK1介導的乳腺*發展呈負相關。Tempol減輕PCOS大鼠腸道微生物失調.推廣標書動物模型構建
血清代謝產物的豐度也發生了***變化.推廣標書動物模型構建
DNA生物標志物
DNA生物標記物是MarkerDB中比較大的一類標記物。MarkerDB中的DNA生物標記進一步分為26021個與209種疾病相關的DNA突變標記、353個與70種疾病相關的SNP標記和23個與16種傳染病相關的微生物/病毒基因。DNA突變數據(和臨床批準的突變試驗)來自GeneticTestingRegistry,序列數據從GenBank中提取,DNASNP生物標記物的主要來源是數據庫GWAS-ROCS,疾病信息從OMIM或GeneticsHomeReference中提取,關于微生物/病毒生物標記基因的剩余數據通過原始文獻或專利檢索獲得。目前,MarkerDB中的所有DNA標記都有一個或多個疾病關聯,以及MarkerDBID、序列(標記了疾病變體)、詳細的基因描述(編碼區范圍內)、基因名稱/同義詞、一個或多個文獻參考和到其他在線數據庫的外部超鏈接. 推廣標書動物模型構建
公司特色是以各式高通量二代測序為基礎,利用生物數據信息分析手段,通過英拜生物自有的分子、病理以及細胞實驗平臺,提供課題整體設計外包、撰寫SCI論文一站式服務。公司實驗平臺落座在漕河涇開發區浦江園區,實驗平臺開放參觀,客戶可隨時參觀實驗并參與實驗課題的進度,保證您的實驗是在您的指導下完成。
1.整體課題外包服務:RNA甲基化研究專題,外泌體研究專題,wnt/VEGF/toll等經典通路研究,設計的課題均具有后續實驗課題的延展性,為您的標書奠定較好的基礎
2.標書申請:提供標書課題設計、撰寫,標書部分基礎實驗的開展,設計的標書均符合科研前沿熱點,中標率很高。
3.提供熱點**文獻技術支持,探討科研前沿熱點研究:trfRNA,DNA/RNA甲基化,外泌體,自噬,WNT等相關研究
4.二代測序:轉錄組測序、smallRNA測序、snoRNA測序、TRF測序
5.芯片:信號通路pcr芯片蛋白芯片
6.表觀遺傳實驗:DNA甲基化實驗(BSP,MSP,焦磷酸測序),RNA甲基化實驗
7.實時定量PCR(mRNA,LncRNA,microRNA,circRNA),WB,RNA功能驗證實驗(靶基因驗證,過表達,干擾),基因突變及SNP檢測,FISH,RNA-PULLdown,rip,chip實驗以及細胞增殖,凋亡,流式等細胞功能學實驗