浙江蛋白組學(xué)科研

在乳腺*樣本中，LINC00926的表達(dá)與PGK1的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(圖1 F)。有趣的是，我們發(fā)現(xiàn)內(nèi)源性PGK1蛋白水平和LINC00926水平在5種乳腺*細(xì)胞系(MCF-7、T47D、ZR75-1、MDA-MB-453、MDA-MB-231)中均呈負(fù)表達(dá)。在相對(duì)轉(zhuǎn)移性細(xì)胞系MDA-MB-231中PGK1表達(dá)量比較高，LINC00926表達(dá)量比較低；而惡性程度較低的細(xì)胞系MCF-7中PGK1表達(dá)量較低，LINC00926表達(dá)量較高(圖1G)。敲除LINC00926后，MCF-7細(xì)胞中PGK1的表達(dá)***增加，而過表達(dá)LINC00926后，MDA-MB-231細(xì)胞中PGK1的表達(dá)***降低(圖1H)。這些結(jié)果表明，LINC00926下調(diào)PGK1的表達(dá)，可能與PGK1介導(dǎo)的乳腺*發(fā)展呈負(fù)相關(guān)。嘌呤在細(xì)胞中執(zhí)行許多重要的功能。浙江蛋白組學(xué)科研

為了進(jìn)一步探討m6A修飾在FZD7 mRNA中的作用，我們構(gòu)建了三種FZD7突變體，其中一種突變體為***個(gè)m6A峰(FZD7- peak1 Mut)，另一種突變體為第二個(gè)m6A峰(FZD7- Peak2 Mut)，以及雙突變體(FZD7- peak1 &2 Mut;圖5)。與野生型相比FZD7 (FZD7-WT)突變?cè)诘诙6A峰和雙m6A峰值突變(FZD7-Peak2傻瓜和FZD7-Peak1&2Mut)野生型YTHDF1沒有反應(yīng)過度(7和8)圖5 h,面板,建議第二m6A峰FZD7 YTHDF1的主要網(wǎng)站的監(jiān)管。同樣，m6a結(jié)合能力的喪失完全消除了YTHDF1促進(jìn)FZD7 mRNA翻譯的作用(圖5H，圖9 12)。這些結(jié)果表明YTHDF1介導(dǎo)的FZD7的翻譯控制依賴于m6A修飾。江蘇骨折鼠模型科研巨噬細(xì)胞表型協(xié)調(diào)急性胰腺炎損傷后的炎癥和修復(fù)再生。

Il4ra缺陷小鼠的M2樣巨噬細(xì)胞減少和再生失調(diào)

為了探索再生過程中胰腺巨噬細(xì)胞的調(diào)節(jié)機(jī)制，我們進(jìn)行了基因集富集分析(GSEA)以比較第3天和第1天巨噬細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組譜。巨噬細(xì)胞的M2***和IL4刺激特征從第3天開始富含巨噬細(xì)胞。我們發(fā)現(xiàn)，表達(dá)IL-4和IL-13分別提高在第1天，和表達(dá)Il4ra自第1天升高，達(dá)到峰值在第3天。為了進(jìn)一步確定受體和配體的細(xì)胞來源，在AP損傷后***從胰腺中分離并比較了CD45.2+和CD45.2-細(xì)胞，有趣的是，Il4ra1被顯性免疫細(xì)胞上表達(dá)（CD45.2+），而IL4和IL13中主要表達(dá)于實(shí)質(zhì)細(xì)胞（CD45.2-）。此外，通過使用Il4ra缺陷小鼠，我們證明了IL4Rα信號(hào)在AP損傷后胰腺修復(fù)/再生過程中介導(dǎo)了M2巨噬細(xì)胞的極化。值得注意的是，與它們的對(duì)應(yīng)物相比，來自Il4ra-/-小鼠的胰腺在第3天和第5天具有更多的ADM結(jié)構(gòu)。總的來說，這些發(fā)現(xiàn)表明IL4/IL4Rα軸是AP恢復(fù)過程中胰腺巨噬細(xì)胞M2極化所必需的，發(fā)揮***功能來控制ADM形成的程度。

CircACTN4促進(jìn)體內(nèi)異種移植**的發(fā)生和轉(zhuǎn)移

為了評(píng)估circACTN4在體內(nèi)的致*作用，通過皮下注射和尾靜脈注射在裸鼠中建立人BC細(xì)胞**模型。用過表達(dá) circACTN4 慢病毒或 circACTN4 shRNA 慢病毒及其對(duì)照***的 MCF-7 細(xì)胞接種雌性裸鼠。結(jié)果表明，circACTN4過表達(dá)組異種移植**的體積和重量明顯大于對(duì)照組，而circACTN4敲低顯著抑制了**生長。與對(duì)照組相比，circACTN4的上調(diào)明顯增加了轉(zhuǎn)移性肺結(jié)節(jié)的數(shù)量，而circACTN4沉默顯著抑制了自發(fā)性肺轉(zhuǎn)移，侵襲性**細(xì)胞較少。此外，circACTN4 的過表達(dá)可以顯著促進(jìn)**血管生成，而 circACTN4 敲低顯著降低**微血管密度。WB結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，過表達(dá)或沉默circACTN4組的異種移植**組織中MYC的蛋白質(zhì)水平分別顯著增加或減少。 大黃酸導(dǎo)致嘌呤代謝正常化和腸道尿酸水平的降低。

二、YTHDF1缺乏可抑制胃*進(jìn)展和轉(zhuǎn)移

YTHDF1在不同胃*細(xì)胞株中的蛋白表達(dá)水平，遠(yuǎn)高于正常胃腺細(xì)胞GES-1。為了進(jìn)一步探討YTHDF1在胃*中的作用，采用了胃*細(xì)胞系、細(xì)胞系來源的異種移植(CDX)和PDX模型(圖2A)。首先，通過產(chǎn)生兩種穩(wěn)定的shRNA表達(dá)人胃*細(xì)胞株MGC-803和HGC-27，研究了YTHDF1的抑制作用，這兩種細(xì)胞株在所有被檢測的胃*細(xì)胞株中YTHDF1的表達(dá)相對(duì)較高(補(bǔ)充圖S2B)。YTHDF1基因敲除確實(shí)降低了胃*細(xì)胞的增殖(圖2B)。此外，在MGC-803和HGC-27細(xì)胞中YTHDF1敲除降低細(xì)胞的遷移和侵襲能力(圖2C)。隨后通過皮下注射YTHDF1敲除的MGC-803細(xì)胞到免疫缺陷裸鼠，研究YTHDF1的抑制是否會(huì)影響體內(nèi)胃*的發(fā)生。 英拜生物提供專業(yè)的編輯潤色團(tuán)隊(duì)保證服務(wù)到文章接收為止。轉(zhuǎn)錄組科研服務(wù)兩年

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為了驗(yàn)證MAO-A缺乏是否直接有助于減輕Maoa KO巨噬細(xì)胞的免疫抑制極化，進(jìn)行拯救實(shí)驗(yàn)。構(gòu)建MIG-Maoa逆轉(zhuǎn)錄病毒載體，利用該載體轉(zhuǎn)導(dǎo)Maoa KO BMDMs，并在這些巨噬細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)了MAO-A的過表達(dá)（圖3l-n）。MAO-A過表達(dá)***加劇了IL-4/ IL-13刺激的Maoa KO BMDMs的免疫抑制表型（圖3o-p）。綜上所述，這些結(jié)果表明，MAO-A作為一種自主因子，在***刺激下促進(jìn)巨噬細(xì)胞免疫抑制極化。

4、MAO-A通過ROS上調(diào)促進(jìn)巨噬細(xì)胞免疫抑制極化

接下來，研究調(diào)控MAO-A促進(jìn)巨噬細(xì)胞免疫抑制極化的分子機(jī)制。據(jù)報(bào)道，細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS；氧化應(yīng)激)會(huì)引起巨噬細(xì)胞的免疫抑制特征。MAO-A催化單胺的氧化脫氨，從而產(chǎn)生過氧化氫(H2O2)作為副產(chǎn)物，可以增加細(xì)胞內(nèi)ROS水平。因此，推測MAO-A可能通過上調(diào)TAM中的ROS水平，促進(jìn)TME中TAM的免疫抑制極化（圖4a）。為了驗(yàn)證這一假設(shè)，測量了從攜帶B16-OVA**的MaoaWT和KO小鼠中分離的TAMs中的ROS水平，并檢測到MaoaKOTAMs中ROS水平***降低（圖4b-c）。 浙江蛋白組學(xué)科研

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