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研究背景：外泌體已成為多種癌癥的重要生物標志物，并含有豐富的環(huán)狀rna(circRNAs)。然而，外泌體環(huán)狀rna用于診斷的潛力及其分子機制在結(jié)直腸癌(CRC)中的作用尚不清楚。
研究方法：通過RNA測序、exoRBase數(shù)據(jù)庫和組織微陣列鑒定CRC特異性外泌體環(huán)狀RNA。評估血漿外泌體環(huán)狀rna的診斷性能，在無癌作為對照組，癌癥前期患者、結(jié)直腸癌患者和其他類型癌癥患者中進行。相應的生物功能主要通過circRNA下拉探針、蛋白質(zhì)組學分析和RNA免疫沉淀分析進行評估細胞和小鼠模型。
研究結(jié)果：CircLPAR1被包裹在高穩(wěn)定性和可檢測性的外泌體中，并在血漿中表達外泌體在CRC發(fā)生期間顯著減少，但術(shù)后恢復。Exosomal circLPAR1在CRC診斷中顯示出癌癥特異性， ROC曲線顯示，外泌體circLPAR1能夠區(qū)分結(jié)直腸癌患者和無癌對照個體，并且AUC高于CEA和CA19-9（結(jié)直腸癌診斷的臨床生物標志物），外泌體circLPAR1、CEA和CA19-9的組合能夠增加結(jié)直腸癌診斷的敏感性和特異性。此外，circLPAR1在CRC組織中下調(diào)，并與總生存期相關(guān)。機制上，外泌體circLPAR1被CRC細胞內(nèi)化，并抑制腫瘤可能是因為外泌體circLPAR1直接與eIF3h結(jié)合特異性抑制了METTL3-eIF3h間的相互作用，降低癌基因BRD4的翻譯。
重點：外泌體標記實驗，作者將circLPAR1-Exos進行了熒光標記，熒光顯微鏡顯示HCT116和DLD1細胞的細胞質(zhì)中存在PKH67綠色熒光染料，而非Exos組中未觀察到PKH67綠色熒光染料，表明HCT116/DLD1-Exos被結(jié)直腸癌細胞迅速吞噬。
文中所用：外泌體綠色熒光標記染料（PKH67）(cat# UR52303) 來自Umibio系列產(chǎn)品。
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